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审 核 人

标题 血液中乙醇的检测作业指导书 批 准 人

实施日期

1．目的

检测血液中乙醇含量。

2. 适用范围

本标准适用于血液中乙醇的定性、定量分析。

3. 职责

技术负责人批准考核合格的毒物分析专业人员完成此项工作。

4. 试剂与对照品

4.1 乙醇（色谱纯 99%，Sigma）

4.2 乙醇溶液：精密称取乙醇 1.0097g 于100ml 容量瓶内，添加蒸馏水至刻度，

混匀，得10.00mg/ml 乙醇储备液，将储备液用蒸馏水稀释至 20 倍，得 0.50mg/ml

乙醇控制液，放置样品室 4℃冰箱保存，有效期为 6 个月。

4.3 叔丁醇（色谱纯 99%，Chem Service）

4.4 内标叔丁醇溶液：精密称取叔丁醇 0.5026g 于 100ml 容量瓶内，添加蒸馏

水至刻度，混匀，得 5.00mg/ml 叔丁醇储备液，将储备液用蒸馏水稀释至 125

倍，得40ug/ml 叔丁醇内标工作液， 放置样品室 4℃冰箱保存， 有效期为 6 个月。

4.5 乙醇标准溶液（ Gerilliant ）

乙醇标准溶液： 10mg/dl ，20mg/dl，50mg/dl，80mg/dl ，100mg/dl ，200mg/dl，

300mg/dl

5. 血液中乙醇定性、定量的分析

5.1 样品处理

用精密移液器取样品血 0.10 mL 及 0.50 mL 叔丁醇 40μg/mL 内标工作液 2

份，各加入样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，置于顶空自动

进样器中加热 10 min ，待测。

5.2 气相色谱仪条件色谱柱： DB-ALC1毛细管柱（ 30m 0.32mm 1.2 m）

柱温：恒温 40 C

检测器：火焰离子化检测器（ FID）

检测器温度： 250 C

进样口温度： 150 C

5.3 顶空自动进样分析条件

DANI顶空自动进样器 ( 配 1mL定量进样环 ) 工作条件：加热箱温度（ Oven）

65℃，定量环温度 105℃，传输线温度（ TR.Line ）110℃，样品瓶加热平衡时间

（Vial EQ.Time）10.0min，样品瓶加压时间（ Pressuriz Time）0.10min ，定量

环充满时间（ Loop Fill Time ）0.10min，定量环平衡时间 0.05min ，进样时间

（Inject Time ）1.00min 。

5.4 记录

记录检材中色谱峰乙醇及内标物的峰面积值， 填入表中， 并根据工作曲线定

量计算方程计算出样品血中乙醇的浓度。

5.5 定量结果评价

样品应同时平行测定两份， 单柱单检测器两份样品测定结果的双样相对相差

（双柱双检测器两份样品测定结果的相对偏差）若不超过 5％时（有凝血块的血

样不超过 10％），结果按两份样品结果的平均值计算，双样相对相差若超过 5％

时（有凝血块的血样超过 10％），需要重新测定。

| C 1- C 2|

双样相对相差（ %） = 100

C

C1、C2 为两份样品平行定量测定的结果。

式中 C为两份样品平行定量测定结果的平均值（ C1+ C2）/ 2 ；