第２Ｏ卷　第４期　湖北师范学院学报（自然科学版）　

Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｕｂｅｉ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ）　Ｖｏ１．２Ｏ　

Ｎｏ．４．２０００　

雷公藤的化学成分及提取物的检验方法探讨　姚发兴　，徐　斌　，童秀英。，陈友丽。　（１．湖北师范学院生物系；２．湖北师范学院化学与环境工程系；　３．９９９黄石制药厂，湖北黄石４３５００２）　

摘要：详细研究了雷公藤化学成分的化学及药理活性、有效成分的提取及其检验；根据实验结果，提出了用　电化学方法进行检验的可能性。　关键词：雷公藤；化学成分；药理作用；化学检验　中圈分类号：ＴＱ４６０．７　２　文献标识码：Ａ　文章编号：１００９—２７１４（２０００）０４—００３５—０５　

雷公藤（Ｔｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍ　ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ　Ｈｏｏｋ．ｆ）系卫矛科（Ｃｅｌａｓｔｒａｃｅａｅ）雷公藤属木质藤本植物。雷公藤　具有多种药理作用，如：清热解毒、祛风除湿、舒筋活血通络、消肿止痛、杀虫止痒；已用于多种疾病的　治疗，如：类风湿性关节炎、某些皮肤病、肾炎、肝炎、癌肿等；另外，雷公藤及其制剂有一定的毒性“－　。　因此，称为有毒药物，这也就成为人们关注的焦点和热门研究的课题。　从三十年代至今，人们已从雷公藤属植物分离得到７Ｏ余种化学成分“　：包括生物碱、二萜、三　萜、倍半萜、甙类、糖类、醇类及微量元素。其中，有１７种化学成分有多种生物活性，其中最主要的是：　雷公藤内酯醇（Ｔｒｉｐｔｏｌｉｄｅ）、雷公藤内酯二醇（Ｔｒｉｐｄｉｏｌｉｄｅ）、雷公藤红素（Ｔｒｉｐｔｅｒｉｎｅ）、雷公藤碱　（Ｗｉｌｆｏｒｉｎｅ）、雷公藤多甙（ＧＴｗ）等。　

实验部分　１．１仪器及试剂　１．１．１　仪器ＪＰ一３０３极谱分析仪（成都仪器厂），三电极系统：滴汞电极为工作电极，饱和甘汞电极　为参比电极，铂辅助电极；ｐＨＳ一３Ｃ型精密ｐＨ计（上海雷磁仪器厂），复合ｐＨ电极；ＣＨＩ６６０电化学工　作站（美国ＣＨＩ公司），三电极系统：ＪＭ—Ｏ１悬汞电极（江苏电分析仪器厂），饱和甘汞电极，铂辅助电　极；ＡＧ２４５电子天平（瑞士ＭＥＴＴＩ　ＥＲ公司）；自动双重纯水蒸馏器（上海亚太技术玻璃公司）。　１．１．２　试剂　５．８３×１０　ｍｏｌ／Ｉ　的雷公藤内酯醇乙醇溶液：称取１０ｒａｇ雷公藤内酯醇（由福建省医　药科学研究所提供），用无水乙醇溶解并定容为ｌＯＯｍＩ　。　硼砂缓冲溶液：配制０．１ｍｏｌ／Ｉ　的硼砂溶液，ｐＨ值为９．２６。　伯瑞坦一罗比森（Ｂ—Ｒ）缓冲溶液：先分别配制浓度分别为０．４ｍｏｌ／Ｉ　的磷酸、醋酸、硼酸的Ｂ—Ｒ　酸溶液和０．２ｍｏｌ／Ｉ　的Ｂ—Ｒ碱（氢氧化钠）溶液；随后按一定比例混合Ｂ—Ｒ酸、Ｂ—Ｒ碱溶液、以得到不　同ｐＨ值的Ｂ—Ｒ缓冲溶液。　其它试剂均为分析纯，水为二次水。　

收稿日期：２０００—０５一ｌ８　作者简介：姚发兴（１９５６　），男．副教授　＊湖北省教育厅资助项目（９９Ａ０４７）　・３５・　

维普资讯 http://www.cqvip.com 取一定量的雷公藤内酯醇乙醇溶液于１０ｍｌ　比色管中，加入一定体积的一定ｐＨ值的缓冲溶液’　１ｍＩ　１ｍｏｌ／Ｉ　的ＫＣ１溶液，每加入一种溶液均轻轻摇动，随后定容为１０ｍＩ　，充分混匀后，取部分溶液　于电解池中，在ＪＰ３０３型极谱仪上，用三电极系统，以５００Ｖ／ｓ的扫速，从一定电位开始扫描，记录其　

循环伏安曲线。　结合实验结果和文献资料数据进行分析比较和讨论。　

２结果和讨论　２．１化学成分研究“　２．１．１　生物碱　１９５０年人们提取第一个生物碱，到目前已提取的生物碱有１３个，分成两大类：大环　

酯类生物碱和精脒类生物碱。（图１）　

图１　根据取代基的不同，组成不同的生物碱。　２．１．２倍半萜类　倍半萜类化学成分已分得１２个，其基本结构为ａ，　不饱和内酯和二氢琼脂呋　

喃聚酯。（图２）　

ｏ　。　二氯琼啦吱喃　蔓　

图２　２．１．３二萜类　雷公藤二萜类是生理活性的主要成分，已分得的有１３个，其基本结构可分为三类：　

环氧二萜类、山海棠素类和雷酚萜类。（图３）　

ｏ　ｏ　

ｊ童毒　；　】＝】＿　萜菱　

◆　图３　●　２．１．４　三萜类　从１９３６年至今，人们已从雷公藤属植物中分得１８种三萜类化合物。雷公藤三萜类　

化合物均为五环化合物，它们分属于齐墩果烷型、本栓烷型和乌素烷型。（图４）　

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●　

维普资讯 http://www.cqvip.com ０　齐墩果烷型　本栓炕型　图４　乌素烷型　

２．２雷公藤化学成分的活性研究　雷公藤具有多种药理活性，主要有抗炎及免疫作用、抗肿瘤作用、抗生育作用和杀虫作用。不同成　分组合在一起时，药理活性不同。　抗炎及免疫作用是药理活性的主要代表，也是目前雷公藤临床应用最广泛的一个方面。雷公藤中　的生物碱、二萜、三萜及甙类化合物，或多或少都具有这一活性。　抗肿瘤作用是近年来研究最活跃的一个方面，雷公藤二萜类化合物具有这方面的活性。其抗肿瘤　作用的活性基团是二萜类化合物９、１０位的环氧基及ｎ、ｐ＿－不饱和酮基；同时，１４ｐ—ＯＨ基可促进９、１０　位的环氧基与生物大分子起选择性的烷化作用，从而达到抗肿瘤的目的。　抗生育作用是雷公藤毒副作用的一个侧面，而且这种作用有可逆性，这就表明雷公藤可作为抗生　育作用的药物。研究表明，雷公藤的粗制剂、生物碱和多甙具有这种活性。　杀虫作用早已被人们所熟悉，它的全株可作杀虫药。生物碱的这种活性较为明显。　２．３雷公藤药用成分分布研究　雷公藤的药用成分分散在根、茎、叶、花、果中，不同产地的雷公藤、雷公藤的不同部位含药用成分　的种类及其量不同。对雷公藤内酯醇而言，有结果　如表１：　’　表１　霄公藤不同部位雷公藤内醋醇的含量　

２．４雷公藤药用成分的提取及制剂研究。　．　雷公藤药用成分的提取，或用水煎、或用有机溶剂浸泡，或两者结合。　水煎一般是以雷公藤的根、茎、叶、花、果为提取对象，或与其它中草药为伍，提取液直接药用。用　于多种疾病的治疗。　有机溶剂常用乙醇、乙酸乙酯作为提取剂。７Ｏ～９Ｏ年代，采用乙醇提取，提取物用低极性有机溶　剂处理后制成雷公藤多甙片；用乙酸乙酯提取，经处理后制成雷藤片。主要用于治疗关节炎类疾病。　９Ｏ年代以后，雷公藤制剂研究发展迅猛，特别在缓释、控释方面的研究，对提高雷公藤疗效、降低　毒副作用产生了重要作用。　使用带皮的雷公藤根为原料，制取雷公藤总萜片；使用雷公藤叶为原料，制备雷公藤酊剂；将雷公　藤叶用水提取，再用有机溶剂萃取，对萃取物进行包合，包合物制成微囊片；将雷公藤醋酸乙酯提取物　与聚乙烯醇４０００、硬酯酸、石蜡按一定比例混合制成雷公藤滴丸；将雷公藤醋酸乙酯提取物制剂改进　成上层为空白层、下层为药层的雷公藤双层栓；将雷公藤的提纯雷公藤甲素制成皮下给药的雷公藤巴　布剂等等。　・３７・　

维普资讯 http://www.cqvip.com ２．５提取物的检验研究　雷公藤提取物一般为多成分的混合物，故常用色谱法进行分析检验　。　。　薄层色谱法是使用最广泛的方法，中国药典推荐的也是这一方法。薄板为硅胶板，展开剂为２：１　的氯仿一乙醚混合溶剂，显色剂为２　３、５一二硝基苯甲酸与２ｍｏｌ／Ｉ　的ＮａＯＨ乙醇溶液按１：３混合　得到，用薄层扫描仪以双波长（　一５３５ｎｍ，入　一６５０ｎｍ）反射锯齿扫描法测定。　高效液相色谱法应该说是最理想的方法，但由于仪器和分析成本的问题没有薄层法应用的普遍。　有人用Ｓｈｉｍ　Ｐａｃｋ　ＦＩ，Ｃ－－ＯＤＳ　４．６×５０ｍｍ的色谱柱对雷酚内酯进行了分析，线性回归方程为：Ｙ一　７．２４ｘ一０．７１８，相关系数为：０．９９９９。　将薄层色谱法与分光光度法相结合，应该是一种创造。它用薄层色谱法分离，取出斑点，用溶剂处　理后用分光光度法进行测定。所需仪器简单，而且使方法的稳定性得以提高；但重现性较差。按薄层　法展开后，用碘蒸气显色，标出斑点部位，挥去碘；刮出薄层斑点放进具塞离心管中，加入５ｍｌ乙醇震　荡５ｍｉｎ，取一定体积的上清液，用０．５％３、５一二硝基苯甲酸与２．５　的ＮａＯＨ乙醇溶液各ｌｍｌ显色　后，于５４０ｎｍ波长处测定吸收；线性回归方程为：Ａ一４．０８×１０＿。Ｘ一１×１０。。。，相关系数为：０．９９９９。　用电化学分析法对雷公藤提取物的研究还未见报道，理论分析及初步试验表明，雷公藤有关化学　成分上的羰基，具有电化学活性，在不同酸的介质中有不同的还原电位（图１）。图１（ａ）表明，在ｐＨ一　７．７５的Ｂ—Ｒ缓冲溶液中，雷公藤内酯醇在滴汞电极上于一１．４Ｖ（ａｓ．ＳＣＥ）有一不可逆的还原峰；图１　（ｂ）表明，在ｐＨ一９．２６的硼砂缓冲溶液中，雷公藤内酯醇在滴汞电极上于一０．１Ｖ（ａｓ．ＳＣＥ）有一不可　逆的还原峰。　

（ａ）　（ａ）ｐＨ：７．７５Ｂ—Ｒ缓冲溶液，０．１ｍｏｌ／Ｌ　ＫＣＩ，　Ｃ：５．８３×１０　ｍｏｌ／Ｌ　

参考文献：　

图１　循环伏安法图　（ｂ）　（ｂ）ｐＨ：９．２６硼砂缓冲溶液，０．１ｍｏｌ／Ｌ　ＫＣＩ，　Ｃ＝５．８３×１０一　ｍｏｌ／Ｌ　

［１］陈翼胜，郑硕，中国有毒植物．北京：科学出版社，１９８７，１５８　１－２３杨仓良．毒药本草．北京：中国中医药出版社，１９９３，３８８　Ｆ３３张亮，张正行．安登魁．雷公藤植物化学成分研究进展．中国药科大学学报．１９９０．２１（４）：２５１　Ｆ４３贾力．雷公藤属植物化学、药理和临床应用．药学通报，１９８５，２０（２）：１０１　［５３李瑞琳，舒达夫．雷公藤的研究与临床应用．北京：中国科学技术出版社，１９８９　Ｆ６３李汉保．王尔玺，徐学银．雷公藤叶与根主要有效成分比较．中国中药杂志．１９９４，１９（４）：２０６　［７３夏志林．中国医药工业．１９９０．２１（２）：５８　［８３钱绍祯．雷公藤的化学及生育调节研究进展．药学通报．１９８８，２３（１）：３　［９３陈芍芳等．雷公藤内酯的含量测定．中草药．１９８８，（８）：２４　［１Ｏ］中国中西医结合风湿类疾病专业委员会．第二次全国雷公藤学术研讨会论文汇编．武汉：１９９１年６月　

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