5.技术保障： 限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒载体 的发现和运用。
思考：
如何用基因工程的手段获得 真正能够除甲醛的矮牵牛？ 材料：
矮牵牛细胞 √ 兔肝细胞 √ 兔红细胞 ×
……
二、基因工程的工具
1.限制性核酸内切酶 2.DNA连接酶 3.载体
1.限制性核酸内切酶
①来源：主要从原核生物中分离纯化出来。 ②作用：a.特异性识别双双链链DDNNAA分分子子的某种特定核
目的基因的表达 • 第四步将：目筛的选基含因有导目入的受基体因的细受胞体细胞
• 第五步：目的基因的表达
思考： 如何用基因工程的手段获得真正能够除甲醛的矮牵 牛？ 材料：矮牵牛细胞、兔肝细胞、的甲醛酶基因 限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体
• 第一步：获取目的基因
• 第二步：形成重组DNA分子
• 第三步：将重组DNA分子导入受体细胞
DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( C )
A.①②③④ B.①②④③ C.①④②③ D.①④③②
(3)载体
①作用 作为运载工具，将外源基因送入受体细胞。
②常用载体 质粒：
在细菌中独立于拟核之外，为双链环状DNA分 子，能自主复制和稳定存在，常含有特殊的抗生 素抗性基因作为标记基因，以供目的基因筛选。
上→农杆菌→导入 卵(受精卵)→显微 重组表达载体与
植物细胞→整合到 注射→受精卵发育 感受态细胞混合
受体细胞的染色体 →获得具有新性状 →感受态细胞吸
DNA上→表达
的动物
收DNA分子
练习：(2016·4月浙江选考 节选)
兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，拟利用基 因工程技术将基因E转入矮牵牛中，以提高矮牵牛对甲 醛的代谢能力，请回答： 从兔肝细胞中提取mRNA，在________酶的作用下形成 互补DNA，然后以此DNA为模板扩增得到基因E。在相 关酶的作用下，将基因E与Ti质粒连接在一起，形成 ________，再导入用氯化钙处理的________，侵酸之间的磷酸二酯键。 ③结果：产生粘性末端或平末端。
GA A T T C C T T A AG
2.DNA连接酶
作用： 将具有末端碱基互补的DNA片段连接在一 起，形成磷酸二酯键。
G C T TAA
AATTC G
练习： 如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变
化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、
逆转录 重组DNA分子(重组质粒) 农杆菌
总结
一、基因工程的概念 二、基因工程的工具 三、基因工程的基本操作步骤
喜欢花的人是会去摘花的，然而爱花的人则会去浇水。 现代的婚姻并不是情感的产物，更多的是竞争的结晶，选配偶其实就是变相的竞争上岗，而小三就是原配最大的竞争对手。 君子坦荡荡，小人长戚戚。——《论语·述而》 勇敢地接受挑战，不断地超越自我，这样才能发出你的无限潜能。 我们每一个人都应该有更多的同情，更多的爱，比维持我们生存需要的多得多，我们应该把它分散给别人，追求是生命之光。 因为一无所有这才是拼下去的理由。 不要在你的智慧中夹杂着傲慢。不要使你的谦虚心缺乏智慧。 好好的管教你自己，不要管别人。 在没有明智的家庭教育的地方，父母对孩子的爱只能使孩子变成畸形发展。这种变态的爱有许多种，其中主要的有”1娇纵的爱；2专横的爱；3 赎买式的爱。 如你赢不了，至少你可以给予你的对手一个微笑。 伟大的事业，需要决心，能力，组织和责任感。 ——易卜生 不能强迫别人来爱自己，只能努力让自己成为值得爱的人。
• 第四步：筛选含有目的基因的受体细胞
• 第五步：目的基因的表达
第三步：将重组DNA分子导入受体细胞
生物种 类
常用方 法
受体细 胞
转化过 程
植物细胞
动物细胞
微生物细胞
农杆菌转化法
显微注射技术 感受态细胞法
体细胞
受精卵
细菌细胞
将目的基因插入到 将含有目的基因的 Ca2＋处理细胞
Ti质粒的T－DNA 表达载体提纯→取 →感受态细胞→
③其他载体：噬菌体、动植物病毒等。
思考： 如何用基因工程的手段获得 真正能够除甲醛的矮牵牛？ 材料：
矮牵牛细胞 兔肝细胞
限制性核酸内切酶
DNA连接酶
载体
如何操作？
三、基因工程的基本操作步骤
活动： 给每一步骤排序，并说明该操作的目的和该步骤利 用的工具。
• 第一步形：成获重取组目D的N基A分因子 • 第二步筛：选形含成有重目组的DN基A分因子的受体细胞 • 第三步目：的将基重因组的DN获A分取子导入受体细胞
基因工程 小结
思考：
如何用基因工程的甲手醛段获得真正能够除
甲醛的矮牵牛？
一、基因工程
1.广义概念： 把一种生物的遗传物质移到另外一种生物的 细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信 息在受体细胞中表达。
2.核心：
构建重组DNA分子
3.原理：
基因重组
4.理论基础： DNA是生物遗传物质的发现，DNA双螺旋 结构的确立以及遗传信息传递方式的认定。