德国维润赛润风疹麻疹IgM检测流程步骤

（一）准备阶段

1. 样品处理：取稀释缓冲液（DILB）800μl，RF吸附剂200μl于一EP管中，然后加入10μl患者待测血清混匀，常温放置15min，或者4℃过夜。

2. 配置洗液：将33.3毫升浓缩洗液(WASH)加入蒸馏水稀释至1000毫升，洗液置4-8度冷藏保存。

（二）检测阶段

1.加样：取100毫升样品稀释液加入微孔板中。加入2孔阳性对照血清，一孔阴性对照血清，每孔各100毫升；空白对照一孔，不加任何液体。

3. 孵育；将反应板震荡，样品混匀后置37℃1小时。

4. 洗板：

a机洗：洗5次，每次30秒，每孔加入洗液300微升。

b手洗：将反映板孔内容物倾去，将洗液注满反应孔，放置20-40秒后用力甩去，如此重复5次后拍干。

5. 加酶标物(APC)每孔100μl，空白孔除外，37℃半小时。

6. 重复步骤4。

7. 加底物(PNPP)每孔100μl（包含空白对照孔），37℃半小时。注意，底物液容易被污染，请先计算好加样量，用干净离心管分出后再加到微孔板中，底物液变黄了就不能使用了。 8. 终止：加入终止液(STOP)每孔100微升（包含空白对照孔），终止反应。

（三）结果判定

1，使用405nm波长比色。每孔OD值需减去空白OD值为实际有效OD值。空白对照OD值必须小于0.25，阳性对照值必须在评估表给的有效范围。

2，根据特殊评估系统：临界值上限=阳性对照平均值×大的判定系数系数；临界值下限等于=阳性对照平均值*小的判定系数（判定系数在试剂盒说明里，单张纸的那张，图例如下）。

3，样品OD值大于临界值上限即为阳性，样品OD值小于临界值下限即为阴性，样品OD值处于临界值区间即为可疑阳性。

试剂盒说明图例，其中圈红的地方即“判定系数”的高值和低值。