4、测量吸光度时，需用待装溶液充分洗涤比色 皿；使用后必需洗净比色皿。
5、使用过的展开剂倒入指定的回收瓶中。
六、思考题
1、干红辣椒用NaOH溶液浸泡后，为什么不采用过滤 或抽滤的方法进行固液分离？
2、干红辣椒的除辣操作时，水浴温度不能超过90℃， 水浴时间不宜过长，其原因是什么？
3、薄层色谱中的Rf值有何意义？不同的展开系统对Rf 值会产生什么影响？
愿每位同学掌握好在本课程学习中 学得的实验操作技能，在后续课程的实 验和研究型工作中进一步提高和完善， 成为一名有创新能力的应用型人才。
欢送各位进入大二学习！
保留固形物备用。将干的红辣椒剪碎去籽并捣碎，
称取20g，加入180mL（按1︰9的比例）15%NaOH 溶液于烧杯中，在90℃水浴上加热1.5h后，将杯内 液体倾倒于洁净的纱布上滤去碱液，用水洗涤至中
性，拧干纱布，保留固形物备用。
2、辣椒色素的提取
置于索氏提取器的滤纸筒中装入辣椒，筒上 口放一小团脱脂棉；250mL洁净的圆底烧瓶中加 入120mL95％乙醇和几粒沸石，加热进行抽提五 次以上（提取液颜色很淡时即可停止抽提）后， 将提取装置改成常压蒸馏装置，蒸出大部分乙醇 （约剩余5～6mL乙醇）。将残液及少量馏出液 洗烧瓶的洗涤液倾入已准确称出重量的试剂瓶中， 在100℃烘干后称重，计算提取率。
3、薄层色谱分析分离
取少量干燥的辣椒色素于点滴板上，用适量石油醚溶
解。用平口毛细管吸取辣椒色素溶液点样在两个点样原点
上，点样2～5次，点样后的斑点直径小于3mm，用石油醚 (沸点30~60℃)与丙酮10︰1(体积比)的混合液作展开剂展开。
展开后取出薄层板，立即划出前沿位置，电吹风吹干除
去展开剂，轻画出各斑点的位置、观察斑点颜色并计算Rf 值，并根据薄层色谱展开图以及它们的结构确定这三个斑点
辣椒红色素的提取和 检测
浙江万里学院化学实验中心 2008.12
一、实验目的
1、了解从辣椒中提取辣椒红色素的基本 原理和方法
2、进一步掌握索氏提取、薄层色谱和吸 光度测定等操作技术。
二、实验原理
红辣椒中含有多种色素，其含量可高达 3.2g/100g( 成 熟 的干 辣 椒 ) ， 已 知 的 有 辣 椒 红色 素 （ C40H56O3 ， M=584.85g·mol-1 ） 、 辣 椒 玉 红 素 （C40H56O4，M=600.85g·mol-1）和β-胡萝卜素，它 们都是类胡萝卜素，在结构上都属于二环四萜化合 物。辣椒红色素是深红色粘性液体或深胭脂红色结 晶的天然食用色素，并具有营养保健作用和抗癌能 力。辣椒红色素易溶于乙醇、丙酮、二氯甲烷、植 物油而不溶于甘油和水。
的归属。
4、辣椒红色素的色价测定
准确称取0.0020g（精确到0.0002g）辣椒色素，用丙酮 溶解并定容成25mL，以丙酮作参比，测定460nm处的吸光
度，计算 E11c%m来确定辣椒红色素的色价，换算460 ，计算辣
椒红色素的含量。
提取辣椒红色素的实验流程
烧瓶：20g去蒂 去籽的辣椒粉 120mL15％NaOH
辣椒中含有强烈辛辣味的辣素（辣椒碱），含量
一般为0.2％～0.5％。固态辣椒碱是白色或淡黄色针 状晶体，不溶于水，易溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿。
辣椒碱都是酰胺类化合物，通式为
O
OCH3
R－C－NH－CH2－ －OH
其酚羟基具有弱酸性，可溶于NaOH溶液中。 用有机溶剂提取红辣椒中的辣椒红色素过程中，
4、硅胶薄层板上的点样量只能通过实验来确定， 故在薄层板上应尽量点上多个有区别的试样，确保能 有展开结果。
5、层析缸中应提前加入展开剂，避免边缘效应。
操作注意事项
1、固-液提取和常压蒸馏时，应加沸石，冷却 水应低进高出。
2、滤纸筒的直径应略小于提取器内径，其高 度应高于虹吸管，低于蒸气上升管。
3、只能用铅笔在薄层板上轻轻画出点样原点， 点样量不能过多或太少，以免影响展开效果。展 开结束后，应立即画出前沿位置。
测460nm 吸光度A
称取0.0020g
丙酮溶解 定容成25mL
少量溶解 展开 点样
薄层色谱图
计算Rf值
五、实验关键
1、用量筒量取不同试剂前，应将量筒清洗干净， 避免带入杂质。
2、辣椒粉除辣后，需用自来水反复漂洗至中性， 并尽可能挤干水分。
3、在装入辣椒红色素浓缩液前，应称出试剂瓶的 准确质量，便于计算色素提取率。
需先除去辣椒碱，提取得到的辣椒色素经浓缩、干燥 后，可用薄层色谱进行分析分离，由分光光度法测定 辣椒红色素的色价及含量。
三、实验仪器与试剂
仪器：
圆底烧瓶(250mL)，索氏提取器，直型水冷凝管，蒸馏 头，层析缸，CMC硅胶薄层板(5×15cm玻璃板)，烧杯(250 mL)，锥形瓶(100mL)，试剂瓶(100mL)，量筒(100mL)，点 滴板1个，温度计(100℃)，电热套，恒温水浴锅，722光栅 型分光光度计，药物天平，电子天平，组织捣碎机，电吹 风，剪刀(公用)，玻棒，铅笔，小尺子(自备)。
试剂：
红辣椒干、95％乙醇，丙酮，石油醚(沸点30～60℃)， 15％NaOH溶液。
材料：
毛细管，沸石，纱布，脱脂棉，滤纸，擦镜纸，pH试 纸。
四、实验步骤
1、辣椒碱的除去
将干的红辣椒剪碎去籽并捣碎，称取20g，加入 180mL（按1︰9的比例）15%NaOH溶液于烧杯中， 在90℃水浴上加热1.5h后，将杯内液体倾倒于洁净 的纱布上滤去碱液，用水洗涤至中性，拧干纱布，
4、薄层板上点样量过多或过少，对薄层色谱分离效果 有什么影响？
5、如需采用薄层色谱方法定量测定红辣椒中辣椒红色 素含量，应怎样进行实验操作？请设计出定量分析的实验 方案。
6、如何从NaOH辣椒碱浸提液验报告，认真总结、分析、讨 论。
回答思考题1、2、3、4。
复习实验基本知识
1、《基础化学实验2实验指导书》P3～5，P6～11， P14～19的内容，掌握(能叙述)722型分光光度计、Delta 320-s型酸度计和2WA-J阿贝折射仪的使用方法及其注意事 项。
2、下列实验所涉及的实验原理、操作注意事项和思考 题等内容：有机物熔点沸点的测定，有机染料吸附柱色谱， 乙酸乙酯的合成，液-液萃取，茶叶中提取咖啡因和薄层 色谱，乙酰水杨酸的合成。
90℃水浴 2h
置双层纱布中 自来水冲洗
提取器的滤纸筒中： 去除辣素的辣椒粉 圆底烧瓶中：180mL 15％NaOH溶液 沸石3～3粒
提取2~3h
至提取液 颜色很浅
常压蒸馏 补加沸石
挤干水分 去除辣素 的辣椒粉
乙醇
烧瓶内 残留物
回收
烧瓶洗 涤液
计 换算算：：E411c%6m0
红色素含量
计算提取率
称重 辣椒 100℃ 试剂瓶 红色素 烘干