4
5
1
23
对法 1.1 材料与仪器
赤芍 Paeoniae Rubra Radix 和白芍 Paeoniae Alba Radix 药材产自我国内蒙古、吉林、四川、浙 江、安徽、上海、江西、广东、台湾、云南、香港 等地，经广东省中医院杨柳教授鉴定为毛茛科植物 芍 药 Paeonia lactiflora Pall. 或 川 赤 芍 Paeonia veitchii Lynch 的干燥根。没食子酸、芍药内酯苷、 芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰基葡萄糖、苯甲酰芍 药苷对照品均由本实验室制得，质量分数均高于 98%。没食子酸甲酯对照品质量分数大于 98%（批 号 27975，上海一基实业有限公司）。甲醇、乙腈均 为色谱纯，购自美国 Fisher 公司；其他化学试剂均 为分析纯，购自广州化学试剂厂；超纯水经过 Milli-Q 系统纯化制备。美国 Waters Alliance 2695 高效液相色谱仪；十万分之一电子分析天平（Mettler Toledo AB135-S 型）。 1.2 色谱条件
Abstract: Objective A high performance liquid chromatographic method was established to simultaneously quantify the gallic acid, methyl gallate, albiflorin, paeoniflorin, 1,2,3,4,6-O-pentagalloylglucose, benzoylpaeoniflorin of red peony root, and white peony root. Methods The content of six components from 32 batches of samples collected from different product areas and markets was determined and compared by means of this established method. The mobile phase comprised of acetonitrile and water containing 0.1% phosphoric acid. Flow rate was 0.8 mL/min and column temperature was 30 ℃. Chromatography was monitored at 230 and 270 nm. Results The correlation coefficients between concentration and chromatographic peak area of gallic acid, methyl gallate, albiflorin, paeoniflorin, 1,2,3,4,6-O-pentagalloylglucose, and benzoylpaeoniflorin, respectively were over 0.999 9 in the ranges of 0.783 0— 50.10, 1.094—70.00, 2.367—151.5, 7.823—500.6, 3.125—200.0, and 0.348 0—22.25 μg/mL. The average recoveries of the six compounds were 102.1%, 98.88%, 99.25%, 100.4%, 104.2%, and 100.6%, respectively. Conclusion All the contents of albiflorin, 1,2,3,4,6-O-pentagalloylglucose, gallic acid, and methyl gallate show a remarkable difference between Paeoniae Rubra Radix and Paeoniae Alba Radix. And the latter usually contains more monoterpene glycosides than the former dose except paeoniflorin. On the other hand, Paeoniae Rubra Radix, especially originating from Paeoniae veitchii always contains more polyphenols than Paeoniae Alba Radix dose. Key words: Paeoniae Rubra Radix; Paeoniae Alba Radix; gallic acid; methyl gallate; albiflorin; paeoniflorin; 1,2,3,4,6-O-pentagalloylglucose; benzoylpaeoniflorin; HPLC
图 1 对照品与样品 HPLC 色谱图 Fig.1 HPLC of reference substance and sample
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 11 期 2015 年 6 月
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 11 期 2015 年 6 月
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HPLC 同时测定赤芍和白芍中没食子酸等 6 种成分的量
余捷婧 1，吴金雄 1，梁亚凤 2，许舜军 3，杨 柳 1*
1. 广东省中医院，广东省中医药科学院，广东 广州 510120 2. 东莞市清溪医院，广东 东莞 523660 3. 广州万正药业有限公司，广东 广州 510530
Simultaneous quantitative determination of six active compounds from Paeoniae Rubra Radix and Paeoniae Alba Radix by HPLC
YU Jie-jing1, WU Jin-xiong1, LIANG Ya-feng2, XU Shun-jun3, YANG Liu1
收稿日期：2014-12-17 基金项目：国家自然科学基金资助项目（30901968） 作者简介：余捷婧，女，硕士在读。E-mail: jiejing_yu@ *通信作者 杨 柳，女，研究员，硕士生导师，主要从事中药活性成分和质量评价研究。Tel: (020)39318778
E-mail: yangliume@
色谱柱：Waters symmetry C18 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：A 相为 0.1%磷酸水溶液（pH 2.7），B 相为乙腈；梯度洗脱：0～5 min，10%～15% B；5～25 min，15%～22% B；25～45 min，22%～ 70% B；45～46 min， 70%～80% B；46～48 min， 80% B；体积流量 0.8 mL/min；检测波长为 230 nm 和 270 nm；柱温 30 ℃；进样量 10 μL。对照品和 样品的色谱图见图 1。
2 1
5 对照品（270 nm）
4
3
6
4
5
3
1
2
白芍（230 nm） 6
5 12
34
白芍（270 nm） 6
5
2 4
1 3
赤芍（230 nm） 6
5 2
1
34
赤芍（270 nm）
0
10
20
30
40
0
10
20
30
40
t/min
1-没食子酸 2-没食子酸甲酯 3-芍药内酯苷 4-芍药苷 5-1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖 6-苯甲酰芍药苷 1-gallic acid 2-methyl gallate 3-albiflorin 4-paeoniflorin 5-1,2,3,4,6-O-pentagalloylglucose 6-benzoylpaeoniflorin
关键词：赤芍；白芍；没食子酸；没食子酸甲酯；芍药内酯苷；芍药苷；1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖；苯甲酰芍药苷；HPLC
中图分类号：R286.6
文献标志码：A
文章编号：0253 - 2670(2015)11 - 1673 - 05
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.11.021
摘 要：目的 建立同时测定赤芍 Paeoniae Rubra Radix 和白芍 Paeoniae Alba Radix 中没食子酸、没食子酸甲酯、芍药内酯 苷、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷的 HPLC 方法，测定和比较 32 批不同产地和收集地赤芍和白芍中
6 种化学成分的量。方法 采用 HPLC 法进行测定，流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，体积流量 0.8 mL/min，柱温 30 ℃，检 测波长为 230 nm 和 270 nm。结果 结果显示，没食子酸、没食子酸甲酯、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄 糖、苯甲酰芍药苷分别在 0.783～50.10、1.094～70.00、2.367～151.5、7.823～500.6、3.125～200.0 和 0.348～22.25 μg/mL 内 具有良好的线性关系（r2＝0.999），平均回收率分别为 102.1%、98.88%、99.25%、100.4%、104.2%、100.6%。结论 赤芍 和白芍药材样品中芍药内酯苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、没食子酸和没食子酸甲酯的量差异较显著，除芍药苷外，单萜 苷类成分在白芍中量明显较高，而多元酚类化合物在赤芍特别是川赤芍中量普遍居高。
1. Guangdong Hospital of Chinese Medicine, Guangzhou 510120, China 2. The Hospital of Qingxi, Dongguan 523660, China 3. Imvin Pharmaceutical Co., Ltd., Guangzhou 510530, China