・１２４・　中国民族民间医药　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｊｏｕｍａｌ　ｏｆ　ｅｔｈｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ　ａｎｄ　ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｙ　论著　Ｔｒｅａｔｉｓ　高尿酸血症动物模型研究　孟永会曾俞霖　贵阳中医学院中医一附院泌尿外科，贵州贵阳５５０００１　【摘要】　近年来，随着高尿酸血症患病率不断上升，对高尿酸血症动物模型的研究也越来越多。从造模方法和实验动物的选择上　对其进行了系统的综述。并且对其中存在的问题进行了阐释。　【关键词】　高尿酸血症；动物模型　【中图分类号】１１２５５．７　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１００７—８５１７（２０１０）ｌ１—０１２４—０２　高尿酸血症是由各种原因引起的尿酸产生过多、或肾　脏排出尿酸减少、或两者兼有，使细胞外液的尿酸盐量呈　超饱和状态，一般认为不论男女，当血清尿酸值持续≥　４１６ｔ￣ｎｏｌ／Ｌ（７．Ｏｍｇ／ｄ１）被称为高尿酸血症　。高尿酸血　症是痛风最重要的生化基础，易于发生痛风性关节炎、痛　风石沉积和关节畸形，甚至会累及肾脏引起慢性间质性肾　炎和尿酸性肾结石，这已被多数学者公认。近年来，国内　外文献报道高尿酸血症与高血压、高脂血症、冠心病、脑　卒中、糖尿病等发生率有相关性，而且随着人民生活水平　的提高，高尿酸血症的患病率也在上升。为此，重视对高　尿酸血症的治疗已引起临床的关注。因而，在研究关于治　疗高尿酸血症的课题时，选择一种公认的科学、合理的动　物模型就成为一个至关重要的问题。现将高尿酸血症动物　模型的研究作一概述，以期能为此类课题的研究提供参考。　从现有对高尿酸血症动物模型的研究来看，目前尚缺　乏公认的高尿酸血症动物模型，不论在造模方法，还是实　验动物的选择上，都存在很大的差异。　１造模方法　１．１尿酸酶抑制剂法由于人类缺乏尿酸酶，而大多数动　物包括哺乳类动物，体内存在尿酸酶，可以将体内尿酸进　一步分解为尿囊素。尿囊素为无毒物质，水溶性良好，极　易随尿排出体外，很少在体内蓄积，也不会在组织内形成　造成损害。Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ在１９６５年发现氧嗪酸钾盐（ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｏｘｏｎａｔｅ）无论在体内还是体外作为尿酸酶抑制剂都具有很　强的活性，都可以有效地提高血液和尿液中尿酸和降低尿　囊素的水平　Ｊ。　Ｊｏｈｎｓｏｎ等　成功地用氧嗪酸钾盐（ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｏｘｏｎａｔｅ）　造成了稳定持久地高尿酸血症的大鼠动物模型。他们用含　有５％的Ｋ—ｏｘｏｎａｔｅ的饲料喂养大鼠３周，大鼠的血浆尿酸　盐水平在几天内就可达到对照组的３倍，尿液中尿酸水平　可到对照组的４倍，尿囊素可降至正常水平的一半。而当　上述饲料中再加入１％的尿酸喂养９天，血清中尿酸水平　可达对照组的６倍，尿中尿酸水平甚至可达２２倍，并且随　着时间延长发生了类似于人类的尿酸性肾病。此后这种方　法成为国外高尿酸血症造模的主流方法，但给药途径、剂　量和实验动物有很大变化。Ｈａｌｌ等　在研究抗痛风药时便　采用２％Ｋ一似一ｏｎａｔｅ和３％的尿酸配成的饲料喂养　Ｃ５７ＢＬ／６小鼠造成高尿酸血症的模型。Ｋａｚｕｍｉ　ＩＶＡＫＩ　等　采用腹腔注射（２５０ｍｇ／ｋｇ）的方法给Ｗｉｓｔａｒ大鼠进行造模。　国内近年来也广为采用此种模型。如王海东、喻志峰等。。　在研究金钱草提取物和瑞香苷对高尿酸血症小鼠的影响时，　采用氧嗪酸钾盐作为尿酸酶抑制剂以３００ｍｇ／ｋｇ剂量ｉ．Ｐ　小鼠进行造模。　１．２破坏尿酸酶基因及基因重组法ｗｕ等　通过首先破　坏小鼠尿酸氧化酶基因，再用基因重组法，获得尿酸酶缺　乏的突变小鼠，从而造成高尿酸血症模型小鼠。但该方法　使半数以上突变的小鼠活期不到４周，因此不是理想的动　物模型。　１．３补充尿酸或尿酸前体法在体内，腺嘌呤核苷一次黄　嘌呤核苷一次黄嘌呤一黄嘌呤一尿酸一尿囊素，尿酸经肾　小管分泌排出体外，故增加体内尿酸、尿酸前体（腺嘌呤、　次黄嘌呤、黄嘌呤）的量或抑制肾小管尿酸的分泌均可导　致体内血尿酸含量的增高而致高尿酸血症。　陈光亮等　分别给小鼠腹腔注射尿酸１２５、２５０、５００、　１０００ｍｇ／ｋｇ，ｌｈ后取血测定血清尿酸水平，结果发现小鼠腹　腔注射尿酸可以形成高尿酸血症动物模型，以２５０ｍｇ／ｋｇ剂　量较好。并且观察到小鼠腹腔注射尿酸２５０ｍｇ／ｋｇ　１０ｍｉｎ后　血尿酸达高峰，高尿酸血症维持４ｈ以上。　唐灿等¨。。采用尿酸生成的前体物质次黄嘌呤为模型药　物，制备了一种较为稳定的尿酸增多型高尿酸血症模型。　并对造模的量效、时效、动物性别、黄嘌呤氧化酶抑制剂　的影响等因素进行了考察。经过实验探索出以ｌＯ００ｍｇ／ｋｇ　剂量腹腔注射一次造模，０．５ｈ后血尿酸值达高峰，且经实　验发现此方法造模对于昆明种小鼠无明显性别差异（Ｐ＞０．　Ｏ５），别嘌呤醇能降低尿酸值的高峰及延长尿酸的生成时　间，当别嘌呤醇药效消失后，尿酸生成仍明显增加。　熊湘明等”　采用腺嘌呤（Ａｄｅｎｉｎｅ）加以抑制尿酸的　排泄药物乙胺丁醇（Ｅｔｈａｍｂｕｔｏ１）灌胃进行造模，增加了　尿酸在体内的蓄积。分别给以Ａ５０ｍｇ／ｋｇ，Ｅ２５０ｍｇ，／ｋｓ；　ＡｌＯＯｍｇ／ｋｇ，Ｅ２５０ｍｇ／ｋｇ；Ａ２００ｍｇ／ｋｇ，Ｅ２５０ｍｇ／ｋｇｏ结果表　明低剂量组血尿酸升高不明显，高剂量组血尿酸升高较大，　但肾损害（ＢＵＮ、ＣＲ）较为严重，中剂量组作为高尿酸血　症动物模型较为合适。　金沈锐等　探索建立小鼠高尿酸血症模型的方法。使　用黄嘌呤６００ｍｇ／ｋｇ和乙胺丁醇２５０ｍｇ／ｋｇ，次黄嘌呤　６００ｒａｇ／ｋｇ和烟酸１００ｍｇ／ｋｇ，ｉ．ｇ给药，连续５天。结果：　给药两组与正常对照组之间小鼠血尿酸有显著性差异（Ｐ＜　０．０５），以黄嘌呤和乙胺丁醇组更为明显。使用抑制尿酸合　成的药物（黄嘌呤氧化酶的抑制剂）别嘌呤醇，以及促进　尿酸排泄的药物丙磺舒进行治疗反证，结果两组小鼠血尿　酸均明显降低。　１．４酵母法超高蛋白饮食是引起嘌呤代谢紊乱的重要原　因。酵母含有丰富的蛋白质、核苷酸、Ｂ族维生索等。在　体内充分水解能产生含氮的有机碱（包括嘌呤碱类、嘧啶　碱类）和磷酸，当大剂量的酵母进入体内后，能干扰机体　正常的嘌呤代谢，致嘌呤代谢紊乱，其主要表现为黄嘌呤　氧化酶活性增加，加速了尿酸的生成，从而产生大量尿酸。　陈光亮等　采用酵母膏灌胃复制出小鼠高尿酸血症模　型，以１５—３０ｇ／ｋｇ连续灌胃１—２周较好。不同性别、年　龄正常小鼠及模型组小鼠血尿酸值无明显差异。别嘌呤醇　及苯溴马龙均可降低此高尿酸血症模型小鼠的血清尿酸水　平。刘小青等　选择鹌鹑作为模型动物，以酵母食饵为造　模剂，动态观测鹌鹑血清尿酸，结果表明饲酵母食饵　（１５　ｋｇ）７ｄ，鹌鹑血清尿酸水平明显升高，持续５周。

　论著　Ｔｒｅａｔｉｓ　中国民族民间医药　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｊｏｕｍａｌ　ｏｆ　ｅｔｈｎｏｍｅｄｉｅｉｎｅ　ａｎｄ　ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｙ　・１２５・　２实验动物　２．１　啮齿类动物　目前，多数造模动物都选用的是大鼠、　小鼠。一方面，大、小鼠是实验室的常用动物，操作、饲　养都较为方便，另外，在种属上与人类较为接近，都是哺　乳动物。但它们的尿酸的代谢途径由于存在尿酸酶，与人　类大为不同，使得造模极为困难。上述造模方法多选用大、　小鼠，此处不再累述。　２．２禽类　目前主要有鸡、鹌鹑。已有研究证实禽类与人　类的嘌呤核苷酸代谢途径相似。在尿酸合成和代谢方面与　人类有共同之处：其一，核蛋白水解后的核酸在降解过程　中也能产生嘌呤类化合物而生成尿酸，当饲料里蛋白质和　核蛋白过高时，体内尿酸的生成就大量增加；其二，与人　类一样缺乏尿酸酶，故尿酸是其嘌呤代谢的最终产物，但　种属上与人类差距较大，普通实验室饲养也不方便。１９７４　年小宫山氏在鸡的营养需求研究中心偶然发现频繁发生高　尿酸血症和痛风症的鸡，并成功的将其作为先天性痛风模　型动物分离出来，即埃及产的Ｆａｙｏｕｍｉ品系鸡。这种鸡在　出生后两周左右时，给以高蛋白（４０％）饲料，４—５月内　即可在关节处出现痛风结节，让有这种变化的鸡互配，几　乎所有的鸡都可发生高尿酸血症甚至痛风结节　。刘小青　等　１６　３选用鹌鹑塑造高尿酸血症模型，高量摄人尿酸（３５０　～７００ｍｇ／ｋｇ—ｄｌ１）、腺嘌呤（３００～６００ｒａｇ／ｋｇ・ｄ）可使鹌　鹑血尿酸水平显著升高。持续时间从５～１５ｄ。尿酸代谢过　程中的关键酶即黄嘌呤氧化酶也随尿酸水平升高而显著升　高，且造模后体重无明显降低，并且不造成动物肾脏损伤，　较为安全。　曹克光等ｌ１　为建立高尿酸血症动物模型，以不同剂量　腺嘌呤分别饲喂鸡，设别嘌呤醇作为治疗组，检测血尿酸、　尿尿酸及肾功能变化，并进行肾组织病理形态学及超微结　构观察。结果中剂量组（４ｇ／ｋｇ）鸡于实验第３周血尿酸水　平升高，且持续稳定升高８周以上，肾超微结构改变不明　显，经别嘌呤醇治疗后血尿酸水平降低。　３存在的问题与展望　以上就是高尿酸血症动物模型的研究概况。从中我们　可以看到，国外近年来并无新的造模方法的报道，国内近　年来所作的尝试较多，其中最新的造模方法当属酵母造模　的方法。在这一研究领域，存在的争议问题较多。　３．１与人类发病机理存在差距　目前，因两种先天遗传的　酶缺陷即次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核苷酸转移酶（Ｉ—ＩＰＲＴ）缺　乏和５磷酸核糖１焦磷酸合成酶（ＰＲＰＰ）活性过高所致的　高尿酸血症约占原发性高尿酸血症的２０％，另外８０％系多　基因遗传病，其发病与进食高嘌呤蛋白食物、嗜酒有密切　关系　】　。在临床上还常见到继发性高尿酸血症，即凡可导　致嘌呤合成或尿酸盐产生过多或肾脏对血浆尿酸盐清除率　降低的各种疾病和药物，均可导致继发性高尿酸血症的发　生。目前各种动物模型无论在造模方法还是在实验动物上　都与人类的发病机制存在很大差距，也会影响到对人体发　病机理的进一步深入研究。　３．２缺乏公认的评价指标造模成功与否，目前缺乏公认　的、统一的评价指标，往往是研究单位自行选择评价指标，　不能在行内取得广泛认可。现在的造模方法都考察了造模　药物的量效、时效关系，部分考察了对黄嘌呤氧化酶活性　的影响、肾损害程度以及性别、年龄、禁食、降尿酸药物　对造模的影响，我们看到最新的研究其评价指标较为齐全。　缺乏公认的动物模型又会进一步影响到抗高尿酸血症和抗　痛风药物的评价。　３．３　有无性别差异认识不一　多项遗传流行病学研究表　明¨　，人群中，男性高尿酸血症患病率明显高于女性，约　为女性患病率的２倍。对于实验动物，是否存在同样的性　别差异，结论不一。金沈锐等在造模时均选用雄性动物，　原因是他们发现小鼠雌雄动物及同性动物之间，血尿酸正　常值差异较大，尤以雌鼠个体之间血尿酸值波动较大为明　显，考虑与雌鼠激素分泌波动有关，故本实验仅选雄鼠。　但唐灿、陈光亮等在实验中却发现动物的性别差异对造模　无明显影响，然而多数研究者在实验中多选择雌雄皆用。　选用雄鼠，还是雌雄皆用，两者何者为优，还需今后大量　的深入研究。　３．４造模导致的肾损害问题尚无定论使用造模药物后，　往往会出现不同程度的肾损害。是属于造模药物的副反应　还是由于高尿酸血症导致的并发症，在考察造模是否成功　时，存在肾损害是有利因素还是不利因素，这是个尚须商　榷的问题。　综上所述可见：现在虽然有很多种高尿酸血症的动物　模型，大有“百家争鸣”之势。而将这些造模方法进行对　比，从中发现更为稳定、可靠、合理的造模方法，还有大　量的工作要做。由于酵母造模的方法类似于人类进食高嘌　呤食物所导致的高尿酸血症，故笔者认为，用酵母造模法，　再加以一定剂量的尿酸酶抑制剂而致高尿酸血症动物模型，　可能会取得更好的效果。　参考文献　［１］孟昭亨．痛风［Ｍ］北京：北京医科大学出版社中国医科大学联合出　版社．１９９７．５１．　［２］Ｉ．Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ．Ｔｈｅ　ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｕｒｉｃａｓｅ　ｂｙ　ｏｘｏｎａｔｅ　ａｎｄｂｙ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ　ｏｆ　ｓ－ｔｒｉａｚｉｎｅｓ［Ｊ　ｊ．Ｊ．Ｂｉｏ１．Ｃｈｅｍ．，１９６５，２４０：２４９１．　［３］Ｗ．Ｊ　Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｂ．Ｓｔａｖｒｉｅ，Ａ．Ｃｈａｒｔｒａｎｄ，Ｕ　ｂｙｓ－ｔｒｉａｚｉｎｅｓ：８３１　ａｎｉｍａｌ　ｍｏｄｅｌ　ｆｏｒ　ｈｙｐｅｒｕｉｃｅｍｉａ　ａｎｄ　ｈｙｐｅｎＬ，＇ｉ－ｃｏｓｕｆｉａ［Ｊ］．　Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐｔ１．Ｂｉｏ１．Ｍｅｄ，１９６９，１３ｌ（１）：８，　［４］Ｉｒｉｓ　Ｈ．Ｈａｌｌ，Ｊｏｈｎ　Ｐ．ＳｃＯＶｉｌｌｅ，Ｄｖｉｄ　Ｊ．Ｒｅｙｎｏｌｄｓ，ｅｔ　ａ１．ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄｅｙ・　ｃｌｉｃ　ｉｍｉｄｅｓ　ａｓ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ａｎｄ—ｇ０ｕｔ　ａｇｅｎｔｓ［Ｊｊ．Ｌｉｆｅ　ｓｃｉｅｎｓｅ，１９９０，４６　（２６）：１９２３．　『５］Ｋａｚｕｍｉ　ＩＶＡＫＩ，Ｙｕｋｉｏ　ＹＯＮＥＴＡＮＩ．ｈｙｐｅｒｕｒｉｅｅｍｉｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅｈｏｌｉｎｅｒｇｉｃａ．　ｇｅｎｔｓｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．Ｊａｐａｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍｅｏｌ，１９８２，３２：３４３．　［６］王海东，葛飞，郭玉松，等．金钱草提取物对高尿酸血症小鼠的影响　［Ｊ］．中国中药杂志，２００２，２７（１２）：　９３９．　［７］喻志峰，杨澄，仇熙，等．瑞香苷对高尿酸血症小鼠的影响［Ｊ］．中　国药科大学学报，２００２，３３（２）：１４２．　［８］ｗｕ—ｘｅｔａ１．Ｈｙｐｅｒｕｒｉｃｅｍｉａ　ａｎｄ　ｕｒａｔｅ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ　ｉｎ　ｍａｔｅ　—ｄ髂ｅ—ｄｅｆｔ—　ｅｉｅｎｔ　ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ１．ＡｅＭ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ，１９９４，９１（２）：７４２．　［９］陈光亮，孙秀霞，王钦茂，等．小鼠高尿酸血症模型的研究［Ｊ］．中　国药理学通报，２００１，１７（３）：３５０．　［１０］唐灿，杨奎．高尿酸血症动物模型初探［Ｊ］．中药新药与临床药理，　２０００，１１（５）：２９２．　［１１］熊湘明，曲竹秋．大鼠高尿酸血症模型建立［Ｊ］．天津中医学院学　报。２００１。２０（４）：２８、　［１２］金沈锐，郑军，刘绍唐．小鼠高尿酸血症模型初探［Ｊ］．成都中医药　大学学报，１９９９，２２（１）：４９．　［１３］陈光亮，张清林，马晓芹，等．酵母致高尿酸血症模型［Ｊ］．中国药　理学通报。２００３．１９（４）：４６７．　［１４］刘小青，张冰，胡京红，等．鹌鹑高尿酸血症模型建立及莴苣提取物　对其影响的实验研究［Ｊ］．中国　中西医结合杂志，２００３，２３（Ｉ）：４４．　［１５］方厚华．医学实验模型动物［Ｍ］．北京：军事医学科学出版社，　２０ｏ２．７３．　［１６］刘小青，张冰，刘春梅，等．鹌鹑高尿酸血症模型建立初探［Ｊ］．中　国病理生理杂志，２００１。１７（１０）：１０３８．　［１７］曹克光，臧力学，唐丽，等高尿酸血症动物模型的建立与应用　［Ｊ］．实验动物科学与管理，２０００，１７（２）：６．　［１８］南海荣，钱荣立．高尿酸血症和痛风的遗传学研究进展［Ｊ］．国外医　学・内分泌学分册，２００２，２２（５）：３２６．　（收稿１３期：２０１０．０４．０７）