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高二年级生物选修三基因工程知识点总结
【一】
DNA 具有专一性。

(3)结果：经限制酶切割产生的DN*段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端.
2.“分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较：
①.相同点：都缝合磷酸二酯键。

链连接酶DN*
(2)最常用的载体是质粒：
它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

(3)其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒
基因工程的基本操作程序
第一步：目的基因的获取
1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。

2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。

人工合成
(1)启动子：是一段有特殊结构的DN*段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。

(2)终止子：也是一段有特殊结构的DN*段，位于基因的尾端。

(3)标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

常用的标记基因是抗生素基因。

第三步：将目的基因导入受体细胞
1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内
2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA
杂交。

3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中
提取
蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。

4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。

如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。

白质，以满足人类的生产和生活的需求。

(基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质)
(1)蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质
(2)蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。

(3)基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)以
(注
序列
DNA
的发现，DNA合成和测序仪技术的发明等。

2.基因工程的原理及技术
基因工程操作中用到了限制酶、DNA连接酶、运载体
3.基因工程的应用
(1)在农业生产上：主要用于提高农作物的抗逆能力(如：抗除草
剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等)，以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。

(2)基因治疗不是对患病基因的修复，基因检测所用的DNA分子只有处理为单链才能与被检测的样品，按碱基配对原则进行杂交。

;基因
都具有发育成完整生物体的潜能。

考点细化：
①都具有该生物全部遗传信息，因此从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。

②细胞在生物体内没有表现出全能性的原因是基因选择性表达。

③植物细胞的全能性得以实现的条件是离体，合适的营养和激素，无菌操作。

④在生物的所有的细胞中，受精卵细胞的全能性。

(3)植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物
⑤在植物组织培养脱分化过程中，需要植物激素
⑥植物组织培养全过程中都需要无菌，愈伤组织之前不需要光照
(4)植物组织培养技术的用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。

考点细化：
①用植物体的茎尖、根尖来获得无病毒植物
②人工种子中人工胚乳相当于大豆种子的子叶，人工种子与正常种子相比发芽率高。

体
障碍
2.动物的细胞培养与体细胞克隆
(7)动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体、胚胎移植等
(8)动物细胞培养经过原代培养和传代培养
考点细化：
①动物细胞培养液的成分有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等
②动物细胞培养基液体，植物细胞培养基固体，培养的动物细胞
体融合只能用物理、化学方法;最终目的不同：植物原生质体融合最终是为了获得杂种植株，动物细胞融合最主要目的是获得单克隆抗体。

(10)单克隆抗体与血清抗体相比特异性强、灵敏度高并可大量制备
(11)熟悉单克隆抗体制备过程。

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考点细化
①生产杂交瘤细胞要用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合
②注射相应抗原后，从小鼠脾脏中提取出B淋巴细胞
③杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生专一抗体。