２０１０年３８卷第１１期　广州化工　・ｌ７・　

吴茱萸生物碱的提取工艺和含量分析研究概况术　

黄厚泽　，谭明雄　，李冬青　

（１玉林市卫生学校，广西　玉林５３７０００；２玉林师范学院化学与生物系，广西　玉林５３７０００）　

摘　要：吴茱萸（Ｅｖｏｄｉａ　ｒｕｔａｅｃａｒｐａ（儿ｓｓ．）Ｂｅｎｔｈ．）是一种具有抗菌、抗癌等多种活性的传统中药，吴茱萸生物碱是吴茱萸具有　

生物活性的重要物质基础，生物碱的提取工艺和含量分析对吴茱萸药材的质量控制和进一步的研究、开发具有重要意义，本文综述了　

吴茱萸生物碱提取工艺和含量分析研究概况。　

关键词：吴茱萸；生物碱；提取工艺；含量分析　

Ｒｅｖｉｅｗ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｉｎ　

Ｅｖｏｄｉａ　ｒｕｔａｅｃａｒｐａ（Ｊｕｓｓ．）Ｂｅｎｔｈ　

ＨＵＡＮＧ　Ｈｏｕ—ｚｅ　，ＴＡＮ　Ｍｉｎｇ—ｘｉｏｎｇ　，ＬＩ　Ｄｏｎｇ—ｑｉｎｇ　

（１　Ｙｕｌｉｎ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｓｃｈｏｏｌ，Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｙｕｌｉｎ　５３７０００；２　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｙｕｌｉｎ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，　

Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｙｕｌｉｎ　５３７０００，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｅｖｏｄｉａ　ｒｕｔａｅｃａｒｐａ（ｊｕｓｓ．）Ｂｅｎｔｈ．，ａ　ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｗｈｉｃｈ　ｈａｄ　ｌｏｔｓ　ｏｆ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｓｕｃｈ　ａｓ　

ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａ　ａｎｄ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．Ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｗｅｒｅ　ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｏｎ－　

ｔｅｎｔ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｐｌａｙｅｄ　ｔｈｅ　ｍａｊｏｒ　ｒｏｌｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ，ａｎｄ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ．　

Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｒｅｖｉｅｗｅｄ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｅｖｏｄｉａ　ｒｕｔａｅｃａｒｐａ（Ｊｕｓｓ．）Ｂｅｎｔｈ．；ａｌｋａｌｏｉｄｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎａｌｙｓｉｓ　

吴茱萸为芸香科吴茱萸属植物吴茱萸（Ｅｖｏｄｉａ　ｒｕｔａｅｃａｒｐａ　

（Ｊｕｓｓ．）Ｂｅｎｔｈ．）干燥近成熟的果实，为常用温中祛寒中药，主产　

于长江流域及长江以南各省区。始载于《神农本草经》，味苦性　

温，有小毒，归肝、脾、胃、。肾经，具有散寒止痛、降逆止呕、助阳止　

泻之功。常用于治疗呕吐泄泻、头痛眩晕…。吴茱萸所含化学　

成分类型较多，包括生物碱、柠檬苦素、萜类、黄酮、香豆精、甾　

体、挥发油、木脂素、多糖等，其中生物碱为其主要有效成分。如　

吴茱萸碱和吴茱萸次碱具有抗菌、抗癌、抗炎、镇痛、抗血小板聚　

集、抗血栓形成、体温调节和保护心脏等药理作用　Ｉ。　。吴茱萸　

作为一种有良好开发应用前景的传统中药，生物碱的提取工艺　

和含量测定对控制吴茱萸的药材的质量控制和进一步的研究、　

开发具有举足轻重的作用，本文综述吴茱萸的提取工艺研究和　

含量分析慨况。　

１　生物碱提取工艺　

１．１传统溶剂提取法　

用甲醇、乙醇等有机溶剂提取是国内目前研究较多的提取　

工艺。陈洪宝　采用均匀设计法，以吴茱萸总生物碱相对提取　

得率及浸膏得率作为指标，考察吴茱萸生物碱提取最佳工艺条　

件，认为用７０％乙醇提取，溶剂ｌ０倍量用量、提取２．５ｈ，提取２　

次，浸膏得率为２５．２５％，生物碱提取率为１．６３６９％。　１．２超声辅助提取法　

超声辅助提取（ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ—ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ）技术的应用　

原理是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的溶出，另外　

超声波的次级效应，如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等　

也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合，利于提取。　

该技术具有提取时间短、产率高、无需加热、低温提取有利于有　

效成分的保护等优点　。　

甄攀等　利用超声波辅助提取法提取吴茱萸生物碱，研究　

结果表明，用超声波提取辅助可节省大量的时间，用醋酸乙酯提　

取，４５倍溶媒，３０℃下超声提取４０ｍｉｎ，具有较高的提取效率。王　

世永等　在研究３种不同提取方法下吴茱萸碱和吴茱萸次碱的　

提取率，超声提取法吴茱萸碱得率为０．２６６　６％，吴茱萸次碱得　

率为０．２０５４％；而索氏提取法的提取率分别为０．１０３７％和　

０．０９０６％，高于水法（两种碱的得率为０．０１１７％和Ｏ．００２９％）。　

另外，超声提取只需要１ｈ，而水提法需２ｈ。索氏提取法则需４ｈ。　

认为采用超声提取法较常规的水提取和索氏提取方法效率高、　

时间短、提取温度低，是提取吴茱萸碱和吴茱萸次碱的较好方　法。　

１．３超临界ＣＯ，萃取法　

超临界流体萃取（Ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ　Ｆｌｕｉｄ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ）的应用原理　

是利用超Ｉ临界流体（ＳＦ）为萃取剂，从液体或固体中萃取出待测　

组分。最常用的ｓＦ为ＣＯ　。应用ＣＯ　一ＳＦＥ技术提取分离天然　

基金项目：广西自然科学基金项目（２０１０ＧＸＮＳＦＡ０１３０６４，０９９１２８４），广西教育厅基金项目（２００６０７ＬＸ０６７）。　通讯作者：谭明雄（１９６８一），女，膊　教授，从事天然产物化学研究。Ｅ—ｍａｉｌ：ｔａｎｍｘＯ０＠１６３．ｔｏｎｉ

　・ｌ８・　广州化工　２０１０年３８卷第１　Ｉ期　

物有效成分，具有萃取速度快、效率高、操作简单等特点，产品　

中没有残留有机溶剂，特别对湿热不稳定物的苹取尤为适用，所　

提取的有效成分具有最大的生物活性一，。　

刘文　等应用超临界流体萃取法提取吴茱萸中吴荣萸碱和　

吴茱英次碱，结果表明在４０　条件下，采用无水乙醇作央带剂，　

萃取　力为３０ＭＰａ，萃取Ｉ付问为９０ｒａｉｎ萃取，吴茱萸碱产品纯度　

可达到２８．５４％、吴茱萸次碱２７．９５％；证明采用趟临界萃取吴荣　

萸　茱萸碱和吴茱萸次碱具有萃取效率高，产品纯度火，无有机　

溶卉ＩＪ残留的优点。　

２生物碱含量分析　

生物碱是吴茱萸果灾的丰要活性成分，包括吲ｌｌ朵类生物碱、　

喹诺酬类生物碱及　它生物碱　吴茱萸次戚属于吲哚类生物　

碱，不溶Ｆ水，也难溶于酸水、碱水及氯仿等溶剂。吴荣萸生物　

碱主要分析测定方法为薄层色谱法，高效液相色谱法、毛细管电　

泳技术等　。　

２．１薄层扫描法　

溥　扣描法（ＴＩ　ｃ）指『｛】一定波长的光照射在薄层板Ｊ－，埘　薄层色潜・Ｉ１有紫外或可见吸收的斑点或经照射能激发产生荧光　

的斑点进行扫描，将扫描得到的　谱及积分值用１二药品的质　

检　的方法　与高效液卡『ｊ色借法相比，具有多通道效应，可同时　

半行分离分析多个样　；流动相　量少且选择范Ｒ爿宽、更换方　

便；固定相为～一次性使ｆｆ｛，对样品的预处理要求不高等优点　在　

中药制剂检验巾，已成为重要的常用分析方法之一。　

刘蕴秀，岁淑荣等　首次应用薄层荧光扫描法测定中药吴　

荣萸中５种生物碱：羟丛吴荣萸碱，吴茱萸次碱、吴茱萸酰胺　、　

吴茱员碱、Ｎ～［ｉ］酰■氧一吴荣萸次碱的含鞋。结果显示：各生　

物碱的线性艟　：２０．５—２４５￣ｇ，旧收字为９６．８％～１０４．５％，　

ＲＳ１）＝３．０８％～４．７５％，分离度较好，结果准确稳定、简便、快捷，　

足分析父荣萸及　制剂质量的简便有效的手段之一，但也存在　

分离效率低、检测峰容量有限的缺点。　

２．２高效液相色谱法　

高效液相色谱法（ＨＰ｜　ｃ）由于具有较高效的分离效能，较宽　

的通用范同及条件优化的灵活性等优点，　物碱分析中得到　

丁，广泛的应Ｊ｛ｊ。徐艳春等　利用ＩＩＰＩ　ｃ法测定吴荣萸生物碱的　

含量。结果　永，测定组分具仃较好的线性关系和分离度，吴荣　

萸碱及吴茱萸次碱回收率分别为９７．８２％，ＲＳＤ＝０．８１％和　

９７．００％，ＲＳＤ＝１．１１％，该方法简便易行、有效、重现性好。谢娟　

等“也利用ＨＰＬＣ法测定吴茱萸水提物中的吴茱萸碱和吴茱萸　

次碱的含量．．结果显示吴茱萸碱浓度在０．２～４．０　ｇ／ｍＬ范围内　

呈良好的线性关系，ｒ＝０．９９９７，平均回收率为１０１．５０％，ＲＳＤ＝　

１．９３％；哭茉萸次碱浓度在０．５～６．Ｏ　ｇ／ｍＬ内呈良好的线性关　

系，Ｒ＝０．９９９９，平均回收率为１００．８０％，ＲｓＤ＝０．７２％。　

反相高效液相法（ＲＰ—ＨＰＬＣ）也用于吴茱萸生物碱的含量　

测定，邹巧根等　建立了利用ＲＰ—ＨＰＬＣ测定吴茱萸碱及吴茱　

萸次碱的定量方法，主要色谱条件为：色谱柱流动相为：水一乙　

腈一冰乙酸一四氢呋哺（１Ｏ０：９０：０．２：２）（ｐＨ＝５．０）；流速为　

１．ＯｍＬ／ｍｉｎ；检测波长２５４ｎｍ；线性范围０．０４～０．２ｎｇ，吴荣萸碱　

及吴茱萸次碱浓度与峰面积具有良好相关性．ｒ值分别为　

０．９９９８，０．９９９５，加样回收率分别为９９．２５％。　

２．３毛细管电泳法　

毛细管电泳法与ｆｆＰＩ　ｃ相比，具有分离时间更短，杂质干扰　

更少，使用有机溶剂少，操作简便等优点，满足了分析某些生物　

碱的要求。周兴旺等　采用高效毛细管电泳法测定吴茱萸提取　物中的吴茱萸次碱的含量，针对吴荣萸次碱不溶于水，也难溶于　

酸水、碱水及氯仿等溶剂，进样后易产生沉淀而造成毛细管堵塞　

使电流中断。并加入乙腈或甲醇对疏水性的吴荣萸次碱起增溶　

作用，有效改善峰形与柱效。对吴荣荧次碱测定的线性范嘲为　

８～８０ｊｘｇ－／ｍＬ；检出限为０．９　ｎ１Ｌ。　

２．４　液相色谱一电喷雾串联质谱联用法　

液相色谱一电喷雾串联质谱联ｊＨ技术（ＨＩ　Ｉ’Ｃ—ＥＩＳ—Ｍｓ）具　

有极强的定性能力，町有效的分析复杂混合物的　．个和多个组　

分。特别是对一些没有标准物质的生物碱成分，利丌ｊ屯细管电　

泳及高效液相色谱法等这几种测定方法显得儿能力Ｒｔ，ＨＩ　ＪＩ．（：　

Ｅ１Ｓ—ＭＳ却可以提供较为满意的定性定　信息。张雪琴等　除　了采用ＲＰ—ＩｔＰＬＣ对吴茱萸次碱进行含量洲定外，还采　ＨＩ　Ｊｌ＿Ｃ　

—ＥＩＳ—ＭＳ联用法，通过色谱保留时问和相应的质谱信息对不　

同产地中药吴茱萸巾的其它４种ｑ‘物碱成分：吴茱萸碱、经　吴　

茱萸碱、吴茱萸酰胺甲、吴茱萸酰胺等生物碱成分进行定　分　

析，方法简单，快速。灵敏。结果令人满意，为控制哭荣萸的质　

量，保征药效提供＿『部分科学依据。　

２．５　电喷雾解吸电离质谱法　

电喷雾解吸电离质谱（ＤＥＳ１一ＭＳ）是利用电喷雾解吸电离　

（ＤＥＳＩ）的离子化技术，其主要优点足能够任大气压下直接ｘｌＪ‘固　体表面的痕　物质进行解Ｉｌ及电离，形成离了后被质谱愉测。ｆ“　

于任大气压Ｆ进行操作（样品更换等较便利）和不需要样品预处　

理，使得ＤＥＳＩ适合于进行现场、存线分析，具彳ｆ灵敏度高、速度　

快、特异性好等特点。　

陈焕文等　利用电喷雾解吸电离质谱往不需要样品预处弹　

的前提下进行复杂基体样品分析，采Ｈ】酸性｝｝Ｊ醇一水混合溶液　

作为喷雾试剂，在优化了的实验条件Ｆ快速ｌ扶得Ｉ，吴荣萸的　

ＤＥＳＩ—ＭＳ指纹谱图，然后利用串联质谱对吴茱荧于燥未成熟果　

实中有重要活性的５种生物碱：吴荣萸碱（分子量３０３）、吴荣萸　

酰胺（分子量３０７）、羟基吴茱萸碱（分子昔３ｌ９）、哭茱萸次碱（分　

子量２８７）和吴茱萸酰胺甲（分子量３０５）进行Ｊ，结构鉴定。　验　

表明，基于固体表面解吸电离质谱分析的方法不需要萃取～分　

离手续，单个样品测定时问不超过１．５ｍｉｎ，人幅度提高了分析速　

度。如果将ＤＥＳＩ—Ｍｓ获得的中草药的指纹谱图与化学汁量学　

工具（如ＰＣＡ等）相结合，还可恨据吴朱萸中主婪ｑ二物碱组分对　

吴茱萸的真伪进行快速鉴定，有望在药品品质的存线监测和工　

艺过程控制中发挥重要作用。　

综上所述，吴茱萸在提取和含量分析方面已取得了较好的　

成果，这对于吴茱萸的进一步研究和开发具有重要意义。　

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