Cognis GmbH， Standort Illertissen
AMIA-000010 安全-健康-环境-质
量
分析方法E- IA -000010 （第二版第二版））
用气相色谱法定量测定
用气相色谱法定量测定下列的游离的脂肪酸下列的游离的脂肪酸
C16:0，棕榈酸 C18:0，硬脂酸 C18:1 c9，油酸 C18:2 c9, c12，亚油酸 C18:2, 共轭亚油酸（总和） C18:2, c9,t11，共轭亚油酸异构体 C18:2, t10,c12，共轭亚油酸异构体 C18:2, c,c，共轭亚油酸异构体 C18:2, t,t，共轭亚油酸异构体 脂肪酸乙酯 CLA-低聚物 含有游离脂肪酸的混合物 IA-001010 前版本：1071
IA-002010 前版本：1171
IA-003010 前版本：1271
IA-004010 前版本：1371
IA-005010 前版本：1471
IA-006010 前版本：1571
IA-007010 前版本：1671
IA-008010 前版本：1771
IA-009010 前版本：1871
IA-010010 前版本：1971
IA-011010 前版本：2071
（硅烷化后使用非极性的色谱柱）
替代分析方法替代分析方法：：E-IA-1071-2071,第一版本 有效期起始日有效期起始日：： 2004年07月23日 归档
归档：：2009年07月
内容目录
内容目录：：
1. 用途和/或应用范围·······················································································2
2. 定义·················································································································2
3. 概述·················································································································2
4. 试剂·················································································································2
5. 仪器·················································································································2
6. 取样·················································································································2
7. 程序·················································································································2
8. 评估·················································································································3
9. 文献·················································································································4
批准人：
1. 用途和/或应用领域
本方法用于定量检测脂肪酸混合物的组成，特别是定量检测共轭亚油酸
（CLA）的组成及其副产物。这个方法没有关于测定C18:2 c11,t13脂肪酸的含
量的信息。
2. 定义
“Oligomers”-即低聚物，可以理解为在脂肪酸共轭反应过程当中的高分子
量的产物（其组成还没有确定）。
3. 概要概要
样品在干燥嘧啶中，在添加了MSTFA的作用下发生硅烷化反应，硅烷化反
应的产物通过气相色谱的毛细管柱进行分离，使用FID检测器并且进行定
量。定量结果使用面积百分比（A%）进行表示。
4. 试剂试剂
（1）干燥嘧啶(pyridine)，水分含量不超过0.01%
（2）MSTFA（N-Methyl-N-T-rimethyllilyl-trifluoraceramide）
5. 仪器和材料仪器和材料
5.1 5.1 样品制备需要的仪器样品制备需要的仪器
样品制备需要的仪器
（1）1.5ml的GC自动进样瓶。
（2）加热块
5.2 5.2 气相色谱气相色谱GC
GC，，
（1）气相色谱仪，GC-系统6850
（2）自动进样器6850
（3）色谱柱： 毛细管DB 5HT，15m， 0.32mm I.D., 0.1um膜厚度
（4）检测器： FID
（5）进样器： 分流进样器
6. 取样取样
按照标准操作规程进行取样。
7. 操作程序操作程序
7.1. 安全安全：：
应注意处理危险物品的具体细则。技术、组织和个人安全测定方法应遵守。
7.2. 样品制备样品制备：：
（1）称取14mg的样品（精确到0.01mg）加入到GC自动进样器的安瓿瓶中（单
个测试）。
（2）加入1ml的嘧啶和100ul的MSTFA。
（3）放在80℃的加热块上加热10min。
（4）不需要任何的前期稀释，直接将样品进样进行检测。
7.3. 气相色谱法条件气相色谱法条件
载气： 氢5.0
注射器温度： 330℃
检测器温度： 360℃
尾吹气（Make-up Gas）： 氮气 5.0 10ml/min
燃料气体： 人工空气； 300ml/min
氢5.0； 30ml/min
分流： 1:35
进样量 0.2ul
载气的程序
载气的程序：：
恒速： 2.5ml/min
气体保护时间(GasSaverTime)= 3.5[min]
气体保护流速(GasSaverFlow)= 20.0[ml/min]
升温程序
升温程序：：
速率[℃/min]： 温度[℃]： 保持时间[min]
10.0 80 0.50
350 2.00
(结束：总的保留时间为：29.5min)。
8. 评估评估
8.1 8.1 计算计算
计算：：
使用相应的适当的对照品可以鉴别各个单个的脂肪酸。
对照品： 脂肪酸C08-C24（双碳原子数的脂肪酸）
脂肪酸C18:1, 脂肪酸C18:2, 脂肪酸C18:3
脂肪酸C18:2,共轭，c9,t11
脂肪酸C18:2,共轭, t10,c12
单个组分的含量表示面积百分比（A%）的计算公式如下：
Mi: 单个组分的含量表示面积百分比（A%）,
Sum of all peak-areas: 所有峰面积的和。
Peak-area component i: 单个组分的峰面积。
测得结果保留一个小数点。
IAIA--005010 005010 脂肪酸脂肪酸脂肪酸 C18:2 C18:2 C18:2 共轭亚油酸共轭亚油酸（总和
总和））[IA-005010 FA C18:2 CLA（Sum）]：
参数的总和：
- 脂肪酸C18:2,共轭亚油酸，c9,t11
- 脂肪酸C18:2,共轭亚油酸， t10,c12
- 脂肪酸C18:2,共轭亚油酸， c,c（总和）
- 脂肪酸C18:2,共轭亚油酸， t,t（总和）
IAIA--011010共轭亚油酸共轭亚油酸--低聚物
低聚物：：
所有相关的峰的面积百分比的总和。
IAIA--010010脂肪酸乙酯
脂肪酸乙酯：：
总的脂肪酸乙酯的含量不能直接检测，因为共轭亚油酸的乙酯在气相色谱柱中被
游离的脂肪酸覆盖了。
油酸乙酯与油酸在气相色谱图中两个峰分开了，姑且假定认为,脂肪酸和少含量
的脂肪酸乙酯（<2%）的组成分布与油酸乙酯与油酸的比例相同，按照下面的公
式进行计算 ：
计算的结果仅仅是一种近似的估计计算。
Content Fatty Acid Ethyl Ester[A%] – 脂肪酸乙酯的面积百分比
Content Oleic Acid Ethyl Ester[A%] – 油酸乙酯的面积百分比
Content Oleic Acid [A%] -油酸的面积百分比
9. 附录附录
无