端粒和端粒酶与人类衰老的关系摘要：衰老是一种多因素的复合调控过程，表现为染色体端粒长度的改变、损伤、DNA的甲基化和细胞的氧化损伤等并已形成了许多学说而端粒学说成为衰老研究的热点之一。

端粒是染色体末端由 DNA 重复序列组成的一种特殊结构，具有维持染色体结构稳定性的功能，会随染色体复制与细胞分裂而缩短。

端粒酶作用于端粒，依靠自身 RNA 模板合成端粒 DNA，维持端粒的长度与结构完整。

端粒和端粒酶在人类长寿和衰老进程中起重要作用，为揭示衰老机制和延年益寿提供了依据。

关键词：端粒、端粒酶、细胞衰老、人类长寿。

1端粒、端粒酶的结构和功能早在三、四十年代,人们就发现了真核细胞染色体的末端,有DNA-蛋白质复合物组成的特殊结构,称为端粒.近年来对端粒结构已有全面的了解,端粒具有以下特点:1.1 端粒通常由较短的序列串联重复而成,人的端粒序列为TTAGGG.端粒长度(重复次数)在不同的物种之间差异很大,从50bp到50kb,人的生殖系细胞的端粒长度约10kb[1].端粒相关序列最显著的特征是可变性和高度的多态性.1.2 端粒的一条DNA链(5′→3′)富含G碱基,比互补链长,因而在末端形成一段12-16bp的单链区.1.3 端粒与特异蛋白(非组蛋白)结合形成端粒核蛋白复合体[2,3],不仅能保护端粒DNA,还对端粒上游基因的转录有激活或抑制作用.越来越多的证据表明,端粒具有维护染色体稳定、防止端粒DNA降解、保护线状染色体完全复制而不缺失其每条链的5′末端碱基的作用.由于DNA半保留复制方式只能沿5′→3′方式进行,去除RNA引物后,会在子代DNA分子的两条新生链的5′端各留下一个缺口[4].因此,随着DNA复制和细胞分裂,端粒长度会逐渐缩短.端粒酶（Telomerase），在细胞中负责端粒的延长的一种酶，是基本的核蛋白逆转录酶，可将端粒DNA加至真核细胞染色体末端。

端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制，在肿瘤中被重新激活，端粒酶可能参与恶性转化。

端粒酶在保持端粒稳定、基因组完整、细胞长期的活性和潜在的继续增殖能力等方面有重要作用。

端粒酶的存在，就是把 DNA 克隆机制的缺陷填补起来，即由把端粒修复延长，可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗，使得细胞分裂克隆的次数增加。

但是，在正常人体细胞中，端粒酶的活性受到相当严密的调控，只有在造血细胞、干细胞和生殖细胞，这些必须不断分裂克隆的细胞之中，才可以侦测到具有活性的端粒酶。

当细胞分化成熟后，必须负责身体中各种不同组织的需求，各司其职，于是，端粒酶的活性就会渐渐的消失。

对细胞来说，本身是否能持续分裂克隆下去并不重要，而是分化成熟的细胞将背负更重大的使命，就是让组织器官运作，使生命延续。

2、端粒系统与衰老：2. 1 端粒- 端粒酶假说GryfeR等于1997年提出了关于细胞衰老和永生学说, 认为人的正常体细胞分裂次数达到界限时, 染色体端粒长度缩短到一定程度, 有丝分裂便不可逆地被阻断在细胞周期的G1 期和G2 期之间的某个时期, 这时的细胞便进入了老化期, 随后死亡。

如果细胞被病毒感染, 或p53、RB、p16INK4、ATM、APC等肿瘤抑制基因发生突变, 或K..ras等原癌基因被激活, 或DNA错配修复基因发生突变,或某些基因DNA 序列发生了高度甲基化, 或仅发生了低度甲基化, 从而(在未发生核甘酸突变的情况下)改变了该基因的表达, 此时细胞便能越过阻断点继续进行有丝分裂。

随着有丝分裂进行, 端粒长度不断缩短, 缩短到一定程度时, 染色体发生结构畸变, 大部分细胞便死亡, 少部分细胞激活了端粒酶活性, 不断合成端粒DNA 补充端粒的长度, 端粒不再缩短, 细胞便获得无限分裂增生能力而成为永生化细胞。

这说是端粒- 端粒酶假说。

该假说已为越来越多的研究所证实，如H astie 发现人结肠端粒限制性片段( TRF)随着供体年龄增加而逐渐缩短, 平均每年丢失33 bp的重复序列。

A llospp等用人成纤维细胞研究端粒长度与年龄及有丝分裂能力的关系时也发现, 年龄越小, 初始端粒长度越长, 有丝分裂能力亦越强; 反之, 在一些早老性疾病患者体细胞中, TRF长度明显短于同龄正常人, 体外培养这些细胞时, 其有丝分裂能力较正常人也明显减弱。

杨仕明等人在分析正常人胃粘膜TRF长度时, 也得出相似的结论, 随着年龄的增加, 其TRF 长度有递减的趋势, 且供体年龄与TRF长度呈明显负相关。

2. 2.. 端粒与衰老研究证明, 端粒与细胞寿命的控制密切相关。

人类端粒长度大约2~ 15 kb, 由于存在末端复制问题,DNA每复制1次, 端粒DNA 就会丢失50~ 200bp, 随着细胞分裂次数的增加, 端粒DNA 也在进行性地缩短, 当缩短到一定限度后, 便不能维持染色体的稳定,细胞失去了分裂增殖能力而衰老死亡, 这种缩短就是衰老的标志。

因此, 端粒也被称为细胞的生命钟。

1973年O lovfnikov博士首次提出了端粒丢失与衰老关系的理论。

他认为端粒的丢失可能是因为某种与端粒相关的基因发生了致死性的缺失, 以后许多人对该理论进行了进一步阐明。

目前认为, 细胞内端粒酶活性的缺失将导致端粒缩短, 这种缩短使得端粒最终成为不能被细胞识别的末端。

这并不是说端粒不存在了, 而是说端粒短到了一个临界长度, 端粒一旦短于此长度, 就可能导致染色体双链的断裂, 并激活细胞自身的检验系统, 从而使细胞进入M 1期死亡状态。

随着端粒的进一步丢失, 将会发生染色体重排, 双着丝粒染色体和非整倍体染色体的形成, 这将进一步导致危机的产生, 即M2期死亡状态。

如果细胞要维持其正常分裂, 那么就必须阻止端粒的进一步丢失, 并激活端粒酶, 细胞进行正常染色体复制。

对于那些无法激活端粒酶的细胞将只能面临衰老的结果。

端粒长度的缩短可以激发细胞老化, 一种可能是染色体末端端粒DNA 序列的丢失释放了端粒结合转录因子, 该因子或者激活了衰老诱导基因, 或者灭活了细胞周期进行所必需的某些基因。

另一种可能是端粒长度缩短诱导了DNA 损伤反应, 导致细胞周期受阻。

沉默基因机制认为: 染色体末端端粒长度缩短破坏了端粒周围染色质结构的完整性, 导致这一区域的基因表达而诱导细胞衰老。

可见, 端粒结构不仅仅是在于维持染色体长度所必需的, 而且端粒的变化可引起生命状态的变化。

3、端粒、端粒酶与衰老的实验研究尽管端粒激发细胞衰老的确切机制需要进一步阐明, 但大量的实验数据证明, 端粒、端粒酶同衰老之间存在相关性。

目前在正常组织中的支持证据有: ( 1)在多数体细胞中, 老年个体的端粒长度较年轻个体短得多, 某些细胞, 如T、B淋巴细胞中的端粒酶活性随年龄的增加而下降。

( 2) 年轻个体细胞中的端粒随年龄增长而逐渐缩短。

( 3)需要无限分裂能力的谱系细胞、干细胞的端粒长度较长, 且具有较高的端粒酶活性;而大多数具有有限增生能力的体细胞的端粒较短, 不表达或仅低度表达端粒酶的活性。

( 4)增生能力强的细胞及永生细胞表达端粒酶活性, 即使同一组织的不同部分, 其分裂能力也与端粒酶活性成正比, 如在毛发生长初期的毛囊中, 含有分裂活性细胞的部分表达端酶活性,而低度分裂活性细胞部分则表达较低水平的酶活性。

( 5) 端粒酶阴性的细胞在引入端粒酶后, 可维持端粒的长度, 细胞增生能力增强, 甚至细胞永生化。

国内研究人员曾经在广西巴马县长寿村落选取健康个体49人作为长寿组,另选取一般地区健康个体51人作为对照组，研究长寿的秘诀。

运用地高辛探针标记的Southern 印迹杂交方法测量人群外周血白细胞端粒DNA限制性片断(TRF)长度。

结果以年龄为协变量,对长寿组和对照组外周血白细胞端粒DNA长度作协方差分析,长寿组端粒DNA长度明显长于对照组;长寿组和对照组内,不同年龄段的端粒DNA长度明显不同,端粒DNA长度随年龄的增加而降低。

端粒可能是促进广西巴马长寿的一个有利因素。

Atzmon发现德系犹太百岁老人的端粒较长与人端粒酶逆转录酶基因和人端粒酶RNA基因发生同义突变、内含子突变有关。

这些基因突变有助于调节相关基因的表达,从而激活端粒酶,在细胞分裂过程中更好地维持端粒的长度。

4、展望关于端粒和端粒酶的研究近年来飞速发展。

2009 年度诺贝尔生理学或医学奖在瑞典卡罗林斯卡医学院揭晓，美国加利福尼亚旧金山大学的 Elizabeth H. Blackburn、美国巴尔的摩约翰·霍普金斯医学院的 Carol W. Greider 和美国哈佛医学院的 Jack W. Szostak 得该奖，以表彰他们发现了端粒和端粒酶保护染色体的机制。

端粒和端粒酶的发现解释了生物学中长期未解决的染色体末端复制问题，推动了生物学和生物医学相关领域的发展，为研究衰老、与衰老相关的疾病和肿瘤发生发展的分子机制提供了新的思路。

人类染色体端粒序列已被分离克隆,利用PCR技术和核酸探针可以检测端粒末端限制性片段长度,了解端粒DNA重复次数的多少.近年来在人类生殖系细胞,造血干细胞和95%癌细胞中均发现端粒酶的存在,最近已经克隆了编码四膜虫端粒酶两条多肽链的基因,以及编码人和小鼠端粒酶RNA组分的基因.相信这些新的研究进展将有利于揭示细胞衰老机制,抗衰老的研究打下基础,有望实现人工延长寿命.参考文献：杨仕明、吴延瑞主编端粒、端粒酶：人类长寿及肿瘤治的新策略医学与哲学20卷第4期 2009、4、10彭江江端粒/端粒酶与细胞衰老安徽师大学报 1998、12、21郗鹏端粒和端粒酶的发现——2009年获贝尔生物学或医学奖成果介绍科学导报 2009、812农清清，陈雪冬，何敏广西巴马长寿人群外周白细胞端粒长度检测中国公共卫生 2010、11、26许娜，判文干，刘玉莲端粒系统与人类衰老关系吉林医药学院学报 2006、9、27。