二级种实质就是一级母种的扩大培养，一支母种可转接5瓶二级种，一瓶二级种可转接三级种20瓶袋左右。

二级种配方：
1、锯末80斤、玉米芯50斤、麸子15斤、玉米面10斤、尿素0.5斤、硫酸镁0.4斤，磷酸二氢钾0.3斤，石膏1
斤，碳酸钙/斤，含水量75%。

2、玉米芯或棉子壳80斤，玉米面15斤，尿素0.5斤，磷酸二氢钾0.3斤，硫酸镁0.4斤，白灰1斤，碳酸钙1
斤，含水量65%。

3、枝条二级种，各种阔叶树的新鲜树枝，要求直径1-2厘米，断成长6厘米的小段装入750毫升罐头瓶中，装到八分瓶高度加满营养水、营养水配方、水100斤、土豆5斤煮水、硫酸镁半斤、二氢钾半斤，加满水后，盖上
丙烯塑料盖套好皮套。

4、锯末100斤、麸子10斤、玉米面10斤、树枝100斤，断成长6厘米小段，白糖1斤、硫酸镁半斤、二氢钾半斤
、尿素半斤、石膏2斤、碳酸钙1斤。

含水量70%。

把上述原料均匀拌合在一起，开始装瓶装袋。

装瓶标准：每瓶能装干料2.5两，装完湿料连瓶称重应为1.3斤，这就证明装料量，松紧度都很适度。

料中间打一个眼以利菌丝快速生长，装完瓶后马上擦净瓶身，盖上丙烯塑料，套好皮套，进行常压灭菌100度保持10小时以上。

灭菌结束后，瓶温降到30度以下搬入接种室中，接种前必须进行严格消毒----用629消毒剂或气雾消毒盒或电子接种器配合使用。

一支生产母种可转接5瓶二级种，接完后马上放入25---27度的恒温箱也可以放在能保持25度条件下培养。

每3--5天检查一次，把长势不好、不纯的及时挑出。

经35天左右培养，就能长满瓶，满瓶后应再巩固培养5天，才能转接三级种或直接栽培天麻。