３２６　食品与药品　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　２０１０年第１２卷第０９期　

・技术交流・　

ＨＰＬＣｉ￣，ｔ］定盐酸左氧氟沙星滴眼液中防腐剂羟苯乙酯含量　

武利芬，白若琬，李乃成，韩保萍，韩文芳　

（山东博士伦福瑞达制药有限公司，山东济南２５０１０１）　

摘要：目的建立ＨＰＬＣ￣ＪＪ定盐酸左氧氟沙星滴眼液中防腐剂羟苯乙酯含量的方法。方法以十八烷硅烷基键合硅胶为填　充剂；以０．００５　ｍｏｌ／Ｌ醋酸铵溶液（每１　０００　ｍＬ含三乙胺１０　ｍＬ，用冰醋酸调ｐＨ　５．Ｏ）一乙腈（５０：５０）为流动相；检测波长　２５６　ｎｉｌ＇ｌ；流速１．０　ｍＬ／ｍｉｎ；柱温３５℃。结果羟苯乙酯在０．０１７　７～０．０４１　３　ｍｇ／ｒｒ￣范围内呈良好的线性关系（ｒ＝０．９９９　９７）。　平均回收率１００．４％（ｎ＝９），ＲＳＤ：０．９７％。结论此法简便、快速、准确，可有效控制产品质量。　关键词：盐酸左氧氟沙星滴眼液；羟苯乙酯；ＨＰＬＣ；含量测定　中图分类号：Ｒ９８８．１　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７２．９７９Ｘ（２０１０）０９．０３２６．０３　

ＨＰＬＣ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｅｔｈｙｌ　ｐａｒａｂｅｎ　ｉｎ　Ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ　Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　Ｅｙｅ　Ｄｒｏｐｓ　ＷＵ　Ｌｉ．ｆｅｎ，ＢＡＩ　Ｒｕｏ．ｗａｎ，ＬＩ　Ｎａｉ．ｃｈｅｎｇ，ＨＡＮ　Ｂａｏ．ｐｉｎｇ，ＨＡＮ　Ｗｅｎ．ｆａｎｇ　（ＳｈａｎｄｏｎｇＢａｕｓｃｈ＆ＬｏｍｂＦｒｅｄａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏ．，Ｌｔｄ．．Ｊｉｎａｎ　２５０１０１．Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｅｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａｎ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｔｈｙｌｐａｒａｂｅｎ　ｉｎ　Ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ　Ｈｙｄｒｏｃｈ１ｏｒｉｄｅ　Ｅｙｅ　Ｄｒｏｐｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａｎ　ＯＤＳ　ｃｏｌｕｍｎ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｗｉｔｈ　０．００５　ｍｏＬ／Ｌ　ａｍｍｏｎｉｕｍ　ａｃｅｔａｔｅ　ｒ　１　０　ｍＬ　ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ　ｉｎ　１　０００　ｍＬ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ａｄｊｕｓｔｅｄ　ｔｏ　ｐＨ　５．０　ｗｉｔｈ　ｇｌａｃｉａｌ　ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ）一ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ（５０：５０）ａｓ　ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ．　Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　２５６　ｎｍ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１．０　ｍＬ／ｍｉｎ．Ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　ｋｅｐｔ　ａｔ　３５℃．　Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆｅｔｈｙｌ　ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏａｔｅ　ｗａｓ　ｌｉｎｅａｒ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ０．０１７　７．０．０４１　３　ｍ＃ｍＬ（，　

收稿日期：２０１０．２．２１　作者简介：武利芬（１９８０一），女，药师，从事药品分析工作Ｅ－ｍａｉｌ：Ｌｉｆｅｎ．ｗｕ＠Ｂａｕｓｃｈ．ｃｏｍ　

表４胃宝胶囊对大鼠惺・陛胃炎胃液成份及血清胃泌素的影响（　±Ｓ，ｎ＝１０）　

Ｐ＜０．０５，”Ｐ≮０．Ｏ１　盐水对照组　

３结语　

胃病是常见病和多发病，临床常见的有急性胃炎　

和慢性　胃炎，浅表性胃炎和慢性萎缩性胃炎更为常　

见　目前治疗此病多以通络止痛、散结消肿、修复胃　

黏膜为主要治则。本研究显示胃宝胶囊可明显减轻醋　

酸引起的小鼠疼痛反应及蛋清致大鼠足跖肿胀，对乙　

醇致小鼠胃黏膜损伤有保护和治疗作用，可增加大鼠　

，实验性胃炎胃液的游离酸，降低蛋白酶的活性，增高　血清胃泌素。本研究表明，胃宝胶囊有良好的止痛、　

抗炎、保护胃黏膜等药理作用，为扩大胃宝胶囊的临　

床应用提供了科学依据。　

参考文献　

［１Ｊ１　陈奇．中药药理研究方法学［Ｍ】．北京：人民卫生出版社，１９９６：　３０８，４６６．　［２］中华人民共和国卫生部药政局．新药（西药）ｌ｝缶床前研究指导原则　汇编　．１９９３：８９．

　食品与药品　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　２０１０年第１２卷第０９期　３２７　

＝０．９９９　９７）．Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　１　００．４％（ｎ＝９，ＲＳＤ＝０．９７％）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ｒａｐｉｄ　ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｔｅ，ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ　Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　Ｅｙｅ　Ｄｒｏｐｓ．　Ｋｅｙ　Ｗｏｒｄｓ：Ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ　Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　Ｅｙｅ　Ｄｒｏｐｓ；ｅｔｈｙｌｐａｒａｂｅｎ；ＨＰＬＣ；ａｓｓａｙ　

滴眼剂中，羟苯乙酯是作为对羟基苯甲酸酯类防　３．２线性试验　腐剂收载的『１］，它对霉菌及酵母菌的抑制效力较强，　

对革兰阳性菌的作用比革兰阴性菌强　。以前测定羟　

苯乙酯等防腐剂含量的方法较少，我们根据２０１０版药　

典　建立了测定盐酸左氧氟沙星滴眼液中羟苯乙酯含　

量的方法。　

１仪器与试药　

Ｗａｔｅｒｓ　６００Ｅ高效液相色谱仪，２９９６　ＰＤＡ检测　

器，７１７　ｐＬｕｓ进样器；羟苯乙酯对照品（中国药品生　

物制品检定所）；盐酸左氧氟沙星滴眼液（山东博士　

伦福瑞达制药有限公司实验室提供）；乙腈为色谱　

纯；超纯水、醋酸铵、冰醋酸均为分析纯。　

２色谱条件　

色谱柱：以十八烷基键合硅胶为填充剂　

（４．６　ｍｎｌ×１５０　１ＴＩ１ＴＩ，５　ｕｍ）；流动相：０．００５　ｍｏＬ／Ｌ　

醋酸铵溶液（每１　０００　ｍＬ含三乙胺１０　ｍＬ，冰醋酸调ｐＨ　

５．　乙腈（５０：５０）；检测波￣－２５６ｒｆｒｌ；流速１．０ｍｌＪｍｉｍ　

柱温３５℃。　

３方法与结果　

３．１适应性试验　

称取羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯适量，加水　

适量，９８～１００℃水浴加热溶解，冷却至室温，用水　

稀释制成每１　ｍＬ中分别约含３０　的混合溶液，取１０　Ｌ　

注入液相色谱仪，记录色谱图，色谱峰流出顺序依次　

为羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯。测得羟苯甲酯与　

羟苯乙酯的分离度　．＝６．４，羟苯乙酯与羟苯丙酯的分　

离度Ｒ，＝８．８，完全分离，色谱图见图１。　

Ｉ　；　Ｉ　・　

Ｉ　

＾　＾　＾　●　ｊ　

八八　１　Ｏ０　２　Ｏ０　３　Ｏ０　４　Ｏ０　５　Ｏ０　６　Ｏ０　７Ｏ０　ｔｆｒａｉｎ　

图１色谱系统适应性试验的ＨＰＬＣ图　精密称定羟苯乙酯对照品约３０　ｍｇ，置入５０　ｍＬ　

量瓶中，加水适量，水浴加热溶解，冷却至室温，用　

水稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取　

该贮备液３，４，５，６，７　ｍＬ，分别置入１００　ｍＬ量瓶　

中，加水定容至刻度，摇匀。分别精密量取１０此注　

入色谱仪，记录色谱图，以峰面积（ｙ）为纵坐标，　

进样浓度（Ｃ）为横坐标进行线性回归。回归方程　

Ｙ＝５３　ｌ１３Ｃ～５　７２７，，＝１．０００　０。　

结果表明，在０．０１７　７～０．０４１　３　ｍｇ／ｍＬ范围内，　

羟苯乙酯峰面积与浓度呈良好的线性关系。　

３．３精密度试验　

取３．２项中间浓度的溶液，连续重复进样５次，测　

得峰面积ＲＳＤ（ｎ＝５）为０．２％，相对保留时问ＲＳＤ　

（，２＝５）为０．３％。　

３．４重复性试验　取同一批样品（含羟苯乙酯３Ｏ０￣ｇ／ｍＬ）６份，　

分别精密量取１　ｍＬ置入１０　ｍＬ量瓶中，加水稀释至刻　

度，摇匀，作为供试品溶液；取羟苯乙酯对照品适　

量，精密称定，加水溶解并稀释成每１　ｍＬ含３Ｏ　的溶　

液，作为对照品溶液。分别吸取１０　Ｌ注入色谱仪，按　

外标法以峰面积计算含量，ＲＳＤ（ｎ＝６）为０．４％。　

３．５回收率试验　

分别称取羟苯乙酯对照品适量，精密称定，用　

羟苯乙酯阴性溶液溶解并稀释成含羟苯乙酯浓度约　

０．２４，０＿３０，０．３６　ｍｇ／ｍＬ的溶液，分别精密量取１　ｍＬ　

置入１０　ｍＬ量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀，各取　

１０　ＩｘＬ注入色谱仪，计算平均回收率１Ｏ０．４％，ＲＳＤ　

（，２：９）为１．０％。　

３．６稳定性试验　

取３．４项其中１份供试品溶液，在室温下放置０，　

２４，４８，７２，９６　ｈ后，分别进样测定，每次测试时间　

点，均重新制备对照品溶液，以外标法计算含量，平　

均含量值为１００－３％，ＲＳＤ（，ｚ＝６）为０．６％。　

３．７样品测定　

制备对照品溶液和样品溶液，分别进样１０　Ｌ，　

按外标法计算含量。批号２００９ｌｄ０４，２００９１１０５，

　３２８　食品与药品　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　２０１０年第１２卷第０９期　

ＲＰ．ＨＰＬＣｉ￣，ｑ定阿奇霉素缓释阴道栓的含量　

贺秀丽　，赵泉　

（Ｉ．山东省医科院附属医院药剂科，山东济南２５００３１；２．烟台市毓璜顶医院，山东烟台２６４００１）　

摘要：目的建立ＲＰ．ＨＰＬＣ￣定阿奇霉素缓释阴道栓的含量。方法用Ｃ　（４．６　ｉＴＬｒｎ×１５０　ｍｍ，５　ｌａｍ）柱，以乙腈．磷酸氢　二钾溶液（０．０２　ｍｏｌ／Ｌ）．磷酸二氢钾溶液（０．０７　ｍｏｌ／Ｌ）溶液（６０：２５：１５）为流动相，柱温４０℃，流速１．２　ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长　２１５　ｎｍ。结果阿奇霉素的线性范围为６０￣８００　ｒ￣ｇ／ｍＬ，ｒ＝０．９９９　８；低、中、高３种浓度的平均回收率分别为１０１．４％，９９．１％，　１０１．２％。结论本方法简便、灵敏、准确。　关键词：阿奇霉素；缓释阴道栓；ＲＰ—ＨＰＬＣ；含量测定　中图分类号：Ｒ９２７．２　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７２—９７９Ｘ（２０１０）０９．０３２８．０３　

Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ　ｉｎ　Ａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ　Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ—ｒｅｌｅａｓｅ　Ｖａｇｉｎａｌ　Ｓｕｐｐｏｓｉｔｏｒｙ　ｂｙ　ＲＰ．ＨＰＬＣ　ＨＥＸｉｕ．．．１ｉ，ＺＨＡＯＱｕａｎ　（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＡｃａｄｅｍｙ　ｏｆＭｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｊｉｎａｎ　２５００３ｌ，Ｃｈｉｎａ；２．　Ｙｕｈｕａｎｇｄｉｎｇ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆＹａｎｔａｉ，Ｙａｎｔａｉ　２６４００１，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊ　ｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ＲＰ—ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ　ｉｎ　ａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ　ｓｕｓｔａｉｎｅｄ－ｒｅｌｅａｓｅ　ｖａｇｉｎａｌ　ｓｕｐｐｏｓｉｔｏｒｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａ　Ｃ－１８　ｃｏｌｕｎｍ（４．６　ｍｍＸ　１５０　ｍｍ．５　ｌａｍ）ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｗｉｔｈ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ．　０．０２　ｍｏｌ‘Ｌ～ｄｉｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｈｙｄｒｏｇｅｎ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－０．０７　ｍｏｌ・Ｌ　ｍｏｎｏｂａｓｉｃ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｆ６０：２５：１　５）ａｓ　ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ．Ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　４０℃．Ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１．２　ｍＬ・ｍｉｎ—ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　２　１　５　ｎｌｎ．　Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒ　ｒａｎｇｅ　ｏｆａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ　ｗａｓ　６０　ｌａｇ・ｍＬ～～８００　ｌａｇ・ｍＬ　（Ｆ０，９９９　８）．Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｏｆｌｏｗ，　ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　１０１．３９％，９９．０７％，１００．２３％ａｎｄ　ＲＳＤｓ　ｗｅｒｅ　０．８０％，０．５８％，０．９３％　＝６），　

收稿日期：２０１０．０７．０８　基金项目：烟台市科学技术发展计划项目（２００８６０２）　作者简介：贺秀丽（１９６７．），女，山东济南人，副主任药师，药剂学专业　

ｊ　Ｉ　

＾　＾　

ａ：对照品溶液；　图２样品测定的ＨＰＬｃ图　

２００９１１０６，含量分别为１００．１％，１００．７％，１００．４％。　

色谱图见图２。　

４讨论　

本研究建立ＨＰＬＣ￣Ｊ定盐酸左氧氟沙星滴眼液中　

防腐剂羟苯乙酯的含量，方法简便，系统精密度和重　

复性好，色谱条件耐受性好，流动相中盐的浓度低　

（０．００５　ｍｏＬ／Ｌ），整个色谱系统稳定，可有效检测出产　１　００　２ｏ０　３　００　ｔ／ｍｉｎ　样品溶液　

品中羟苯乙酯的含量，为产品质量提供了可靠保证。　

参考文献　

［１】崔福德．药剂学［Ｍ］．北京：中国医药科技出版社，２００２．　［２］凌沛学．眼科药物与制剂学【Ｍ】．北京：中国轻工业出版社，　２Ｏｌ０　［３］国家药典委员会．中国药典【Ｍ】．２０１０年版二部，北京：中国医　药科技出版社，２０１０．