全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法的检测结果比较王胜虎1）陈琪 1）李媛 2）1）昆明医科大学附属延安医院检验科，云南昆明 650051； 2）昆明医科大学海源学院基础部，云南昆明650500[摘要] 目的通过比对全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法检测临床标本结果的相关性及符合率，探讨更科学可靠的检验方法。

方法随机抽取90份临床与体检标本，经Tecan Freedom Evolyzer-2200全自动酶联免疫分析仪和手工加样操作的IMARK2酶标仪测定甲肝、乙肝5项、丙肝、戊肝2项、TP及HIV的结果，并对结果进行相关性及合率的分析。

结果对所检测项目中的HBsAg、HBsAb、HBeAg、TP、HIV的相关性系数r2>0.9 ，其数据显示相关性较好；而HAV-IgM、HBeAb、HBcAb、HCV、HEV-IgM、HEV-IgG、的相关性系数为 0.9>r 2>0.6 ；Tecan Freedom Evolyzer-2200全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法操作比对90个样本的11项检测结果总符合率达96.9％。

结论全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法有较好的相关性。

全自动酶联免疫分析仪的使用还大大的减轻了实验室人员的劳动负担，提高工作效率，应加强临床推广。

[关键词] 全自动酶联免疫分析仪、手工酶联免疫法、ELISA的影响因素Automatic enzyme-linked immunity analyzer test results compared with those ofmanual enzyme-linked immunoassay1) Yanan hospital affiliated to Kunming medical university clinical laboratory, Kunming Yunnan 650051；2) Kunming major medical university institute of source base, Kunming，Yunnan,650500[Abstract] Objective alignment Tecan Freedom Evolyzer-2200 automated enzyme immunoassay analyzer and manual ELISA method to detect the consistencyof the results of clinical specimens to explore more scientific and reliable inspection party. Methods 90 randomly selected samples from clinical and physical examination, the IMARK2 microplate reader and the instrument operating manual sample measurement hepatitis A, hepatitis B 5, hepatitis C, hepatitis E 2, TP and HIV results, and the results are correlated and linear regressionanalysis. Results the test items of HBsAg, HBsAb, HBeAg, TP, HIV correlation coefficient r2> 0.9, their data show a good correlation; and HAV-IgM, HBeAb, HBcAb, HCV, HEV-IgM, HEV-IgG , the correlation coefficient was 0.9> r 2> 0.6; compared with manual method is to detect 90 of 11 samples of the results of the total coincidence rate was 96.9%. Conclusions automatic and manual ELISA method has a good correlation. Automatic ELISA also greatly reduce the labor burden of laboratory personnel, improve efficiency, should be strengthened in clinical practice.[Key words] automatic ELISA, enzyme-linked immunosorbent assay manual, factors of ELISA.随着我国医疗技术和临床诊断技术的不断发展，简便、快速和敏感的诊断才能适应疾病诊断的要求。

而中国临床免疫检测仪器则不断发展进步，从之前的手工检测到现在的全自动酶联免疫分析仪[1]。

目前许多检验科的免疫室都在使用全自动酶联免疫分析仪同时辅助使用手工酶联免疫法检测，但由于检测系统的不同，结果是否具有可比性关系到检验免疫室的检测质量。

本研究针对此现象，应用Tecan Freedom Evolyzer-2200全全自动酶联免疫分析仪检测临床血清标本，并与手工加样操作酶标仪IMARK2方法比对，以便选择更稳定、可靠的检测系统。

1 材料与方法1.1 一般资料随机选取90份新鲜血清标本，来源于昆明市延安医院临床患者及正常体检人群。

1.2 仪器和试剂仪器：瑞士TECAN公司生产的Tecan Freedom Evolyzer-2200型全自动酶联免疫分析仪。

美国伯乐公司生产的IMARK-2酶标仪；基波科技公司生产的JB-1离心式洗板机；试剂：甲型肝炎病毒抗体检测试剂盒、乙型肝炎病毒5项诊断试剂盒、人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（上海科华生物工程股份有限公司生产、试剂批号分别为201408142、201409312、201410161)、丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（英科新创科技公司、试剂批号2014115826）、戊型肝炎2项诊断试剂盒、梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒均为（北京万泰生物药业股份有限公司、试剂批号EG20150101、N20141017）。

1.3 测定方法对90份随机新鲜标本分别采用全自动酶联免疫分析仪与手工操作同时进行。

两种方法对比检测，手工操作严格按照试剂说明书进行,保障其检测的质量还需能较熟练的进行检测[7]；全自动酶联免疫分析仪操作程序严格按试剂说明书设置。

并对全自动酶联免疫分析仪与手工操作的测定结果进行对比。

1.4 统计学处理本研究采用SPSS17统计软件包进行统计描述与分析，统计方法为相关性分析及线性回归，使用四线表对两种方法进行结果符合率的比较。

2 结果对于90份临床及体检标本，全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法检测结果的阴性、阳性、空白，均在起检测的规定范围内。

随机选取的90例标本手工操作与全自动酶免分析仪检测结果相关性系数r ²及线性回归分析比较，见表1 。

对90份标本全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法的测定结果符合率，见表2-1及表2-2。

表1 90个随机标本11个检测项目的线性回归方程及相关性系数r ²Table 1 90 random samples 11 test items of linear regression equation and correlationcoefficient r ²检测项目线性回归方程r ²HAV Y=0.4756X+0.0066 0.6625HBsAg Y=1.343X-0.1151 0.9505HBsAb Y=0.977X+0.1521 0.9451HBeAg Y=0.9219X-0.1279 0.9999HBeAb Y=0.487X+1.0578 0.8091HBcAb Y=0.65X+0.0878 0.7037HCV Y=0.7626X+0.1499 0.8659 HEV-IgG Y=0.5529X+0.4454 0.7097HEV-IgM Y=0.7418X+0.0015 0.7922TP Y=1.5681X-0.0409 0.9795HIV Y=0.7992X+0.0053 0.9018表2-1 90份标本全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法的测定结果符合率Table 2-1, 90 specimens automatic enzyme-linked immunity analyzer with manual determination results coincidence rate of enzyme-linked immunoassay全自动酶联免疫分析仪手工操作HAV-IgM HCV HEV-IgM HEV-IgG TP HIV + - + - + - + - + - + -+ 2 0 10 0 0 0 26 4 8 4 0 0 - 0 88 0 80 0 90 0 60 0 78 0 90 符合率％100 100 100 95 95 100表2-2 90份标本全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法的测定结果符合率Table 2-2, 90 specimens automatic enzyme-linked immunity analyzer with manual determination results coincidence rate of enzyme-linked immunoassay全自动酶联免疫分析仪手工操作HBsAg HBsAb HBcAg HBcAb HBeAb 总符合率 + - + - + - + - + - + - + 4 4 50 0 8 0 12 0 8 4 128 16 - 0 82 4 36 0 82 10 68 0 78 14 832 符合率％95 95 100 88 95 96.93 讨论本研究通过比对试验对Tecan Freedom Evolyzer-2200全自动酶联免疫分析仪的与手工操作，IMARK2酶标仪检测90份随机标本进行相关性系数及线性回归分析。

所检测项目中HBsAg、HBsAb、HBeAg、TP、HIV的相关性系数r²>0.9；而HAV-IgM、HBeAb、HBcAb、HCV、HEV-IgM、HEV-IgG、的相关性系数在0.6-0.9之间；且11项检测项目的总体符合率达到96.9％。