目录
1. 检测原理
2. 标本采集与处理
2.1 受检者的准备
2.2 静脉采血
2.3 抗凝剂
2.4 标本处理
3. 试剂
3.1 试剂
3.2 校准血清
3.3 试剂与校准血清的稳定性
4. 仪器
5. 操作
6. 计算
7. 操作性能
7.1 精密度
7.2 准确度
7.3 灵敏度
7.4 可报告范围
7.5 特异性
7.6 干扰
8. 参考值
9. 临床意义
附录A: 参数
1. 检测原理
反应生成的醌亚胺在505nm波长有最大吸收,所产生的颜色强度与血清中尿酸含量成正比,再通过与同样处理的尿酸标准溶液比较,经过计算可求出血清中尿酸的含量。
试剂中的抗坏血酸氧化酶可排除抗坏血酸对结果的影响,测定尿酸所用的酶反应如下:
尿酸酶
尿酸+O2 +2H2O ------------ 尿囊素+CO2 +2H2O2
过氧化物酶
H2O2+4-氨基安替比林+2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸---------------醌亚胺+H2O
2.标本采集与处理
2.1 受检者的准备:
病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血:
除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂:
血浆使用0.1mg/ml肝素作为抗凝剂。
2.4 标本处理:
血标本室温放置30min~45min后离心分离血清或血浆,在两小时内检测完毕;如两小时内不能检测完毕,将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3.试剂
3.1 试剂:
本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司UA试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:
尿酸标准液:590umol/L
3.2 尿酸校准血清:
使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
校准频次:
空白定标:每日需做试剂空白定标。
全点定标:试剂换批号使用时或质控结果超过规定的±2SD范围,需要全点定标。
3.3 试剂与校准血清的稳定性:
原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。
试剂开瓶后,在仪器中至少可保存30天。
试剂储存在18-22℃稳定28天,试剂应避免污染。
试剂R1, R2颜色为无色,当试剂变色,按照试剂失效处理。
多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期,复溶后-20℃保存,可稳定一个月,只可冻融一次,避免反复冻融。
参见校准血清说明书。
试剂盒配备的水标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期,开瓶后2-8℃储存避免污染,可稳定2个月。
4.仪器
KONELAB 30型号仪器。
性能:波长505nm,仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。
5.操作
样品为血清或肝素抗凝血浆。
本法为终点法。
参数见后附,附录A。
试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作,见仪器操作规程。
6.计算
ΔA测定
C = ————×C o
ΔA标准
式中:
c——测定尿酸浓度,μmol/L;ΔA = A2 - A1
ΔA测定——标本管吸光度;ΔA标准——标准管吸光度;
C O——校准血清尿酸浓度,μmol/L;
7.操作性能
7.1 精密度:
批内CV≤8.3%,批间CV≤10.0%。
7.2 准确度:
检测结果的相对不准确度≤±10%。
7.3 灵敏度:
尿酸浓度为:330μmol /L时,显色吸光度为0.123~0.134。
7.4 可报告范围:
样本:R1:R2 =1:40:10时,测定上限为1180μmol /L。
7.5 特异性:
测量值在给定值的95%-105%范围内。
7.6 干扰:
内源性干扰物为Hb 1000mg/ml、TG 2000mg/ml、BIL 30mg/ml、VitC 300mg/ml对测试结果无明显影响。
8.参考值
男:210~430μmol /L;女:150~360μmol /L。
9.临床意义
尿酸是核酸中嘌呤分解代谢的最终产物,由肾脏排泄,随尿液排出体外。
肾脏疾病如急慢性肾炎、肾结石、痛风、以及体内核酸分解代谢过盛的疾病,如慢性白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等可使尿酸量增高;而恶性贫血及应用ACTH、皮质素、阿斯匹林等药物时,血中尿酸量下降。
附录A: 参数。