草原与革业Ｇｒａｓｓｌａｎｄ Ａｎｄ Ｐｒａｔａｃｕｈｕｒｅ第２５卷２０１３年第３期 ４９
参考文献：
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［收稿日期］ ［通讯作者］
［基金项目］
［作者简介］ ２０１３－０３－１５ 张 昊 内蒙古科技创新引导奖励资金项目蒙古退化
植被恢复技术和定向经济型植物产业化种植
基地建设与示范（２００８２００２）；草原矿区生态
治理关键技术集成研究与示范；草原生态保
护补助奖励机制实施区遥感监测与评价技术
研究等项目资助。
白文科（１９８６一），男，内蒙古苏尼特右旗人，
在读硕士，研究方向数量生态。
秋水仙素处理山丹新麦草幼苗的染色体加倍研究
张秀丽 ，张利军
（１．内蒙古广播电视大学，内蒙古 呼和浩特０１０ｏｉ１；
２．中国农业科学院草原研究所，内蒙古呼和浩特０１００１０）
［摘要］本文用不同浓度秋水仙素和不同处理时间对山丹新麦草幼苗进行染色体加倍研究。结果表明：最适宜
的处理浓度和时间是０．１０％的秋水仙素处理２４ｈ的四倍体诱变率最高，达６２．５％。
［关键词］山丹新麦草；幼苗；秋水仙素；染色体加倍
［中图分类号］￥８１３．２ ［文献标识码】Ａ ［文章编号］２０９５－－５９５２（２０１３）ｏ３一Ｏｏ４９一ｏ４
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｄｏｕｂｌｉｎｇ ｏｆ Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ ｐｅｒｅｎｎｉｓ
Ｋｅｎｇ．ｃｖ．ｓｈａｎｄａｎ ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ
ＺＨＡＮＧ Ｘｉｕ－ｌｉ ，ＺＨＡＮＧ Ｌｉ－ｊｕｎ
（１．Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ｒａｄｉｏ＆ＴＶ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｏｈｈｏｔ ０１００１ １，Ｃｈｉｎａ；
２ Ｇｒａｓｓｌａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈｏｈｈｏｔ ０１００１０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ，Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ ｐｅｒｅｎｎｉｓ Ｋｅｎｇ．ＣＶ．ｓｈａｎｄａｎ ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ ｗｅｒｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｌｃｈｉｅｉｎｅｓ ｏｆ ｄｉｆｅｒ－ ｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｔｉｍｅ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ山ｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ０．１０％ｅｏｌｃｈｉｅｉｎｅｓ ｆｏｒ ２４
ｈｏｕｒｓ ｗａｓ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ａｎｄ ｐｌａｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ４Ｘ Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ ｐｅｒｅｎｎｉｓ Ｋｅｎｇ．ｅｖ．ｓｈａｎｄａｎ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ，ｒａｔｉｏ ｏｆ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｗａｓ
６２．５％．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ ｐｅｒｅｎｎｉｓ Ｋｅｎｇ．ＣＶ．ｓｈａｎｄａｎ；ｓｅｅｄｌｉｎｇ；ｃｏｌｃｈｉｅｉｎｅ；Ｃｈｏｒｏｍｏｓｏｍｅ ｄｏｕｂｌｉ
ｎｇ ５０ 草原与草业Ｇｒａｓｓｌａｎｄ Ａｎｄ Ｐｒａｔａｃｕｈｕｒｅ第２５卷２０１３年第３期
新麦草属（Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ Ｎｅｖｓｋｉ）是禾本科
（Ｇｒａｍｉｎｅａｅ）小麦族（Ｔｒｉｔｉｃｅａｅ）中较小的一个属，其
染色体数２ｎ：２ｘ＝１４，约１０种 。］，主要分布于欧
亚地区的草原及半荒漠地区。山丹新麦草（Ｐｓａ—
ｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ ｐｅｒｅｎｎｉｓ Ｋｅｎｇ．ＣＶ．ｓｈａｎｄａｎ）为野生栽培
品种 ，属下繁草，具有耐践踏、耐牧、营养生长期
长等 许多优点，也是一种改良干旱草地和培育
抗旱牧草品种的材料。但山丹新麦草叶量少，种子
较小，播种建植困难。
本实验采用秋水仙素处理山丹新麦草幼苗进
行染色体加倍研究，试图提高其茎叶产量，增大种
子体积，改善其品质和适口性，增强抗逆性，扩大山
丹新麦草的种植范围，丰富新麦草的种质资源，为
新麦草的育种提供新材料。
１材料与方法
１．１试验材料
供试材料为山丹新麦草（Ｐｓａｔｈｙｒｏｓｔａｃｈｙｓ ｐｅｒｅｎ—
ｎｉｓ Ｋｅｎｇ．ＣＶ．ｓｈａｎｄａｎ，２ｎ＝１４，ＮＮ），种子来源于中
国农业大学。
１．２试验方法
１．２．１秋水仙素处理二倍体幼苗
在二倍体山丹新麦草幼苗长出３～５个分孽
时，留取根约２～３ｃｍ，并适当剪去一定长度叶片，
然后在浓度为０．０５％、０．１％和０．２％的秋水仙素溶
液中分别浸泡１２ｈ、２４ｈ和３６ｈ，使分孽节以下部分
没于药液，处理完毕后用自来水冲洗幼苗５～６次，
移栽于盆中沙土，保持高湿至成活。
１．２．２多倍体植株的鉴定
（１）气孔保卫细胞大小鉴定
对经秋水仙素处理过的成活植株，从形态上观
察变异明显的幼苗，用尖镊子撕取叶片中部的下表
皮，置＝Ｆ载玻片上，制作临时装片。在４０ｘ光学显
微镜下，用显微测微尺测量幼苗叶片保卫细胞的长
度和宽度，每个叶片随机测量１０个气孔，取平均值
进行比较 ，以气孑Ｌ保卫细胞显著增大作为变异
的初步鉴定指标。
（２）细胞学鉴定
对气孔保卫细胞显著增大的变异植株，取其根
尖，用石炭酸品红溶液染色法制片，在显微镜下观 察并摄像。以染色体的数目来判断其倍性。染色
体制片操作步骤如下：从根系中取出新鲜、光滑、白
色透明的长度约１．５ｃｍ的根尖，放入冰水中处理
２４ｈ，然后用卡诺固定液（９５％乙醇：冰醋酸＝３：１）
固定２２～２４ｈ，１Ｎ ＨＣ１解离８ｍｉｎ后用石炭酸品红
溶液染色、压片，镜检，观察统计不同根尖细胞的染
色体数目，将分散相好的片子用Ｏｌｙｍｐｕｓ显微摄影
仪照相 。
２结果与分析
表１所示的诱导情况表明：随着秋水仙素处理
浓度的提高，植株的成活率呈下降趋势，而在同一
处理浓度下，随着处理时间的延长，植株的成活率
也呈下降趋势。在０．０５％处理浓度下，处理２４ｈ植
株的成活率和四倍体诱变率都比较高，分别为
２０．３７％和１８．１８％，而１２ｈ、３６ｈ处理时间下，没有
诱导出四倍体；在０．１％处理浓度下，处理１２ｈ和
２４ｈ的四倍体诱变率分别达到７．７％和６２．５％；在
０．２％处理浓度下，各个处理时问下的植株成活率
均很低，而且成活植株中没有鉴定出四倍体植株。
以上结果表明，对新麦草幼苗进行多倍体诱导时，
秋水仙素的浓度和处理时间不宜过高和过长，最适宜的
处理浓度和时间是Ｑ １０％的秋水仙素处理２＿Ａｈ。
２．２植株的倍性鉴定
２．２．１ 气孔保卫细胞大小鉴定
诱变成功的多倍体，气孔保卫细胞增大，特别 ５２ 草原与草业Ｇｒａｓｓｌａｎｄ Ａｎｄ Ｐｒａｔａｃｕｈｕｒｅ第２５卷２０１３年第３期
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［收稿日期］２０１３—０３—１４
［作者简介］张秀丽（１９７７一），女，内蒙古卓资县人，硕士，
讲师，主要从事植物遗传育种与远程教育研
究工作。
山野豌豆种子发芽试验方法研究
郭明英，尤金成，张木兰，鸟 兰，伟 军
（呼伦贝尔市草原工作站，内蒙古 呼伦贝尔０２１００８）
［摘要］对山野豌豆几种种子发芽试验方法研究结果表明：因采用的方法不同所得的效果也不同，用９８％浓硫酸
处理山野豌豆种２０ｍｉｎ，种子发芽率从２８％提高到９４％；采用６０目砂纸磨破种皮与锉磨处理，种子发芽率由２８％
分别提高至４８％与７２％；热水处理效果不佳；低温与高温处理几乎无影响。
［关键词］山野豌豆；种子；发芽试验；研究方法
［中图分类号］￥８１３．２ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］２０９５－－５９５２（２０１３）Ｏ３一ｏ０５２一ｏ３
山野豌豆（Ｖｉｃｉａ ａｍｏｅｎａ）为豆科野豌豆属多
年生牧草，分布在欧洲、非洲及亚洲各地，我国东
北、内蒙古、甘肃、青海、山西、陕西、河北和河南等
地均有分布，是一种生物量高、品质优良、叶量丰
富、抗旱耐寒、耐践踏并可做绿肥的豆科牧草¨ ，
也是良好牧草，而且全草药用，有清热解毒的功
效 。
山野豌豆在呼伦贝尔各地区均有分布，主要生
于山坡、林缘、草地与灌丛中。近年来，学者对山野
豌豆染色体数目及核型分析 、凝胶电泳 、地上
生物量的动态研究 ］、化学成分定性分析 与生
物学特性及其利用 ¨等方面做了大量卓有成效的
研究报道，但对山野豌豆种子发芽试验研究方法报
道较少。因此，本试验对山野豌豆种子在不同条件
下进行发芽试验，为山野豌豆的研究与利用提供相
关的科学依据。 １材料和方法
１．１材料来源
试验材料于２０１０年秋从根河市采集野生山野
豌豆种子。该地地处于东经１２２。１２ ～１２２。５５ 、北
纬５０。２２ 一５２。３０ 之间。属寒温带半干旱大陆性气
候，年平均气温为一５．５℃，年平均降雨量４５０ｍｍ，
６—８Ｙｌ占７０％，无霜期在６０ｄ左右。
１．２处理方法
种子发芽试验采用热水、低温、高温、擦破种皮
和９８％浓硫酸５种处理方法，热水处理时间分别为
ｏｈ、２４ｈ和４８ｈ，处理温度８０￣Ｃ；低温处理分别为
一２０℃、一ＩＯ￣Ｃ、５ｃｌＣ和２０＂１２，处理时间７ｄ；高温处理
时间分别为０ ｍｉｎ、ｌＯｍｉｎ、２０ｍｉｎ和３０ｍｉｎ，放在
８Ｏ℃的烘箱中进行处理；擦破种皮处理分别对种子
未处理、６０目砂纸磨和锉磨处理；
９８％浓硫酸处理