培养 ６０ｄ 后的观察结果（表 ２）表明：添加 １０％ 马铃薯、香蕉等添加物能显著地促进幼苗的分化、
生长，各项分化、生长指标都明显高于对照，其中 以添加 １０％ 马铃薯和 １０％ 香蕉的分化、生长最好； 其次为添加 １０％ 香蕉和 １０％ 马铃薯的，然而污染 率也随加入添加物而增加，幼苗分化、生长愈好的， 污染愈重。
１．４ 不同添加物壮苗培养基筛选
将幼苗转接到壮苗培养基上，培养基Ａｒ加入或 不加入 １０％ 马铃薯、１０％ 香蕉等添加物 ＋ 糖 ３％＋ＡＣ ０．２％；培养基均加入琼脂粉 ０．７％，ｐＨ５．８。培养条 件同上。试验设培养基中添加 １０％ 马铃薯，添加 １０％ 香蕉，添加 １０％ 马铃薯 ＋１０％ 香蕉，不添加马 铃薯和香蕉（对照）等 ４ 种处理，以筛选最佳添加 物壮苗培养基配方。
细弱 细 较粗壮 中等 细 粗壮 粗壮 中等
Selection on Culture Medium of Tissue Culture
for Anoectochus roxburghih
GAO yan, BAI Yan-bin, ZHAO Yun-xiang (Dehong Tropical Agriculture Research Institute of Yunnan, Ruili 678600, China) Abstract: The culture medium selection is carried out by asepsis stem segment with axilla bud of Anoectochus roxburghih.The culture mediums are made of Ar+6-BA 2.0mg*L-1+IBA 0.2mg*L-1+NAA 0.4mg*L-1+KT 0.5 mg*L-1+3%sugar+0.2% AC for multiplication, Ar+10%potato+10%banana+3% sugar+0.2% AC to get strong seedling, Ar+IBA 0.5mg*L-1+NAA 0.5mg*L-1+2%sugar+0.2% AC for rootage.The surviving percentage of seedling is over 90% on the medium of 7 shares humus soil, 2 shares sand and 1 share perlite. Key words: Anoectochus roxburghih; tissue culture; culture medium
１．３ 不同激素浓度继代增殖培养基筛选
将分化出的丛生芽分割转接到继代增殖培养基 上，培养基 Ａ ｒ ＋ ６ － Ｂ Ａ １～４ ｍ ｇ ·Ｌ－１ ＋ Ｎ Ａ Ａ ０ ． １ ～ ０ ． ８ ｍ ｇ ·Ｌ －１ ＋ Ｉ Ｂ Ａ ０ ． ２ ｍ ｇ·Ｌ －１ ＋ Ｋ Ｔ ０ ． ５ ｍ ｇ·Ｌ －１ ，培 养 基附加糖 ３％、琼脂粉 ０．７％，ｐＨ５．８。培养条件同 上。通过改变 ＢＡ 和 ＮＡＡ 的浓度，共为 ７ 个处理（每 个处理接种三瓶，每瓶５ 个接种块），经继代增殖培 养，筛选培养基的最佳培养配方。
细弱 中等 中等 粗壮
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Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
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林腐殖土、河沙、珍珠岩按 ７∶２∶１ 的比例配制，用 １％～２％ 的多菌灵或高锰酸钾液喷淋消毒。将生根 苗的培养基洗净，用 １％ 的多菌灵水浸泡 １０ｍｉｎ，晾 干，移栽于消毒好的基质上，用无纺布保湿 １０ ～ １５ｄ，移栽成活率可达 ９８％ 以上。
１０％马铃薯
２５
１０％香蕉
２５
１０％马铃薯＋１０％香蕉 ２５
４ ６．１ ６０ ９ ４ ７．２ １００ ２５ ４ ７．６ １００ ２５ ４ ８．５ １００ ２５
４６ １１５ １０５ １４５
３６ １．８ ２．７ １００ ４．６ ３．８ １００ ４．２ ４．２ １００ ５．８ ５．０
①６－ＢＡ１．０＋ＮＡＡ０．２＋ＩＢＡ０．２＋ＫＴ０．５
１５
１３
４５
②６－ＢＡ２．０＋ＮＡＡ０．２＋ＩＢＡ０．２＋ＫＴ０．５
１５
１５
８１
③６－ＢＡ３．０＋ＮＡＡ０．２＋ＩＢＡ０．２＋ＫＴ０．５
１５
１４
５７
④６－ＢＡ４．０＋ＮＡＡ０．２＋ＩＢＡ０．２＋ＫＴ０．５
１５
１３
４８
基均加入琼脂粉 ０．７％，ｐＨ５．８，共设 ８ 个处理，每 处理接种 ５ 瓶，每瓶接种 ５ 株，培养条件同上，以 筛选最佳的生根培养基。
２ 结果与分析
２．１ 不同激素浓度对不定芽继代增殖的影响 试验结果（表 １）：培养 １５ｄ 时，７ 种处理有的
开始分化出不定芽，６０ｄ 后 ７ 个处理中以处理⑥ ＢＡ ２．０＋ＮＡＡ ０．４＋ＩＢＡ ０．２＋ＫＴ ０．５为最佳，分化出的不 定芽为丛生状，且多达 ９０ 个小芽，生长粗壮，分化 率达 １００％，增殖倍数６。其次是处理②ＢＡ ２．０＋ＮＡＡ ０ ． ２ ＋ Ｉ Ｂ Ａ ０ ． ２ ＋ Ｋ Ｔ ０ ． ５ ，不定芽总数 ８１ 个，生长 粗 壮 分化率 １００％，增殖倍数 ５．４。而另外 ５ 个组合的不 定芽分化率和增殖倍数分别是 ８７％、３．５，９３％、４， ８７％、３．７，８０％、３．６ 和 ９３％、３．８。试验表明，芽 的分化和增殖与 ＢＡ、ＮＡＡ 浓度有密切关系，一定 量的 ＢＡ、ＮＡＡ 对不定芽有促进分化和增殖的作用。 ２．２ 不同添加物对幼苗生长的影响
细 粗壮 较细 细 细弱 粗壮 较细
表２ 不同添加物对幼苗生长的影响
添加物
接种数量 株高
６０ｄ后观察
（株）
（ｃｍ）
株高
生根率 分化数 分化总数 分化率 增殖 污染率 生长壮况
（ｃｍ） （％） （个） （个） （％） 倍数 （％）
对 照
２５
⑤６－ＢＡ２．０＋ＮＡＡ０．１＋ＩＢＡ０．２＋ＫＴ０．５
１５
１２
４３
⑥６－ＢＡ２．０＋ＮＡＡ０．４＋ＩＢＡ０．２＋ＫＴ０．５
１５
１５
９０
⑦６－ＢＡ２．０＋ＮＡＡ０．８＋ＩＢＡ０．２＋ＫＴ０．５
１５
１４
５３
８７ １００ ９３ ８７ ８０ １００ ９３
３．５ ５．４ ４ ３．７ ３．６ ６ ３．８
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Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ－１２－源自金线莲组织培养几种培养基的筛选
高 燕，白燕冰，赵云翔
（云南省德宏热带农业科学研究所，云南 瑞丽 ６７８６００）
摘要：用金线莲无菌幼苗带腋芽的茎段进行继代增殖培养，经试验筛选出适宜的培养基分别是：继代增殖 培养基 Ａｒ＋６－ＢＡ ２．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＩＢＡ ０．２ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ ０．４ｍｇ·Ｌ－１＋ＫＴ ０．５ ｍｇ·Ｌ－１＋ 糖 ３％＋ＡＣ ０．２％；壮苗培 养基 Ａｒ＋１０％ 马铃薯 ＋１０％ 香蕉 ＋ 糖 ３％＋ＡＣ ０．２％；生根培养基 Ａｒ＋ＩＢＡ ０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ ０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ 糖 ２％＋ＡＣ ０．２％。生根炼苗时，移栽到腐殖土、河沙、珍珠岩比例为 ７∶２∶１ 的基质上，成活率达 ９８％ 以上。 关键词：金线莲；茎尖培养；培养基；快速繁殖 中图分类号：Ｓ５６７．２３９ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１６７２－４５０Ｘ（２００４）０３－００１２－０３
１．５ 不同激素浓度对生根的影响
不定芽伸长至 ３～４ｃｍ 时，自基部切下，接种 到生根培养基上，培养基为 Ａｒ＋ＮＡＡ ０．１～２．０ｍｇ· Ｌ－１＋ＩＢＡ ０．２～０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ 糖 ３％＋ＡＣ ０．２％，培养
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Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
金线莲［Ａｎｏｅｃｔｏｃｈｕｓ ｒｏｘｂｕｒｇｈｉｈ （Ｗａｌｌ） Ｌｉｎｄｌ］ 又名金线兰、金线草，为兰科多年生草本植物。金 线莲属植物有 ４０ 多种，株高 ８～２０ｃｍ，分布于海拔 ３００～１ ２００ｍ 的山地林下阴湿处［１］。金线莲全草均 可入药，其味平、甘，有清热凉血、祛风利湿、解 毒、止痛、镇咳等功效，主治咯血、支气管炎、肾 炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、风湿性关节炎、肿瘤 等疑难病症，素有“药王”、“金草”、“神药”、“乌 人 参 ”等 美 称 ［２］ 。据 有 关 研 究 测 定 ，金 线 莲 中 的 氨 基酸组成、成分含量及抗衰老活性微量元素的含量 均高于国产和野生西洋参［３］。金线莲叶呈黑紫色， 有光泽，墨绿色中有金黄色网纹，背面淡紫色，奇 特美丽，还是一种极具观赏价值的室内观叶植物珍 品。由于金线莲生态环境条件独特，自然繁殖率低， 生长缓慢，特别是近年来市场需求量猛增，人为大 量采挖及其自然环境的严重破坏，使得金线莲野生 资源日渐枯竭。目前金线莲价格居高不下，鲜草达 ６０～８０ 元 ／ｋｇ，干草达 １ ０００～１ ５００ 元 ／ｋｇ。利用 组培技术快速繁殖种苗，对金线莲的开发利用和野 生资源保护具有现实意义。笔者特将对金线莲组织 培养几种培养基筛选结果报道如下：
１ 材料与方法
１．１ 材料 取金线莲幼嫩茎段为外植体。
１．２ 培养无菌苗 取生长健壮且无病虫害的金线莲幼嫩茎段，去
收稿日期：２ ０ ０ ４ － ０ ３ － ０ ８
叶，放入低浓度的洗衣粉水中漂洗 ３～５ｍｉｎ，然后 用自来水冲洗干净，用 ７５％ 酒精灭菌 ３～５ｓ ，用 ０．１％ 的ＨｇＣｌ２ 灭菌１５ｍｉｎ，再用无菌水冲洗５～６次， 将消毒好的材料切成有 １～２节、带腋芽的茎段，接 种在 Ａｒ＋６－ＢＡ １．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ ０．５ｍｇ－１ 培养基上 （Ａｒ 为 ＭＳ 改良培养基，大量元素减半，微量元素加 倍），ｐＨ５．８，蔗糖 ２％、琼脂粉 ０．７％。培养室温度 （２ ５ ± １）℃，光照时间 ８ ～１ ０ ｈ ·ｄ －１ ，光照强度 １ ５００～２ ０００ｌｘ。