华西药学杂志WCJ·PS2012，27（1）∶22～24

［J］．CurrOpinGenetDev，1997，7（1）：17－22．［2］MalumbresM，BarbacidM．Tocycleornottocycle：acriticalde-cisionincancer［J］．NatRevCan，2001，1：222－231．［3］RenW，QiaoZ，WangH，etal．Flavonoids：promisinganticanceragents［J］．MedResRev，2003，23（4）：519－34．［4］DuckiS．Thedevelopmentofchalconesaspromisinganticanceragents［J］．Drugs，2007，10（1）：42－46．［5］KattigeS，NaikR，AlakdawallAD，etal．4H－benzopyran－4－onecompoundswhichhaveanti－inflammatoryorimmunodulat-ingaction［P］．US，4，900，727，1990－2－13．［6］刘滔，胡永洲．2'－羟基黄酮的Mannich反应及其产物的生物

活性［J］．有机化学，2006，26（7）：983－987．收稿日期：2011－03－13

作者简介：吴亚克（1985—），男，正攻读药物化学专业的硕士学位。Email：wuyakea@yahoo．com．cn*通信作者（Correspondentauthor），Email：david－811@163．com

薯蓣皂苷元衍生物的抗肿瘤活性研究吴亚克1，何谷2，傅微微1，郑微1，曾春玲1，范举正1*（1．四川大学华西药学院，四川成都610041；2．四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室，四川成都610041）

摘要：目的研究薯蓣皂苷元衍生物在体外的抗肿瘤活性。方法采用MTT法对人恶性黑色素瘤细胞A375、人肺腺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG－2及人慢性髓原白血病细胞株K562进行体外抗肿瘤活性试验。结果薯蓣皂苷元衍生物对4个肿

瘤细胞株A375、A549、K562、HepG－2具有不同程度的抗肿瘤活性。结论绝大部分薯蓣皂苷元衍生物对4个肿瘤细胞株有较好的抗肿瘤活性，IC50值都低于30μmol·L－1。化合物22对细胞株A375的IC50=4．48μmol·L－1，化合物9、10对细胞株K562的IC50分别为2．51、2．38μmol·L－1；显示其抗肿瘤活性与对照化合物1－（3β－薯蓣皂苷元）－3－苄基咪唑溴盐相当。

关键词：薯蓣皂苷元衍生物；抗肿瘤活性；K562；A375中图分类号：R96文献标志码：A文章编号：1006－0103（2012）01－0022－03

TheantitumoractivityoftheDiosgeninderivativesWUYa－ke1，HEGu2，FUWei－wei1，ZHENGWei1，ZENGChun－ling1，FANJu－zheng1*（1．WestChinaSchoolofPharmacy，SichuanUniversity，Chengdu，Sichuan，610041P．R．China；2．StateKeyLaboratoryofBiotherapyandCancerCenter，WestChinaHospital，SichuanUniversity，Chengdu，Sichuan，610041P．R．China）

Abstract：OBJECTIVEToinvestigatetheanti－tumoractivityofdiosgeninderivativesinvitro．METHODSTheanti－tumoractivitiesofdiosgeninderivativeswerestudiedusinghumanmalignantmelanomaA375cells，humanlungadenocarcinomaA549cells，humanhepatomaHepG－2cellsandHumanmyeloidleukemiaK562cellsinvitrobyMTTassay．RESULTSTheiranti－tumoractivitiesagainstcelllinesA375，A549，K562，andHepG－2weretested．Mostofthediosgeninderivativesexhibitedgoodanti－tumoractivitiesagainstallthefourcancercelllines．CONCLUSIONMostofthediosgeninderivativesexhibitedgoodanti－tumoractivi-tiesagainstallthefourcancercelllines，andallIC50valueswerebelow30μmol·L－1．Amongthesecompounds，IC50valueofcom-pound22againstA375was4．48μmol·L－1，andIC50valuesofcompound9，10againstK562were2．51μmol·L－1and2．38μmol·L－1．Theseshowedtheyhadthesameanti－tumoractivityas1－（3β－diosgenin）－3－benzylimidazolebromosaltwhichwasusedaspositivecontrol．Keywords：Diosgeninderivatives；Antitumoractivity；K562；A375CLCnumber：R96Documentcode：AArticleID：1006－0103（2012）01－0022－03

薯蓣皂苷元属于甾体类化合物，为人红白细胞白血病巨核细胞分化的诱导剂，对人骨肉瘤1547也有明显的抑制作用，还能诱导MCF、L929，、A375－S2、Hela肿瘤细胞株发生细胞凋亡，对MGC－803、HeLa、A375－S2、MCE－7等10种人肿瘤细胞株有抑制其增殖的作用，且具有一定的选择性［1－4］。研究结果表明：薯蓣皂苷元及其衍生物可作为潜在的抗肿瘤活性物质进行研究。为此，特通过对人恶性黑色素瘤细胞A375、人肺腺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG－2及人慢性髓原白血病细胞K562进行体外抗肿瘤活性试验，研究本实验室合成的1～37号薯蓣皂苷元衍生物（图1）的抗肿瘤活性，期待有助于寻找到抗肿瘤活性更佳的衍生物。图11～37号薯蓣皂苷元衍生物结构Fig1Thestructuresof1－37diosgeninderivatives

1实验部分

1．1仪器与试药SpectraMAXM5型酶标仪（美国分子仪器公司）。四甲基偶氮唑蓝（MTT，美国Sigma）；二甲基亚砜DMSO（科伦试剂公司）；96孔板（Millpore公司）；培养基RPMI－1640、DMEM（常规培养基按产品说明过滤除菌后，加入青霉素100U·mL－1、链霉素100U·mL－1及胎牛血清，4℃保存）；所有合成的化合物（1～37号）分别溶解于DMSO，配制成30μmol·mL－1的贮备液，4℃避光保存，实验前用培养基稀释成不同浓度的工作液；DMSO的比例为0.05%；人恶性黑色素瘤细胞A375、人肺腺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG－2以及人慢性髓原白血病细胞株K562细胞株（四川大学华西医院人类疾病生物治疗国家重点实验室，美国模式菌种收集中心提供）；取肿瘤细胞于37℃、5%CO2的恒温培养箱中培养，其中，A549和K562的培养基为RPMI1640，A375和HepG－2的培养基为DMEM。1．2方法与结果［5－8］1．2．1MTT法测定1～37号薯蓣皂苷元衍生物对A549、A375、HepG－2细胞株的抗癌活性取对数生长期的细胞以每孔3×103～5×103个细胞接种于96孔板中培养24h后，小心吸出原培养基，加入含有不同浓度化合物（0．9375、1．875、3．75、7．5、15、30μmol·mL－1）的培养基200μL，对照组加入RPMI1640或DMEM培养基200μL。每组各设3个平行孔。将96孔板置37℃、5%CO2的恒温培养箱中培养48h。然后于每孔中加入20μLMTT（5mg·mL－1），再培养2～3h，弃上清液，每孔加入150μL

DMSO，振荡15min，应用酶标仪于570nm处测OD

值，再计算出化合物的IC50。

为确保结果的可靠性

及实验的稳定性，所有实验在相同条件下重复进行2次。1．2．2MTT法测定1～37号薯蓣皂苷元衍生物对

K562细胞株的抗癌活性取对数生长期的细胞，以

每孔1．2×104个细胞接种于96孔板中，同时加入

含有不同浓度（0．9375、1．875、3．75、7．5、15、30μmol·mL－1）化合物的培养基100μL，对照组加入

RPMI1640培养基。每组各设3个平行孔。将96孔板置37℃、5%CO2的恒温培养箱中培养48h。然后每孔中加入20μLMTT（5mg·mL－1），再培养3．5h。将96孔板放入低温离心机中，以1×103r·min－1离心15min，弃上清液，每孔中加入15OμL

DMSO，振荡15min。于酶标仪上570nm处测OD值，再计算出化合物的IC50。

为确保结果的可靠性

及实验的稳定性，所有实验在相同条件下重复进行2次。1．2．31～37号薯蓣皂苷元衍生物的抗肿瘤活性

以MTT法测定1～37号薯蓣皂苷元衍生物对A375、A549、K562、HepG－2细胞株的体外抗肿瘤活

性。以专利报道的1－（3β－薯蓣皂苷元）－3－苄基咪唑溴盐（按文献方法合成［9］）为阳性对照品。IC50测定结果见表1。

32第1期吴亚克，等。薯蓣皂苷元衍生物的抗肿瘤活性研究