【关键词】川乌； 新乌头碱； 次乌头碱； 高效液相色谱法 【基金项目】本文为四川省教育厅研究项目（ 12ZA081； Sc － mnu1115） ； 绵阳市科技局研究项目（ 12S002 － 2） 研究成果。 【作者简介】徐辉 （ 1991 ～ ） ，男，绵阳师范学院化学与化学工程学院学生； 研究方向： 天然产物分离提取与检测
mg，次乌头碱标准品 3． 1 mg，置 10 mL 容量瓶，以色谱级甲醇 定容至刻度，得混合标准溶液。浓度分别为 520，310 μg ﹒ mL － 1 ，置于冰箱备用。
（ 四） 供品溶液的制备。将干燥至恒重的供试样品西昌 布托川乌，过 0． 33 mm 筛，称取约 1． 0 g 样品，置于 50 mL 具 塞三角瓶，加浓氨水润湿 80 min，加入 20 mL 氨水饱和乙醚溶 液，超声波萃取 20 min，置于冰箱冷藏过夜，取出放置常温过 滤，滤渣用氨水饱和乙醚溶液超声波萃取 3 次，每次 约 10 mL，合并滤液，水 浴 挥 干 氨 水 饱 和 乙 醚 溶 液，用 甲 醇 定 容 至 10 mL，用微孔滤膜（ 0． 45μm） 过滤，取续滤液待测。
谢林雨，上海大学环境与化学工程学院学生； 研究方向： 环境分析与检测 林森、边清泉，绵阳师范学院化学与化学工程学院 【通讯作者】边清泉，绵阳师范学院化学与化学工程学院
川乌为常用中药，多年生草本，来自毛茛科植物卡氏乌 头（ Aconitum carmichaeli Debx． ） 的干燥母根，又被称为五毒、 铁花等。常在 灌 木 丛 和 山 地 草 坡 中 生 长，多 分 布 在 我 国 山 东、四川、广西等省，以 及 长 江 中 下 游，用 平 地 肥 沃 的 砂 质 土 壤栽培，以四川栽培为主； 其道地川乌产地在四川西昌。川 乌具有较高的药用价值，祛风除湿，温经止痛； 有扩血管、抗 炎、降压作用； 用于治疗风寒湿痹、心腹冷痛、寒疝作痛、关节 疼痛等病症； 能刺激皮肤，继而有麻木感产生，故可用作镇痛 剂。但其毒性较强，应注意川乌的禁忌。现代研究发现川乌 脂溶性有效成分主要为生物碱化合物： 新乌头碱、次乌头碱 等。本试验以西昌布托川乌中新乌头碱、次乌头碱两种酯溶 性活性成分为研究对象，为西昌布托川乌的开发利用提供科 学依据。
Industrial & Science Tribune 2012.（11）.17
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（ 四） 线性范围考察。分别精密吸取 1． 0 μL、2． 0 μL、5． 0 法符合要求。在室温条件下，取西昌布托川乌供试品溶液分
一、实验部分 （ 一） 仪器和材料。日本岛津高效液相色谱系统 （ LC － 20AT 输液泵，CLASS － vp5． 0 色谱工站，SPD － M20A 二极管 阵列检测器，CTO － 6A 柱温箱） ； 数显恒温干燥箱（ 101 － 2A 型） ； SZ － 93 型自动双重纯水蒸馏器； AY120 电子天平（ SHIMADZU） ； 新乌头碱、次乌头碱标准品（ 批号： 110799 － 9905； 11079 － 9403） ，均购自中国药品生物制品检定所； 川乌（ 西昌 布托） 购自绵阳天诚大药房。色谱级甲醇，其余所用试剂均 为分析纯，二次重蒸水。 （ 二） 色 谱 条 件。 色 谱 条 件： 色 谱 柱 PLATISILTMODS （ 250 mm × 4． 6 mm，5 μm） ； 流动相： 甲 醇 － 水 － 三 乙 胺 （ 65： 34： 1） 。柱温为 35 ℃ ，流速： 1． 2 mL / min，检测波长： 240 nm，进样量为 20 μL。理论塔板数按新乌头碱、次乌头碱计算 均 ＞ 4500。组分基线分离均大于 1． 5。 （ 三） 对照品溶液制备。准确称取新乌头碱标准品 5． 2
二、方法与结果 （ 一） 检测波长的选择。利用二极管阵列检测器在本实 验条件下对各目标组分进行全波段紫外扫描，两种酯溶性活 性成分的最大吸收波长分别为 230 nm，240 nm。综合考虑杂 质峰与目标成分的最大紫外吸收波长和该波长处待测组分 能够基线分离，以及 DAD 检测器灵敏度等因素，满足分析要 求的波长为 240 nm，因此确定 240 nm 为本实验的检测波长。 （ 二） 流动相的优化。在已有文献方法的基础上，本实验 通过选择、比较、优化流动相，最终确定流动相为流动相： 甲 醇 － 水 － 三乙胺（ 65： 34： 1，V / V / V） 。在该流动相条件下，2 种待测组分之间及与其他组分之间的基线分离 Ｒ 均大于 1． 5，且保留值适宜。 （ 三） 供试品溶液制备条件选择。本实验优化对比了冷 热浸取、加热回流 提 取、索 氏 提 取、超 声 提 取 等 提 取方 法，其 中超声提取速度快、效率高、简便易行，检测其残渣无待测组 分的特征峰，提取完全。用氨水饱和乙醚溶液、无水乙醇、乙 醚为溶剂分别超声提取样品中的目标组分，结果提取效果最 佳的为氨水饱和乙醚溶液。
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HPLC 法测定川乌中新乌头碱和次乌头碱的含量
□徐 辉 谢林雨 林 森 边清泉
【内容摘要】目的： 建立川乌中新乌头碱、次乌头碱含量的高效液相色谱法检测方法。方法： 采 PLATISILTMODS 色谱柱（ 250 mm × 4． 6 mm，5 μm） ，流动相： 甲醇 － 水 － 三乙胺（ 65： 34： 1） ，柱温： 35 ℃ ，流速为 1． 2 mL / min，检测波长为 240 nm。结果： 新乌头碱、次乌头碱的线性范围分别为 0． 52 ～ 5． 2 μg（ r = 0． 9999） ，0． 31 ～ 3． 1 μg（ r = 0． 99999） 。 平均回收率新乌头碱为 98． 6% （ ＲSD 为 0． 96% ） ，次乌头碱为 99． 4% （ ＲSD 为 0． 67% ） 。结论： 该方法简便易行、 准确可靠，可供川乌有效成分含量分析及川乌药材质量控制参考。