微生物形态学检验
邱 宗 文
第三军医大学附属新桥医院
细菌的形态与结构

细菌基本形态有三种：
ƌ球菌、杆菌、螺形菌

细菌基本结构包括：
ƌ细胞壁、细胞膜、细胞质、核质

细菌的特殊结构有：
ƌ荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢
真菌的形态与结构


真菌形态有两种类型：
单细胞型：呈圆形或卵圆形，常见于酵母菌和酵母样菌 多细胞型：多呈丝状，分支交织成团、称为丝状菌，通称霉菌
ห้องสมุดไป่ตู้
炭疽芽孢杆菌 B.anthracis

形态与染色：为致病细菌中最大的革兰阳性杆菌， 两端截平，体外培养后形成长链，排列呈竹节形。 在体内常单个存在或短链，有荚膜，在人工培养基 上可见芽孢，卵圆形并位于菌体中央，菌体不膨大

培养特性：在血平板上形成较大、灰白边缘不整齐 菌落。在营养琼脂上形成灰白色、扁平、干燥而无 光泽、不透明、边缘不整齐的菌落，对青霉素敏感


真菌的基本结构：
菌丝—由孢子生出芽管，逐渐延长呈丝状 孢子—是真菌的生殖结构，真菌繁殖的微小单位
细菌形态学检查


不染色标本的检查：
主要用于检查细菌动力及运动状况，包括湿片法、 悬滴法、毛细吸管法


染色标本的检查：
观察细菌形态、大小、排列、染色特性、以及荚 膜、鞭毛、芽孢、异染颗粒等结构，有助于细菌 的初步认识或诊断

细菌特殊结构：芽孢大小、位置、鞭毛数目及位置等
细菌培养特性

营养要求：简单或复杂 生长特性：快或慢 气体环境：需氧、兼性厌氧或厌氧

适宜生长温度：25℃、35-37℃、42℃
菌落特征



大小：一般可分为大＞3mm、中2-3mm、小＜2mm 表面：光滑、粗糙、粘液样、皱纹、放射状、同心圆等 透明度：透明、半透明、不透明 外形：圆形、不规则等 高度：扁平、凸起、脐形等 边缘：整齐、锯齿状等 光泽：有光泽、无光泽等 色素：金黄色、白色、乳白色、绿色、紫色、黑色等 气味：酸味、生姜味、恶臭味 溶血性：完全溶血、不完全溶血、不溶血
蜡样芽孢杆菌 B.cereus

形态与染色：革兰阳性大杆菌，卵圆形芽孢，位于 菌体中央，菌体不膨大

培养特性：在血平板上形成较大浅灰色、似毛玻璃 样菌落。在营养琼脂上形成灰白色、不透明、圆形、 凸起的较大菌落，边缘常呈扩展状，迎光看似白蜡 状。故名蜡样芽孢杆菌
枯草芽孢杆菌 E.subtilis
普通变形杆菌 P.vulgaris

形态与染色：革兰阴性杆菌，多数为单个存在、也
可见成对或短链状排列，周身鞭毛

培养特性：在血平板上蔓延生长、布满整个平板表 面（纤徒现象），麦康凯上形成圆形、扁平、无色 （不发酵乳糖）半透明菌落
霍乱弧菌 V.cholerae

形态与染色：革兰阴性、菌体弯曲呈弧形或逗点状， 米泔样粪便直接涂片染色，可见头尾相接、平行排 列的弧菌，悬滴法直接镜检可见活泼的运动
粪肠球菌 E.faecalis

形态与染色：阳性球菌、单个、成双或短链排列

培养特性：在血平板上形成较小、灰白色、湿润、 凸起、有α或β溶血环的菌落，在麦康凯琼脂平板 上形成较小、干燥、粉红色菌落
脑膜炎奈瑟菌 N.meningitidis

形态与染色：阴性双球菌、肾形或咖啡豆状，常成 双排列，凹面相对，在脑脊液直接涂片中常位于中 性粒细胞内
3、粗糙型：菌落呈纽 扣状，表面粗糙，或菌 落中央隆起边缘扁平
4、粘液样：菌落光滑、隆 起、呈粘液状，嵌入培养 基内，不易挑起，似肺克
5、侏儒型：生长缓慢、培 养24h后才有小菌落生长

铜绿假单胞菌特征：蓝绿色或荧光色素，有生姜味， 动力和氧化酶试验阳性
荧光假单胞菌 P.fluorescens


培养特性：具有耐硷性，pH9.2时仍能生长，硷 性蛋白胨水增菌时液体浑浊、表面形成菌膜；在 TCBS平板上形成较大、黄色菌落
非发酵阴性杆菌 Nonfermentative

基本特征：在最初分离培养基上，如果有菌落生长 并有下列三种情况之一，可认为有非发酵菌存在
在血平板上生长而在麦康凯上不生长或生长很差，菌落呈无 色、针尖大或完全看不到生长 麦康凯上生长的无色菌落（不发酵乳糖），氧化酶试验阳性 在三糖铁或克氏双糖培养基内，斜面与底层均不变色，表明 该菌不分解葡萄糖与乳糖，提示为非发酵菌 注意：不能在麦康凯、SS及其他含糖培养基上作氧化酶试验， 而应在营养琼脂或半固体培养基上做氧化酶试验，因糖分解 产酸会影响氧化酶试验结果

培养特性：在沙氏培养基或营养琼脂上培养5-7日 可见菌落，菌落表面有皱折、呈颗粒状、黄色或深 橙色；在血琼脂平板上菌落较小、凸起、呈白色
肠杆菌科 Enterobacteriaceae



基本特征：在血琼脂平板上生长，在麦康凯、伊红 亚甲蓝、中国蓝琼脂平板上形成发酵和不发酵乳糖 的菌落；在三糖铁或克氏双糖底层、上层产酸、产 气、氧化酶试验阴性 基本鉴定试验要求：

培养特性：初次分离需在5-10%二氧化碳环境中 生长，血平板上形成灰白、光滑、湿润、有光泽、 透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落。在巧克 力平板上形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰兰色 的似露滴状菌落
淋病奈瑟菌 N.gonorrhoeae

形态与染色：阴双球菌、成双、肾形排列。生殖道 分泌物直接涂片，急性期常位于白细胞内、慢性期 位于白细胞外
产气荚膜杆菌 C.perfingens

形态与染色：革兰阳性粗大杆菌、两端钝圆、单个 或成双，芽孢卵圆形、位于菌体中央或次极端、有 荚膜、无鞭毛

细菌分离培养及鉴定

细菌分离培养：使细菌在平板上分散生长，便
于观察菌落特征，也易于挑取单个菌落进行生 化鉴定或血清学试验 细菌鉴定：形态与培养特性：形态、染色、培 养特性和菌落特征是鉴定细菌的初步依据

细菌形态与染色特点

染色性：革兰阳性、阴性，抗酸染色阳性、阴性等
形状、大小和排列：球菌、杆菌、螺形菌，菌体大小、 单个、成双、短链、葡萄状等
杆菌肽敏感实验＞10cm
肺炎链球菌S.pneumoniae

形态与染色：呈矛头状， 成双或链状，有荚膜
荚膜染色
纯培养
痰液

培养特性：在5-10%二氧化碳环境中生长良好， 血平板上形成细小、圆形、中央呈脐窝状，表面光 滑、灰色、扁平，周围有草绿色溶血环，部分菌株 与典型菌落不同，不是中央凹陷，而是湿润、透明 的粘液样菌落

形态与染色：阴性杆菌、单个或呈双排列、有时呈 现丝状或链状

培养特性：在血平板上形成圆形、光滑、边缘整齐 的菌落，部分菌落呈粘液状；在麦康凯上形成粉红 色菌落，48h后菌落呈深红色，部分菌落呈粘液型
紫色杆菌 C.violaceum

形态与染色：阴性杆菌、具有极端鞭毛和周鞭毛 培养特性：在血平板上形成圆形、光滑、β溶血、 紫黑色菌落，在麦康凯上呈紫色菌落

形态与染色：革兰阴性杆菌，菌体细长，有周鞭毛

培养特性：在麦康凯上形成无色、透明菌落，SS平 板上呈无色、透明菌落、但大部分菌落中央呈黑色
肺炎克雷伯氏菌K.pneumoniae

形态与染色：革兰阴性杆菌，单个、成双或短链排
列，荚膜染色可见外周有透明、环状荚膜

培养特性：在血平板上形成较大、圆形、凸起、灰白色、不 溶血菌落；血平板上极少数菌株可出现较大、粗糙型、野菊 花状菌落。麦康凯上形成隆起、大而粘液样、易融合的粉红 色菌落，接种环挑取呈丝状粘连

培养特性：初次分离需在5-10%二氧化碳环境中 生长，血平板上形成灰白、光滑、湿润、有光泽、 透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落。在巧克 力平板上形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰兰色 菌落
白喉棒状菌 C.diphteriae

形态与染色：革兰阳性，细长微弯、菌体一端或两 端粗大，呈棒状，排列不规则，菌体一端或两端可 见异染颗粒

培养特性：在血平板上形成较小、圆形、凸起、光 滑、灰白色菌落，似干酪状，易碎成两半，无或狭 窄溶血环，在亚啼酸钾血琼脂平板上形成黑色或灰 黑色菌落
产单核细胞李斯特氏菌L.monocytogenes

形态与染色：革兰阳性小杆菌，直或微弯、无 芽孢、无荚膜

培养特性：在血平板上形成较小、圆形、光滑、而 有β溶血环的菌落，在液体培养基中呈均匀浑浊生 长，在半固体培养基中，动力字穿刺线向四周蔓延 生长，呈倒伞状
形态与染色：阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、端鞭毛 培养特性：在麦康凯上呈无色半透明菌落，在营养 琼脂上形成荧光色的菌落
恶臭假单胞菌 P.putida


形态与染色：阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、极端鞭毛 培养特性：在麦康凯上呈较大无色、湿润菌落，在营 养琼脂上形成黄绿色菌落，紫外线下可见荧光
鲍曼不动杆菌 A.baumannii
放射根瘤菌R.radiobacter

形态与染色：阴性杆菌、单个或成双、有周鞭毛 培养特性：在血平板上形成灰白色、光滑、湿润、 凸起、无溶血环的菌落，在麦康凯上呈无色、湿润、 粘液样菌落、时间延长时呈淡粉红色
流感嗜血菌Haemophilus


形态与染色：阴性短小杆菌、两端钝圆，粘液型菌株有荚膜 培养特性：在5-10%二氧化碳中可促进生长，生长需Ⅴ、Ⅹ两 种因子，适宜培养基是巧克力平板。在巧克力平板上形成微 小、无色透明似露滴状菌落，在血平板上形成极小、圆形、 透明菌落，并有“卫星现象”



铜绿假单胞菌 P.aeruginosa

形态与染色：阴性杆菌、细长，菌体一端有单鞭毛