BMP7对TGFβ 1诱导人近端肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质分泌的影响 优秀毕业论文 精品参考文献资料 英文缩略词表 a-SMA(a-smooth muscle actin) a一平滑肌肌动蛋白
BMP-7(bone moiphogenctic
protein-7)
骨形态发生蛋白一7
Col I(type I collagen)
I型胶原
DEPC(diethyl pyrocaeoonate) 焦碳酸二乙酯
E-cadhcrin B钙粘连素
ECM(extmcellular matrix) 细胞外基质
ELISA(enzyme linked immunosorbent assay) 酶联免疫吸附实验
EMT(epithelial-to-mesenchymal transition) 蚴胞·间充质转分化
CrGF(connectivc tissue growth factor) 结缔组织生长因子
fN(h'bronectin) 纤维连接蛋白
HK-2(human renal proximal tubular epithelial
cells) 人近端肾小管上皮细胞
MET(mesenehymal-to-epithclial transition) 间充质细胞．E皮细胞转化 MMP-2(malri metalloproteinase-2) 基质金属蛋白酶-2 MFB(myofibroblast) 肌成纤维细胞 MCP-l(monocyte chcmoatWactant protein-I) 单核细胞趋化蛋白．1
"IGF冯,(transforming growth factor一01) 转化生长因子B
l
Tm(mbmommrstitial fibrosis) 肾小管间质纤维化
TIMP-I(tissue inlu'bitor of the matri metalloproteinase-1)
组织基质金属蛋白酶抑制物．1
TEC(r砌tubular epithelial cell) 肾小管E皮细胞
PAI-1(plasminogen activator inlu'bitor-1) 纤溶酶原激活物抑制剂一1 PBS(phosphate buffered saline) 磷酸盐缓冲液
RT-PCR(reverse Iranscription-polymerase chain system) 反转录一聚合酶链式反
应 SDS(sodium dodecyl sulphate) 十二烷基磺酸钠
I兀Jo(unilateral ureteral obstruction) 单侧输尿管梗阻
2 优秀毕业论文 精品参考文献资料 学位论文原创性声明和版权使用授权书 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究 工作所取得的真实成果。除文中已注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本论文的研究做出重要贡献的个人和集 体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 作者签名(手写)：聱
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∥月r『日 优秀毕业论文 精品参考文献资料 BMP-7对TG椰1诱导人近端肾小管上皮细胞 转分化及细胞外基质分泌的影响 摘要 目的：观察骨形态发生蛋8-7(洲)对转化生长因子-81(TGF-B1)诱导人近端肾小
管上皮细胞(HK-2)向间充质细胞转分化(D仉’)及细胞外基质(ECM)分泌的影响，探 讨其逆转肾间质纤维化的可能机制。
方法：将HK-2细胞在体外与TGF-B1或TGF-B1+BMP-7共培养，分成对照组，不同浓 度TGF-B1诱导组，TGF-B1不同时间诱导组，3ng／ml TGF-B1加不同浓度BMP-7组。相差显 微镜观察细胞形态的改变；间接免疫荧光测定a-SMA、E-cadherin的表达； RT-PCR检
测 a-SMA、E-cadherin、Col I a1、FN、PAI-1 mRNA的表达；Western Blot检测a-SMA、E,odherin 蛋白的表达；ELISA方法测定细胞E清液Col I、FN的表达。 结果：(1)随着TGF-B1浓度的增加及作用时间的延长，HK-2细胞形态逐渐发生改变， 由立方形铺路石样转变为梭形长条样；在3ng／ml TGF-81诱导48h后再加A．200ng／na BMP-7 组中，可见到已转变为梭形长条样的细胞大部分逆转回原来的形态。(2)免疫荧光检测显示， 正常HK-2细胞表达F_,cadhadn、而无a-SMA表达，经3ng／ml TGF-B1刺激4811后，细胞浆 中a-SMA表达明显增强，细胞质膜E-eadherin表达显著减弱；去除TGF-BI，再加入200ng／ml BMP-7干预48h，能明显抑制a-．SMA的表达、恢复E-eadherin的表达。(3)TGF-81在
lOng／ml 内呈剂量依赖性匕调a-SMAmRNA的表达。在3ng／ml TGF冯I诱导下，a-SMAmRNA表达 随作用时间的延长而增加，E．eadherin mRNA表达随作用时间的延长而逐渐减少。在3ng／
ml TGF-BI与BMP-7共同干预下，a-SMA mRNA及蛋白的表达随着BMP-7(100 ng／ml
枷O ng／m1)的浓度增加而减少，400 ng压llI
BMP-7即可显著减少a-SMA mRNA及蛋
白的表达 (PTGF-B1的持续刺激下，E-adherin mRNA及蛋白的表达随着BMP-7
的浓度增加而逐渐增加，400 ng／ml BMP-7即可显著增加F．,-odherin mRNA及蛋白的表达
(咖．01)。(4)在3ng／ml TGF-St诱导下，随刺激时间的延长，Col I
al、FN
mRNA表达
3 优秀毕业论文 精品参考文献资料 逐渐增加： BMP-7呈剂量依赖性抑制Col I、FN的表达，400 ng／IIll BMP-7即可显著抑 制Col I、FN的表达(P增 JJI(P<0．01)；BMP-7呈剂量依赖性抑制PAI-1 mRNA表达，400ng／m_l BMP-7可明显减少PAI-1 mRNA表达(P．<0．01)。
结论：(1)TGF-B1呈剂量和时间依赖性匕调a-SMA的表达、抑制E-cadherin的表达， 诱导HK-2细胞转分化，并促进Col I、FN的合成。(2)BMP-7可呈剂量依赖性地抑制TGF-Bl 诱导下a-SMAmRNA和蛋白的表达，并通过再诱导E-cadhcdn mRNA和蛋白的表达抑制、 逆转TGF-B1诱导的EMT。(3)BMP-7可呈剂量依赖性抑制TGF-Bl诱导下HK-2细胞外基 质成分C以I、FNmRNA和蛋白的表达；抑制PAI-1mRNA的表达，即BMP-7可抑制硎
l
诱导下肾小管上皮细胞ECM的合成、促进ECM降解。 关键词：骨形态发生蛋白质类转化生长因子B上皮细胞 转分化细胞外基质 优秀毕业论文 精品参考文献资料 Effects of BMP-7 on
Epithelial-to-Mensenchymal Transition and Extraceilular
Matrix Accumulation in Human Renal Proximal
Epithelial Cells Induced by TGF-Ih
Objective：To investigate the effects of bone morphogcnic
protein(BMP)-7
on epithelial-to-mesenchymal昀nsi60n㈣and
the expression 0f 6bIoIlec面(FN)and
type
collagen I(Col I)in human renal proximal tubular ce郴-2)inducedby transforming growth factor-B1
(TGF-B1)，and to
explore the possible
mc《?Jlanisms of BMP-7 for the inlffoifion and rwemal of
嗽lal intcmtitial fibrosis．
Methods：HK-2 cells、)l眦treated with TGF-BI
or a combination of TGF-Bx and
BMP-7．HK-2
cells divided into the following groups according to different f础Ol'S：Control
group, TGF-B1(different time and concentration)group,3ng／ml TGF-81+BMP-7(different concentration) group．Morphological clI．anges wefc assessed by phase contrast micrcsoopy．The
expression of a-SMA and E-cadherin were arlalysed by indirect immunofluorescencc J王T-PCR and Western Blot
respectively．The mRNA levels of extracelluar
n强由敦components(Col I al and Frq)and
plasminogen activator inlu'bitior(PAI)-1 were measured by RT-PCR．．The∞o'etion of Col I and FN protein was quantitated by ELISA． Results：(1)TGF-81 trealment of confluent HK-2 cells resulted in distinct morphological changes