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猪抗原抗体检测方案
一、检测的目的
1．疾病预警
（1）了解疾病在场内的污染状况，制定相应策略
（2）提前了解免疫抗体的高低及整齐度，及时纠正
2．免疫程序的评估与优化
（1）了解母源抗体的消长情况
（2）疫苗接种的效果-----免疫抗体监控
3．疾病控制和清除计划：通过系统检测和措施，实施疾病的控制或清除计划
4．疾病诊断
二、重点进行监测三大猪病：猪瘟、蓝耳、伪狂犬
1. 猪瘟主要问题
（1） 抗体水平偏低
（2） 疫苗的选择及剂量：细胞苗？脾淋苗？，150 RID = 37 PD50
（3） 持续性感染猪的存在
2. 猪瘟抗原检测
（1） 常用方法：PCR、荧光抗体和ELISA
（2） 检测目的：引进种猪或后备母猪时的检查，疑似病例的确诊，猪群带毒率的定期评估
（3） 结果分析：猪瘟抗原ELISA阳性结果代表野毒阳性，PCR和荧光抗体阳性结果有可能是疫苗毒的干扰。
3. 猪瘟抗体ELISA检测要点:
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A.怎样评估母源抗体和免疫效果
1）当母源抗体的降到阻断率（Block）50%以下时，才能不干扰疫苗的免疫。（确定首免日龄）
2）免疫后阻断率（Block）上升到50%以上才能代表免疫合格。
良好的种猪场要求：阳性率100%（>40），合格率90%（>50） cv<25%）
B. 剔除持续感染猪或无抗体反应猪。
1）持续性感染的种猪可间断性或持续性排出病毒，他们成为整个猪群的感染源。
2）首次使用应对母猪群进行检测，对抗体低下猪只进行补针后6周复检。若仍然没有抗体产生，应进行淘汰。
C. 猪瘟抗体检测结果分析
1） Cutoff值是 >1：16代表抗体阳性
2） 实际生产中至少要在1：64以上才有一定的保护，经产母猪多次疫苗免疫后抗体水平一般会在1：256到1：1024左右波动。
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D. 猪瘟抗体 ELISA检测时间表
品项 种类 时间 目的 取样数量
日常评估 后备母猪 在配种前 野毒感染和抗体水平 全部
经产母猪 3个月一次 评估母猪群的健康状态和抵抗力 20
商品猪 二免后4-6周 监控免疫效果 20
首免日龄
仔猪 21日龄 评估母源抗体衰减水平，选择最佳首免时间
15
28日龄 15
35日龄 15
42日龄 15
4.蓝耳病的主要问题
（1） 毒株的变异与交叉保护
（2） 疫苗的选择：灭活疫苗、弱毒疫苗
（3） 猪群稳定性评估
5.蓝耳病的检测方法
（1） 抗原：RT-PCR
（2） 抗体：ELISA
6.蓝耳病的抗体检测结果分析
（1）对于稳定的种猪群，S/P值为0-2左右，很少大于2.5.
（2）良好免疫群的典型的S/P比值范围为：0.7 to 1.8 ；有些可能>2.0 。
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（3）如果每年免疫两次，仍有多于20％的猪抗体为阴性，需要对疫苗的管理和使用进行检查。
（4） 当S/P >2.5 – 病毒血症
（5） 当S/P >3.5-高于5.0 – 急性感染
（6） 6-7周龄时，多数仔猪抗体可变为阴性（无病毒循环）
（7） 引进种猪，要剔出阳性值SP>1.2的猪只，保证种群的稳定
（8） 公猪抗体阳性值SP>2.5的最好不要使用
（9） 母猪群间隔1-2个月对群体进行监控，了解猪群等稳定状态
（10） 仔猪了解病毒的感染时间，加强药物保健
（11） 当S/P >2.5时，猪群即呈现不稳定状态，需要采取措施进行控制
7.蓝耳病抗体检测时间表
品项 种类 时间 目的 取样数量
日常评估 后备母猪 在配种前 防止引入不稳定猪只 全部
经产母猪 2个月一次 了解猪群稳定性 20
商品猪 3个月一次 监控免疫效果和稳定性 20
8.伪狂犬的主要问题
（1）种猪群野毒抗体（gE抗体）阳性率居高不下
（2）中大猪的呼吸道问题
（3）散发性母猪繁殖障碍
（4）净化方案的选择
9.伪狂犬的检测方法
（1） PRVgB：总抗体，S/N值和阻断率（BLOCK值）
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（2） PRVgE（I）：野毒抗体
（3）通过PRV-gB和PRV-gI抗体检测可了解本场伪狂犬病的流行状况，制定相应的免疫方案及措施。
10.伪狂犬清除计划
（1） 在阳性率低的种猪群，建议一次性淘汰所有阳性种猪。每个季度筛选一次，加强疫苗免疫，同时保证引入阴性后备母猪和种公猪，一般一年见效。
（2） 在阳性率很高的种猪群，保证引入阴性后备母猪和种公猪，加强免疫。每季度抽样监控野毒阳性比例防止感染扩大并用PRV-gB评估免疫抗体水平，三年可见效。
11.伪狂犬检测时间表
品项 种类 时间 目的 取样数量
日常评估 后备母猪 在配种前 野毒感染和抗体水平（gB和gE抗体） 全部
经产母猪 3个月一次 评估母猪群的健康状态和抵抗力（gB和gE抗体） 20
商品猪 免疫后4周 监控免疫效果（gB抗体） 20
首免日龄
仔猪 70-80日龄免疫前 评估母源抗体衰减水平，选择最佳首免时间（gB抗体） 15