甘草酸的提取、纯化、测定及残渣中甘草多糖的提取分离测定

实验报告

学院： 生物科学与工程学院 班级： 姓名： 学号： 组别： 第七组 组员： 目录 一、实验目的................................................................................................................ 3 二、实验器材................................................................................................................ 2 三、实验原理................................................................................................................ 2 1.甘草简介 ............................................................................................................ 2 2. 甘草酸的提取方法 .......................................................................................... 3 2.1 水提法 .................................................................................................... 3 2.2 稀氨水提取法 ........................................................................................ 4 2.3超声波提取法 ......................................................................................... 5 3 甘草酸的分离与纯化 ....................................................................................... 5 3.1 超滤法 .................................................................................................... 5 3.2 结晶法 .................................................................................................... 6 3.3 树脂法 .................................................................................................... 6 4.多糖提取方法 .................................................................................................... 7 5．多糖含量测定 ................................................................................................. 7 四、实验内容及步骤.................................................................................................... 8 1.甘草酸的提取（稀氨水提取法） .................................................................... 8 1.1 .................................................................................................................. 8 1.2 .................................................................................................................. 8 1.3 .................................................................................................................. 8 2. 甘草酸的纯化（大孔树脂吸附法） .............................................................. 9 3.残渣中甘草多糖的提取分离（溶剂提取法） ................................................ 9 五、实验数据及处理.................................................................................................. 11 1.甘草酸标准曲线 .............................................................................................. 11 2.测定样品甘草酸浓度，计算甘草提取率 ...................................................... 11 3.甘草酸粗品质量 .............................................................................................. 12 4.洗脱液中甘草酸的含量测定 .......................................................................... 12 5.纯化后甘草酸的质量2.132g ......................................................................... 12 六、实验结论及误差分析.......................................................................................... 13 实验结论：.......................................................................................................... 13 误差分析：.......................................................................................................... 14

一、实验目的 1.掌握甘草酸提取、纯化的原理和方法，了解甘草酸定量测定方法。 2.掌握多糖类的提取及测定方法。 3.熟悉皂甙的性质。 4.进一步熟悉物质提取与纯化的技术，掌握相关原理。 生物科学与工程学院 10级生物技术2班第七组 二、实验器材 1.试剂：70%的乙醇、0.6%的稀氨水、3.5mol/l的浓硫酸、XAD9型树脂、6%盐酸、50%乙醇、95%乙醇、苯酚、铝片、碳酸氢钠、葡萄糖、标准甘草酸等。 2.器材：紫外分光光度计、石英比色皿、旋转蒸发仪、真空抽滤机、恒温水浴锅、1000ml量筒、玻璃棒、烧杯、纱布、玻璃漏斗、滤纸、烧杯等。

三、实验原理 1.甘草简介 甘草是蝶形花科（Fabaceae）、甘草属(Glycyrrhiza)植物，甘草地下部分是名贵中药材，地上部分是多年生牧草。甘草具有抗寒、耐热、耐旱、抗盐碱等优良特性，适生性和抗逆性强，生命力旺盛，为干旱、半干旱地区重要的植物资源之一。早甘草味甘、性平，有补脾益气、止咳祛痰、清热解毒的功能，用于脾胃虚弱、中气不足、咳嗽气喘、解毒等病症。现代研究表明，甘草还有肾上腺皮质激素样的作用，可治慢性肾上腺皮质机能低下症和胃、十二指肠溃疡，近年来又发现甘草可抗癌和防治艾滋病，又是预防和治疗SARS的复方组份之一。 甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizic acid)及甘草次酸(glycyrrhetinic 甘草酸的提取、纯化、测定及残渣中甘草多糖的提取分离测定 3 acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等。药理研究表明，甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用。近年来，还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等。甘草酸约占甘草根茎的3-14%，分子式为C42H62O16，分子量822.92，熔点212 ºC -217 ºC，其结构式为五环三萜皂甙，结构图如图1-1所示：

图1-1 甘草酸结构分子式 纯品甘草酸为白色针状晶体，不溶于冷水，可溶于热水，故溶于热水后，经冷却则呈胶体状沉淀析出。加热、加压及在稀酸作用下可水解为一分子甘草次酸和两分子葡萄糖醛酸。甘草次酸与单葡萄糖醛酸结合成甘草酸苷元单葡糖苷酸（MGGR）。

2. 甘草酸的提取方法 2.1 水提法 水提法是最为古老、也是最为常用的一种提取方法。其操作简单，溶剂成本低廉，但得率较低，按1990年版中国药典中含量测定方法测得甘草酸得率仅约3.0%。据推测可能是因为水提法提取出的杂质较多，在去除杂质的过程中夹带