2. 纳米金制备
2.1 试剂和设备
84消毒液、酸缸、去离子水、回流装置、电磁搅拌、氯金酸、柠檬酸三钠、0.22微米滤器、分光光度计、投射电子显微镜
2.2 实验原理
柠檬酸三钠还原氯金酸，形成胶体金颗粒。

一般可以制备16-147nm粒径的胶体金。

胶体金颗粒的大小取决与制备时加入柠檬酸三钠的量。

文献显示，200ml 0.01%氯金酸+6ml 1%柠檬酸三钠，可制备13nm的纳米金；200ml 0.01%氯金酸+2ml 1%柠檬酸三钠，可制备41nm的纳米金.
2.3 胶体金质量的影响因素
1）还原剂类型
2）搅拌速度
3）反应时间（沸腾时间、加入柠檬酸三钠的时间）
4）器皿的清洁度
5）环境、水质、试剂
6）pH值
2.4 相关溶液的配制
1）0.01%氯金酸溶液。

0.02g氯金酸+200ml去离子水。

2）1%柠檬酸三钠溶液。

1g柠檬酸三钠+100ml去离子水。

2.5 实验步骤
1）彻底清洗器皿。

84消毒液浸泡，酸缸过夜，去离子水冲洗，烘箱烘干备用。

2）纳米金制备。

0.01%氯金酸200ml，在油浴中加热至沸腾。

同时，使用磁力搅拌子以最大速率搅拌。

当冷凝管中出现第一滴回流时，加入新鲜配制的1%柠檬酸三钠溶液6ml。

颜色迅速变化，由黄色→黑色→紫色→深蓝→酒红色，至溶液变为透明的酒红色反应15min，停止加热，并继续搅拌，冷却至室温。

用双蒸水定容至原体积。

3）保存。

用0.22微米的硝酸纤维尼龙膜过滤，4摄氏度保存。

2.6 纳米金制备问题
1）常用试剂的处理方式
2）纳米金储存时间，容器和温度
3）200ml 0.01%氯金酸能制备多少纳米金
4）纳米金颗粒粒径的控制方式
5）器皿的清洁方式
6）纳米金标记蛋白。