I类病原微生物: 指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物
以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物 II类病原微生物:指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直 接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间 传播的微生物。 III类病原微生物:指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下 对人动物或者环境不构成严重危害，传播风险 有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且 具备有效治疗和预防措施的微生物。 IV类病原微生物: 是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病 的微生物
枯草芽孢杆菌 Naegleria gruberi（耐格里原虫） 大肠杆菌
13.12.6
28
2.

BSL－2 实验室

符合BSL－1的要求 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服， 离开时防护服必须留在实验室内；用过 的工作服应先消毒，再统一洗涤或丢弃 接触感染材料、污染的表面或设备应戴两副手套
13.12.6
个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备）
13.12.6
32
3.BSL-3实验室

符合BSL－2的要求 使用个体防护设备：在进行感染性组织培养或可
能产生感染性气溶胶的操作时

使用呼吸保护装置：当不能安全有效地将气溶胶限
定在一定范围内时

可再次使用的工作服必须先消毒后清洗
13.12.6 33
BSL-III生物安全防护
１、所有操作人员必须经过培训，通过考核(获 得上岗证书) ２、对所从事的病原微生物及相关操作进行危险 评估并制定防护措施 ３、熟悉实验室运行规则，正确操作和使用仪器 和设备 ４、掌握各种感染性物质操作准则和技术要点
13.12.6
16
门禁制度
13.12.6
17
病原微生物根据危害不同分为四类(条例)
13.12.6 26
二、各级BSL的个体防护要求
1.BSL－1

实验室
工作人员在实验时应穿工作服 戴手套（不得戴着手套离开实验室） 必要时戴防护眼镜
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27
BSL-1生物安全防护
适用于实验对象已知对健康成年人无致病 作用，对实验室工作人员和环境的潜在危害很 小。举例：

13.12.6 2
实验室特点
实验室 是人类认识自然，利用自然界中与人 类生产生活相关的(物理、化学、生物、辐射等各种) 因素，按照科学规律经特殊技术进行 实验研究活动的场所 特 点：
1.多专业、多部门 2.接触的有毒有害物质繁多 3.对实验人员产生各种危害 4.专业性强，管理难度大
13.12.6 3
13.12.6
10
实验室制度、生物安全规范、手册
13.12.6
11
生物安全实验室(BSL)
三项技术及措施



样品隔离技术（机械、气幕），防止传染因子 进入环境接触人体 定向流技术（三级负压系统），防止传染因子 扩散 消毒灭菌技术（物理、化学），灭活传染因子
13.12.6
12
一级屏障
13.12.6
（-40Pa)
男外更衣室
淋 浴 间
内更衣室
（-10Pa)
洗消间
13.12.6
35
BSL－3实验室
细胞、毒株保存室
-0 -0 -10
实验室
-40
女淋浴更衣室
-0
空调机房
-30
换鞋 脱外衣
-0
男淋浴更衣室
实验室公共区
-20
清洗室
-0
门厅
±0
-30
实验室
-40 -30
实验室
-40
监控室
±0
13.12.6
BSL-3
BSL-4
对人体有高度危险性，通过气溶胶途 径传播或传播途径不明的微生物，尚 无预防治疗措施
Ⅳ级 一类
19
13.12.6
13.12.6
20
病原微生物实验室的生物危险



气溶胶(aerosol)：固体或液体微粒稳定地悬浮于气体介质中 形成的分散体，粒径一般为0.001~100μm 微生物气溶胶(microbial aerosol)：微粒中含有微生物 感染性气溶胶(infectious aerosol)：微粒中含有致病微生物 飞沫 (droplet)：由于动物打喷嚏、咳嗽等产生的以唾液、粘 液和微生物等为主要成分的气溶胶 飞沫核(deoplet core)：当飞沫中的水分蒸发后剩余的粘液蛋 白和微生物等
13.12.6
18
生物安全实验室的分级
实验室 分级 BSL-1 BSL-2 处理对象 对人体和环境危害较低，不会引发健 康成人疾病 对人体和环境有中等危害或具有潜在 危险的致病因子 主要通过呼吸途径使人传染上严重的 甚至是致命疾病的致病因子，通常有 预防治疗措施 危险 等级 Ⅰ级(GB/WHO) 四类(条例) Ⅱ级 三类 Ⅲ级 二类
平 面 布 局 36
BSL－3实验室

工作时必须戴两付手套为宜，一次性手套 必须先消毒后再丢弃 在实验室中必须备有效的消毒剂、清洗剂 生理盐水及应急药品

13.12.6
37
BSL－3实验室

在使用传染性物质或已被污染的仪器时， 必需戴手套 严 禁 带 着 手 套 离 开 BSL-3 实 验 室 ， 离 开 BSL-3实验室的所有物品必须正确消除污 染，并放在干净的容器中
* BSC型BSL-4实验室：个人防护装备同BSL-3 * 防护型BSL-4实验室：个人防护装备配备正压防护服 * 混合型BSL-4实验室：个人防护装备是前两项的组合
生物安全系列讲座
生物安全实验室 个人防护装备（BSL-PPE）
中南大学湘雅二医院 邓军卫
13.12.6 1
生物安全
大致分为三个方面： 一.指人类的健康安全； 二.指人类赖以生存的农业生物安全； 三.指与人类生存有关的环境生物安全
广义生物安全涉及到多个学科和领域：医 学、环境保护、植物保护、野生动物保护、生 态、农药、林业等，而管理工作分属各个不同 的行政管理部门

13.12.6
38
BSL－3实验室

对有可能溅出或喷出传染性物质、危险 试剂时，需使用面部和眼部防护器具 有的操作不能在BSC内处理时，要组合使 用适当的操作防护设备（如面罩、呼吸器）或 物理容器设备
13.12.6 39

4.BSL－4 实验室


符合BSL－3的要求 所有工作人员进入BSL－4实验室时都必须换上全套 实验室服装（包括内衣、内裤、衬衣或连衫裤、鞋和手套等）； 工作后脱下所有保护服，淋浴后才能离开实验室 所有感染性材料的操作，必须在BSC-III中进行，如 果穿着整体的由生命维持系统供气的正压工作服， 则可在B-II型BSC中进行
通实验室操作而引起
台湾实验人员感染非典病毒事故
2003年12月台湾一位实验人员在P4实验室做病毒实验时，因清 理废弃物操作疏忽，安全程序处理不当而感染病毒
13.12.6
6
安全事故
发 生 事 故 的 后 果
痊愈
发病
受伤者感染
发病
死亡
社会传播
家庭传播
医院内传播
同事、好友
亲朋
医护人员
13.12.6
7
实验室获得性感染的因素
确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤害 确保周围环境不受其污染 确保实验因子保持原有本性所采取综合措施的实验室


13.12.6
9
生物安全实验室安全管理体系的建立
Ⅰ
Ⅱ Ⅲ-1 Ⅲ-2
Ⅰ 《安全管理手册》 Ⅱ “程序文件”（组）、（族） Ⅲ 工作文件（族）、（手册） Ⅲ-1 标准操作规程 Ⅲ-2 制式表格、记录表格等



13.12.6
22
有可能产生微生物气溶胶的操作 离心 组织研磨 混合培养液（用移液管反复吹吸混合） 真空抽滤 使用匀浆器、摇床和超声处理器

13.12.6
23
实验室中有可能产生微生物气溶胶的操作






打开装有冻干物的安瓿管 收集微生物培养物 热的接种环放在菌液或菌苔上（推荐使用一次性接种环） 液体从吸管掉落到工作台面上 从吸管中将最后一滴液体吹出（推荐使用不需要吹出最 后一滴液体的移液管） 磨口瓶子打开瓶塞时（推荐使用螺口瓶） 快速地脱实验服

80%是不明原因的感染 20%原因明确,其中:
80%工作操作失误引起,20%是设备故障引起.

1. 2.
导致感染最多的4种实验室事故:
溢出和泼洒 针头和注射器 锐器\碎玻璃 动物或动物体外寄生虫咬伤或抓伤
8
3.
4.
13.12.6
生物安全防护原则

实质:通过规范的实验室设计建造、实验设备的配 置、个人防护装备的使用（硬件），严格遵从SOP及 管理制度和规程（软件）
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24
临床实验室相关生物危险等级分布
200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0
一级 二级 三级 四级
病毒
细菌
真菌
寄生虫
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25
一、生物安全实验室
个人防护装备必要性
个人防护装备（PPE）是指用于防止工作人员受到物 理、化学及生物等有害因子伤害的器材和用品。在操作 感染性材料时采取科学合理的个人防护对避免实验室相 关感染非常必要和有效，因为： 1. 感染性材料实验室操作难免溢洒，发生身体暴露； 2. 任何物理防护设备的保护功能都有一定限度，都不 是绝对的； 3. 实验室生物安全防护是一项受制于多环节多因素的 系统工程，在长期的运转中难免有意外发生，此时 个人防护就是保障安全的关键