[收稿日期]　2010-07-18;2010-09-06修回　[基金项目]　贵州省科技厅农业攻关项目“修文六广河牌猕猴桃产业化关键技术开发与示范”[黔科合N Y 字(2009)3022];贵阳市科技局农业科技攻关计划项目“修文县六广河牌猕猴桃产业化关键技术开发与应用”[筑科农合同字第(2009)2-007];修文县科技局农业项目“修文县猕猴桃病虫害无公害防治技术研究”[修科合同字(2007)第1号]　[作者简介]　龙友华(1970-),男,副教授,从事农产品质量与安全及有害生物化学防治技术研究。

E -m a i l :g z l y h 126@126.c o m植物保护·土壤肥料·微生物[文章编号]1001-3601(2010)10-0661-0084-03猕猴桃溃疡病防治药剂室内筛选及田间药效试验龙友华1,夏锦书2(1.贵州大学农学院,贵州贵阳550025;2.贵州省黔南民族职业技术学院,贵州都匀558000) [摘　要]为筛选猕猴桃溃疡病的有效防治药剂,采用室内抑菌试验和田间病斑涂抹试验研究了6种杀菌剂对猕猴桃溃疡病病菌的毒力和田间防效。

结果表明:90%链·土霉素抑菌效果较好,E C 50为40.20m g /L ,其次是硫酸链霉素,E C 50为64.75m g /L ;3%中生菌素和36%三氯异氰尿酸E C 50分别为279.20m g /L 和368.65m g /L ;0.1亿c f u /g 多粘类芽孢杆菌细粒剂和25%叶枯唑抑菌效果较差,E C 50分别为846.32m g /L 和947.77m g /L 。

田间病斑涂抹试验中,90%链·土霉素可湿性粉剂对猕猴桃溃疡病具有较好的防治效果,病斑愈合率达82.47%,40%硫酸链霉素可溶性粉剂和3%中生菌素可湿性粉剂防效分别为78.73%和75.01%。

[关键词]猕猴桃;溃疡病;杀菌剂;毒力;防效[中图分类号]S 436.634.1[文献标识码]AI n d o o r S c r e e n i n ga n d F i e l d T r i a l o f B a c t e r i c i d e s a g a i n s t K i w i f r u i t C a n k e rL O N GY o u -h u a 1,X I AJ i n -s h u2(1.C o l l e g e o f A g r i c u l t u r e ,G u i z h o uU n i v e r s i t y ,G u i y a n g ,G u i z h o u 550025;2.Q i a n n a nN a t i o n a l i t y V o c a t i o n a la n dT e c h n i c a l C o l l e g e ,D u y u n ,G u i z h o u 558000,C h i n a ) A b s t r a c t :T h e t o x i c i t y a n d f i e l dc o n t r o l e f f e c t o f 6b a c t e r i c i d e s a g a i n s t k i w i f r u i t c a n k e r w e r e t e s t e db yt h ei n d o o r b a c t e r i o s t a s i s t e s t a n d f i e l d s p o t s m e a r i n g t r i a l t o s c r e e n e f f e c t i v e b a c t e r i c i d e s t o c o n t r o l k i w i f r u i t c a n k e r .T h e r e s u l t s s h o w e dt h a t t h ec o n t r o l e f f e c t o f 90%S t r e p t o m y c i n -O x y t e t r a c y c l i n eW Pw a s t h eb e s t ,f o l l o w e db y 40%S t r e p t o m y c i n s u l p h a t e W P ,E C 50o f S t r e p t o m y c i n -O x y t e t r a c y c l i n e W P ,S t r e p t o m y c i n s u l p h a t e W P ,3%Z h o n g s h e n g m y c i n W P ,36%T r i c h l o r o i s o c y a n u r i ca c i dWP ,t e nm i l l i o nc f u /g P a e n i b a c i l l u s p o l y m y x aa n d 25%B i s m e r t h l a z o l w a s 40.20m g /L ,64.75m g /L ,279.20m g /L ,368.65m g /L ,846.32m g /La n d 947.77m g /L r e s p e c t i v e l y .T h e s p o t h e a l i n g r a t e o f 90%S t r e p t o m y c i n -O x y t e t r a c y c l i n e W P ,40%S t r e p t o m y c i n s u l p h a t e W P a n d 3%Z h o n g s h e n g m y c i n W P a g a i n s t k i w i f r u i t c a n k e r w a s 82.47%,78.73%a n d 75.01%s e p a r a t e l y i n t h e f i e l d s p o t s m e a r i n g t r i a l .K e y w o r d s :k i w i f r u i t ;c a n k e r ;b a c t e r i c i d e ;t o x i c i t y ;c o n t r o l e f f e c t 猕猴桃溃疡病是由细菌(P s e u d o m o n a s s y r i n g a e P Va c t i n i d i a )引起的一种毁灭性病害,国外广泛分布于日本、美国、新西兰和韩国等,我国于1985年在湖南东山峰农场首次发现[1-2]。

目前,该病在我国湖南、福建、四川、陕西和安徽等地均有发生,被列为全国森林植物检疫对象,国内外学者对猕猴桃溃疡病作了大量研究。

李瑶等[3-4]研究了猕猴桃溃疡病的流行因子、猕猴桃中两种同工酶与抗病性的关系,李庚飞等[5]研究了猕猴桃体内酚的含量与溃疡病的抗性关系,李淼等[6]对猕猴桃品种枝条组织与抗溃疡病关系作了初步研究,宋晓斌等[7]研究了猕猴桃溃疡病的生物防治技术,张锋等[8]研究了猕猴桃溃疡病化学药剂的防治技术。

但链·土霉素、中生菌素防治猕猴桃溃疡病鲜有报道。

贵州省修文猕猴桃产区个别果园溃疡病发生严重,其发生面积逐年扩大,危害日益严重,现已从修文久长镇蔓延至龙场镇猕猴桃产区,在谷堡乡猕猴桃主产区已有零星发生,对修文猕猴桃的生产造成了严重的威胁。

为做好修文猕猴桃溃疡病的防治工作,笔者于2007-2010年对贵州修文猕猴桃溃疡病进行了调查,并进行了防治药剂的室内筛选和田间防治试验研究,以期为修文猕猴桃溃疡病的防治提供技术依据。

1材料与方法1.1供试材料1.1.1病原菌猕猴桃溃疡病病原菌(P s e u d o -m o n a s s y r i n g a e P Va c t i n i d i a e )从修文县唐人农庄猕猴桃溃疡病重发区采样分离获得,经分离纯化后保存于密闭的无菌蒸馏水中,室温保存。

1.1.2供试药剂40%硫酸链霉素可溶性粉剂,华北制药集团爱诺有限公司;3%中生菌素可湿性粉剂,东莞市瑞德丰生物科技有限公司;36%三氯异氰尿酸可湿性粉剂,湖南省海洋生物工程有限公司;25%叶枯唑(噻枯唑)可湿性粉剂,青岛瀚生生物科　贵州农业科学　2010,38(10):84～86　G u i z h o u A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s技股份有限公司;0.1亿c f u/g多粘类芽孢杆菌细粒剂(康地蕾得),上海泽元海洋生物技术有限公司; 90%链·土霉素可湿性粉剂,石家庄市三农化工有限公司。

1.1.3培养基配方N A培养基:牛肉膏3.0g,蛋白胨10.0g,N a C l5.0g,琼脂18.0g,p H6.8～7.0,培养基加蒸馏水定容至1000m L,121℃湿热灭菌20m i n。

1.2室内防治药剂筛选1.2.1猕猴桃溃疡病菌分离纯化将发病猕猴桃枝条表面用清水洗净晾干,再用85%的酒精擦拭,迅速过火烧尽酒精,用消过毒的解剖刀刮去表面皮层,刮其褐色组织置于无菌培养皿中,滴入2滴无菌水,用无菌玻棒捣碎组织,静置5m i n,用玻棒取菌液在N A培养基上划线,28℃培养48h。

待培养基上长出菌落后,挑取小圆形,稍隆起,白色稀汤状,有光泽菌落于N A培养基上培养,纯化3次,然后再挑取单一菌落,置于装有10m L无菌水的试管中,于室温中保存。

1.2.2菌悬液的制备用灭菌的接种环蘸取含有猕猴桃溃疡病菌的试液,在N A培养基上划线,于28℃恒温箱中培养。

待猕猴桃溃疡病菌在N A培养基上活化后,取病原菌于3m L无菌水中配制成病菌原液,取1m L菌原液再用无菌水按10、100、1000、…等倍稀释涂板,28℃培养48h,根据平板上长出的菌落数推算菌原液浓度。

根据菌原液浓度,制备菌悬液,使1m L菌悬液涂板后长出的菌落数为100个左右。

1.2.3药剂室内毒力测定将各供试药剂用灭菌水配制相应浓度的含药培养基,用500μL可调微量移液器取1m L配好的药液于9c m的培养皿中,并与9m L约45℃的N A培养基混匀。

待其凝固后,用500μL可调微量移液器取500μL的病原菌悬液于配好的含药培养基中,28℃恒温培养箱中培养48h,肉眼观察统计每个处理的菌落数。