DNA病毒通过合成病毒 癌蛋白，引起细胞转化。
许多新的肿瘤抑制基因 是在病毒癌蛋白与宿主TSG 蛋白相互作用的研究中被发 现的。
RNA反转录病毒
RNA反转录肿瘤病毒分为急性和慢性两种。 慢性肿瘤病毒是野生型反转录病毒，不 带有癌基因。 急性肿瘤病毒是缺陷型反转录病毒，在 其基因组中带有来源于动物的癌基因(vonc)。v-onc的功能和突变的原癌基因相 似。 慢性肿瘤病毒是依赖LTR中的强启动子 （增强子）作用细胞癌基因，诱发癌变。
接着又分离到一个30Kb的cDNA片段， 用此片段可检测到13q14带70Kb区域的基 因。 同年眼科专家Dryja发现RB失活时可以致 瘤，杂合子（RB+/RB-）易被诱变而失活； 他还发现经眼球摘除手术能存活下来的 患儿长大后易患成骨肉瘤，乳腺癌和小 细胞肺癌。 1986年Friend将13q14位点的Rb经cDNA 克隆制成各种探针，检查很多例骨肉瘤 和组织肉瘤患者发现约50%的患者RB基 因纯合缺失。
Membranebinding
Motulatory SH3 SH2 250
Catalytic
Supressor
2
14
80
416
516
527
十四烷基化位点
突变改变了被转化细胞的 与另一些激酶催化 在c-Src中Tyr-527 形态，有的也赋予转化活性 结构域同源序列； 磷酸化，抑制激 Tyr-416 自我磷酸化 酶活性
◆Kundson早在1971年提出著名的 “ 二次突变假 设（two mutation hypothsis）”。 后来遗传学家发现家族性患儿的体细胞中13号染 色体存在缺失（13q14），表明该区域可能存在 与视网膜母细胞瘤发生有关的基因RB。 ◆ Sparkes(1980)将RB基因定位于13q14。 ◆ Benedict（1983）提出位于13q14的RB的一对等 位基因均失活才会产生该肿瘤。表明RB是以隐 性方式起作用。 ◆ Stephe等（1986。
DNA肿瘤病毒
转化病毒多为ssDNA病毒，癌基因能编码病 毒本身所需的蛋白。 如:SV40的T抗原; 人乳头瘤病毒 (human papillomavirus ，HPV) 的E7抗原; 腺病毒的E1A，E1B抗原 转化病毒带有癌基因,其产物可使肿瘤抑制物 失活。即减弱抗癌基因的功能。
一些DNA病毒感 染宿主细胞后不发生 裂解， 而是潜伏在 细胞中，并整合到宿 主基因组中，表达病 毒癌蛋白， 引起宿 主细胞转化。如： 多瘤病毒家族 （SV40)，人乳头瘤 病毒家族，腺病毒家 族。
第五章癌基因与癌
第一节 肿瘤细胞的特点 (1)无限生长（Immortalization），这和生长 控制发生改变有关。 (2)转化（transformation），失去了生长的 正常抑制，例如不受生长因子的支配。 (3)转移（metastasis）,癌细胞具有侵袭正常 组织的能力,可以从原来的组织转移到其他 的组织,在那建立新的克隆。
Inactive receptor Has unphosphorylated SH2-binding domain
Activated receptor has phosphorylated SH2-binding domain Fig. Phosphorylation of tyrosine in an SH2 binding domain creates a binding site for a protein that has an SH2 domain
(1) RB产物可抑制部分致癌蛋白。 主要是可以和肿瘤抗原相互作用： SV40 T抗原，腺病毒E1A抗原，人类乳 头瘤病毒E7抗原，可结合到RB的 379~792残基区域。 (2)RB还有抑制细胞增殖的作用。
在细胞周期中RB磷 酸化受到调控 G0/G1 去磷酸化， G1末至G2末被细胞周 期蛋白CDK复合物磷 酸化。
在下游插入的 ALV其增强子激 活c-myc的启动子
RNA肿瘤病毒在反转录酶的催化下，复制和整合 到核基因组中
反转录病毒的癌基因起源于动物
(1)各种动物的c-onc其数目和位置比较固定， 而反转录病毒中的v-onc数目和位置是不固 定的。 (2)线虫（C.elegans）和果蝇等动物并不被反 转病毒所感染，但这些动物的基因组中也 具有与高等动物癌基因同源的基因； (3) c-onc中发现有内含子，而反转录病毒的癌 基因（v-onc）则无内含子。 (4)动物的c-one可为反转录病毒所转导。
1987年Stanbridge等分离了人类13号 染色体，将它注入培养的成骨肉瘤 细胞中，结果导致了癌细胞逆转， 同年李文华把RB转化到培养的癌细 胞中使其逆转。 更进一步证明了RB的抑癌作用。他 克隆了RB全长的cDNA，发现其产物 是一种长928氨基酸，分子量是105 kD的蛋白质。
RB的分子功能：
生长因子
分泌蛋白
癌 基 因 的 类 型
生长因子受体
各种受体激酶，受体
G-蛋白/ 信号传导
GTP结合蛋白
胞内Tyr激酶
膜结合蛋白，胞液蛋白
Ser/Thr激酶
胞液蛋白
信号分子
调节物
转录因子
Leu拉链蛋白，转录 因子，甲状腺激素受体
二．抗癌基因（antioncogene）
又名抑癌基因 (tumor suppressor gene TSGs ) 、 隐性癌基因。是一种抑制细胞生长和肿瘤形成 的基因。在生物 体内与癌基因功能相抵抗，共 同保持生物体内正负信号相互作用的稳定。 已发现10种抗癌基因,如RB基因 (Retinoblastoma 视网膜母细胞瘤)，p53 基因 许多TSGs产物是细胞周期调节因子或是生 长相关基因的转录抑制子。它的非活性形式能 促进肿瘤生长。
正常细胞与癌细胞比较
体外细胞培养
原代培养细胞（血清依赖,接触
极限(大部分细胞 死亡，少数存活) 确立细胞系 (永生化) 转化(失去血清依
赖、接触抑制；形 态改变、聚集，长 成病灶)
抑制 ,有限寿命）
生 长 转 化 过 程
转移癌细胞转移
到别的组织，产 生新的克隆
癌细胞
确立细胞系:
（1）贴壁依赖性（Anchorage dependence）细 胞附着在固体基质或薄膜的表面。 （2）血清（或生长因子）依赖性（serum or growth facto dependence） （3）密度制约抑制 （Density-dependent inhibition） (4） 细胞骨架的形成 （cytoskeletal organization）。细胞是扁平 的，而且延着附着基质的表面沿伸。
2 . 癌症的发生原因
外因：物理致癌因子（ 高能辐射）
化学致癌因子（ 环状化ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ物，亚硝酸等） 生物致癌因子（肿瘤病毒,黄曲霉素） 内因： 蛋白质功能水平上的病毒活性， 重要的生长调节基因的突变，如激素 控制细胞生长的机制被破坏。
第二节 癌基因和抗癌基因
癌基因（oncogene） 转化基因（transforming gene） 细胞癌基因（cellular orcogene,c-onc） 原癌基因（proto- oncogene） 病毒癌基因（virus oncogene,v-onc）
DNA肿瘤病毒：致癌潜能存在于一种功 能或一组相关的功能之中，这些功能在 病毒裂解周期的早期就被激活。当转化 发生时，相应基因整合到宿主的基因组 中，并且呈组成型表达。（癌基因的组 成型表达产生了癌蛋白。） RNA反转录病毒：病毒的致瘤性并不依 赖它的癌基因，而是在于它激活了细胞 内原癌基因的表达。
p53蛋白与 抑制有关 的各功能 区的活性
第三节 癌基因产物的结构，功 能和细胞癌变。
一 . src基因
src的产物p60src具有TPK（酪氨酸蛋白激酶） 活性，与细胞的增殖和转化有关。Src蛋白有 四个结构域： （1）N端十四烷基化位点是和膜结合的位点 （2）SH2（src homology region-2）结构域。 (3) 416位Tyr和自身磷酸化有关。 (4) 而527位Tyr的磷酸化位点。
P53等位基因的缺失或突变 都可使细胞生长不受限制
野生型限制细胞 生长
缺乏p53细胞生长 不受控制
突变亚基因阻碍 四聚体功能，细 胞生长不受限制
DNA的损伤激活 p53,在细胞周期不同阶 段引起不同结果： 早期： 阻止细胞周期
前进直到损伤修复。
辐射
晚期： 引发细胞凋亡。
p53的功能: （1）一种可能是野生型p53与细胞中某些T抗 原的类似物结合，抑制了它们的活性; （2）p53也是一种DNA结合蛋白，它能识别长 10bp两侧对称的基序，并激活含多拷贝这 种基序的启动子的转录。 (3)在有的座位上它可能阻遏其靶基因。 (4) p53通过调节基因的表达来控制细胞周 期，缺乏这种调节就会导致细胞无限制生 长。 (5) p53突变具有显性失活的效应。
一.癌基因
癌基因是有潜在的促发肿瘤
发生活性的基因，最早在肿
瘤病毒中发现。到目前为止，
发现的癌基因己有100多个。 1911年P.Rous发现了Rous肉瘤病毒,（Rous sarcoma virus）。 1969年美国的Huebner,R.I.和Todaro,G.I提出了癌基 因假说。
1970 年 H.Temi 和 Dulbecco 发 现 致 癌 的 RNA病毒中存在反转录酶，提出了原病 毒假设，认为RNA病毒通过反向转录和 正向转录以及与宿主细胞DNA发生交换 或重组，能形成癌基因。 1976年H.Evarmus和J.M.Bishop发现鸟类 肉瘤病毒中含有致癌基因。被命名为病 毒癌基因(virus oncogene v-onc)。 80年代初通过很多实验证实了癌基因的 存在。
Fig. A Src protein has an N-terminal domain that associates with themembrane, a motumatory domain that includes SH2 and SH3 motifs, a kinase catalytic domain,and (c-Src only ) a suppressor domain.