国家食品药品监督管理局稽查局食药监稽函【2012】200号中药材及中药饮片药品检验补充检验方法和检验项目批准件蒲黄POLLEN TYPHAE[检查]总灰分不得过15.0%（中国药典2005年版一部附录IX K总灰分测定法）。
金胺O (1) 取本品粉末2g，加70%乙醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。
取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中含0.1 mg的溶液，即得。
照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，取供试品溶液和对照品溶液各10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷—乙酸乙酯—甲醇—氨水（4：5：5：1）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即在可见光下检视。
供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。
（2）照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。
色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈—0.025mol/L 磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值为3.0）（40：60）为流动相；检测波长为484nm。
理论板数按金橙Ⅱ峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取金橙Ⅱ对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml约含60µg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取上述（1）项下的供试品溶液，即得。
测定法取供试品溶液和对照品溶液各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果判断供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在210~550nm 波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。
备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。
建议采用乙腈-0.05mol/L 醋酸铵（35：65）流动相系统。
红花HonghuaFLOS CARTHAMI[检查]金橙Ⅱ（1）取本品粗粉2g，加70%乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。
取金橙Ⅱ对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。
照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，取供试品溶液10µl，对照试剂溶液5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-冰乙酸（7：1：2）为展开剂，展开，取出，晾干，立即在可视光下检视。
供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。
（2）照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。
色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值为3.0）（40：60）为流动相；检测波长为484nm。
理论板数按金橙Ⅱ峰计算，应不低于2000。
对照试剂溶液的制备取金橙Ⅱ对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含60µg 的溶液，即得。
供试品溶液的制备取上述（1）项下的供试品溶液，即得。
测定法取供试品溶液和对照试剂溶液各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果判断供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在210~550nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。
备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。
建议采用乙腈-0.05mol/L的醋酸铵溶液（35：65）流动相系统。
五味子WuweiziPRUCTUS SCHISANDRAE CHINENSIS[检查]胭脂红、赤藓红、酸性红73 （1）取本品2g（不粉碎），加70%乙醇5ml，超声提取20分钟，离心（3000转/分钟），取上清液作为供试品溶液。
另取胭脂红、赤藓红和酸性红73对照试剂适量，分别加70%乙醇溶解并制成每1ml含0.1mg的溶液作为对照试剂溶液。
照薄层色谱法（中国药典2005年版第一部附录VI B）试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（1：3：3：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，在可见光下检视。
供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。
若出现相同颜色的斑点，则用下列高效液相色谱法验证。
（2）照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。
色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，以0.05mol/L醋酸铵为流动相B,按下表进行梯度洗脱：检测波长为508nm。
理论板数按胭脂红峰计算，应不低于2000。
时间（min）流动相A（%）流动相B（%）0-12 20→45 80→5512-25 45→80 55→2025-30 80 20对照试剂溶液的制备取[检查]（1）项下的对照试剂溶液，作为对照试剂溶液。
供试品溶液的制备取[检查]（1）项下的供试品溶液，作为供试品溶液。
测定法取供试品溶液和对照试剂溶液各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果判断供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。
朱砂（水飞）ZhushaCINNABARIS[检查] 808猩红（1）取本品粉末0.2g，加乙醇10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。
另取808猩红对照试剂适量，加乙腈制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。
照薄层色谱法（中国药典2005年版第一部附录VI B）试验，吸取上述两种溶液各10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（9：1）为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视。
供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。
（2）照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。
色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.1%的甲酸溶液（85：15）为流动相：检测波长为520nm。
理论板数按808 猩红峰计算，应不低于2000。
对照试剂溶液的制备取808猩红对照试剂适量，加乙醇制成每1ml约含60µg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取[检查]（1）项下的供试品溶液，用微孔滤膜（0.45µm）滤过，取出滤液，即得。
测定法取供试品溶液和对照试剂溶液各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果判断供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。
808猩红对照试剂色谱峰在519±1nm显示最大吸收。
备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。
建议采用乙腈-0.1%的甲酸溶液（80：20）流动相系统。
血竭XuejieSANGUIS DRACONIIS[检查]苏丹红Ⅳ、808猩红、松香酸（1）取本品粉末0.2g，加乙醇25ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。
另取松香酸、苏丹红Ⅳ、808猩红对照试剂适量，分别加乙醇制成每1ml含松香酸1mg，含苏丹红Ⅳ、808猩红0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。
照薄层色谱法（中国药典2005年版第一部附录VI B）试验，吸取上述供试品溶液2µl和对照试剂溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（9：1）为展开剂，展开，取出，晾干，再以石油醚（60~90℃）-乙酸乙酯-冰乙酸（9:1：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干。
日光下检视，供试品色谱中，在与苏丹红Ⅳ、808猩红对照试剂色谱相应的位置，不得显示相同颜色的斑点；紫外光灯（254nm）下检视，供试品色谱中，在与松香酸对照试剂色谱相应的位置，不得显相应的荧光淬灭斑点。
再喷以10%硫酸/乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。
供试品色谱中，在与松香酸对照试剂色谱相应的位置，不得显相应的棕黄色斑点；紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与松香酸对照试剂色谱相应的位置，不得显相应的蓝色荧光斑点。
若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。
（2）苏丹红Ⅳ、808猩红照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。
色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-水（95：5）为流动相，检测波长为520nm，理论板数按苏丹红Ⅳ峰计算，应不低于2000。
对照试剂溶液的制备取苏丹红Ⅳ、808猩红对照试剂适量，分别加乙醇制成每1ml 约含40µg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取[检查]（1）项下的供试品溶液，用微孔滤膜（0.45µm）滤过，取续滤液，即得。
测定法取供试品溶液和对照试剂溶液各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果判断供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。
苏丹红Ⅳ对照试剂色谱峰在350±1nm，517±1nm显示最大吸收；808猩红对照试剂色谱峰在518±1nm显示最大吸收。
松香酸色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.1%甲酸（75：25）为流动相，检测波长为241nm，理论板数按松香酸峰计算，应不低于4000。
对照试剂溶液的制备取松香酸对照试剂适量，加乙醇制成每1ml约含松香酸100µg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取[检查]（1）项下的供试品溶液1ml，加乙醇稀释至10ml，用微孔滤膜（0.45µm）滤过，取续滤液，即得。
测定法取供试品溶液和对照试剂溶液各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果判断供试品色谱中，应不得出现与松香酸对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。
松香酸对照色谱峰在241 1nm显示最大吸收。
沉香Chenxiang[检查]松香（1）取本品粉末1g，置具塞试管中，加石油醚（60~90℃）10ml，振摇10数分钟，滤过，取滤液5ml，置另一试管中，加新配置的0.5%醋酸铜溶液5ml，振摇后，静置分层，石油醚层不得显绿色。