9- 1 盐酸帕洛诺司琼确证化学结构的试验资料及文献资料 目 录 9．1新药名称、化学结构式、分子式及分子量 9．2供确证化学结构用样品的纯度及其检查方法 9．3确证化学结构的方法 9．4综合解析 9．5参考文献 9- 2

9.1、新药名称、化学结构式、分子式及分子量 通用名：盐酸帕洛诺司琼 英文名：Palonosetron Hydrochloride 汉语拼音：Yan Suan Pa Luo Nuo Si Qiong 结构式：多了2,3a 位的双键

ONNHCl.

分子式：C19H25ClN2O 分子量：332.87 CAS登录号：135729-61-2 中文化学名：(3aS)-[2-[(S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基]-2,3,3a,4,5,6-六氢-1H-苯并[de]异喹啉-1-酮盐酸盐 英文化学名：(3aS)-[2-[(S)-1-Azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl]-2,3,3a,4,5,6-hexahydro -1H- benz[de]isoquinolin-1-one Hydrochloride 通用名：盐酸帕洛诺司琼 (Palonosetron Hydrochloride) 其它名称：Aloxi、Onicit

9.2、供确证化学结构用样品的来源与批号 1、 供确证化学结构用样品的精制和批号 批号：盐酸帕洛诺司琼样品： 盐酸帕洛诺司琼精制品： 取帕洛诺司琼盐酸盐样品25g，无水乙醇重结晶2次，最后得白色帕洛诺司琼盐酸盐精制品12g。具体精制方法见“资料编号8”。盐酸帕洛诺司琼样品(批号：20040705)和精制品(批号：)以归一化法测得含量为99.75％，有关物质≤ 0.3 ％ 。具体方法参见资料10中“含量测定”项。 2、来源：

9.3、确证化学结构的方法 9- 3

9.3.1 理化性状 1 外观性状【1】 本品为白色或微黄色粉末状晶体，无臭，无味。 2 溶解性 易溶于水，溶于丙二醇，微溶于乙醇和2－丙醇。 3 熔点 ≥290℃，与文献报道相符（m.p. ≥290℃）【1】) 4 绝对构型 4.1 比旋度的测定 盐酸帕洛诺司琼样品测量值：20D＝-88~ -92，（c=1，CHCl3） 盐酸帕洛诺司琼精制品测量值：20D＝-88~ -92，（c=1，CHCl3）请各选定一个检测值并附上检测报告。 文献值[2]：25D＝－90.4（c＝1，CHCl3） 4.2 手性色谱柱测定 取盐酸帕洛诺司琼样品，加乙醇（含0.1％的TFA）制成每1ml含0.4mg的溶液作为供试品溶液。照高效液相色谱法（中国药典2000年版二部附录V D）试验，通过AD-H（250×4.6mm，5um）手性色谱柱。用峰面积归一化法计算，对映异构体含量应不大于1.0％。具体方法参见资料10中 “对映异构体”项。盐酸帕洛诺司琼样品光学纯度：含量≥ 99.0%， 以上检测证明盐酸帕洛诺司琼样品20040705的光学纯度和绝对构型与文献报道相符，样品20040705与盐酸帕洛诺司琼相符。

？9.3.2、元素分析 测试单位：中国药科大学分析测试中心 仪器：Elementa Vario EL III型元素分析仪 方法：样品经燃烧分解，定量转换，检测，再经数据处理得到C、H、N的百分含量。 1、元素分析报告书 盐酸帕洛诺司琼样品的元素分析报告书见附图?。 9- 4

2、元素分析测定数据 表1. 盐酸帕洛诺司琼样品（20040705）的元素分析结果 测试元素 C H N 理论计算值（％） 68.56 7.57 8.42

实测值（％） 第一次 第二次 平均值 3、元素分析数据分析和结论 测定结果表明，盐酸帕洛诺司琼样品（20040705）的C、H、N含量实测平均值与理论计算值误差均小于0.3%。由元素分析和质谱可以初步确定化合物的分子式为C19H25ClN2O。

？9.3.3、紫外吸收光谱（UV）（未测定） 测试单位：中国药科大学分析测试中心 仪器：Perkin-Elmer Lambda 2 UV/VIS光谱仪 溶剂：甲醇、0.1mol/L HCl溶液和0.1mol/L NaOH溶液 供试液：盐酸帕洛诺司琼适量，分别于上述溶液中超声溶解，样品的浓度为4.49、4.21和4.30μg/ml。 测定波长：200-400nm 1、紫外光谱图（UV） 盐酸帕洛诺司琼样品在水、0.1mol/L HCl溶液和0.1mol/L NaOH溶液中的紫外光谱图分别见附图 。 2、 测定数据

表2. 帕洛诺司琼样品的紫外光谱测定结果 溶剂 精制品 对照品 λmax (nm) εmax λmax (nm) εmax

水

0.1mol/L HCl溶液 9- 5

0.1mol/L NaOH溶液 3、解析 由图5-1a，5-2a，5-3a可知，样品分子在水中的最大紫外吸收在244nm处，吸收带强度（摩尔吸收率）为7.29×104，证明K带的存在，即存在共轭的两个不饱和键。

样品分子在NaOH水溶液的最大紫外吸收在244nm处，吸收带强度（摩尔吸收率）为7.59×104，在盐酸水溶液的最大紫外吸收在248，吸收带强度（摩尔吸收率）为6.87×104，，表明在酸性条件下，有游离COOH。 盐酸帕洛诺司琼精制品的紫外光谱图盐酸帕洛诺司琼样品的相一致。

9.3.4、红外吸收光谱（IR） 测试单位： 中国药科大学分析测试中心 仪器：Nicolet Impact 410型红外光谱仪 仪器校正：用聚苯乙烯薄膜的红外光谱吸收峰对仪器波数进行校正（参考中国药典2000年版二部附录ⅣC） 方法：KBr压片法 1、 红外吸收光谱图 盐酸帕洛诺司琼精制品（批号20040707）和样品（批号20040705）的红外吸收光谱图见附图？。 2、 测试数据 表3. 盐酸帕洛诺司琼样品的红外测定结果 吸收峰波数（cm-1） 吸收峰强度 基团和振动类型 解析 样品 精制品 文献值 JOC,42, 1329,1977 3440.10 中 VH-Cl 盐酸盐活波氢的伸缩振动吸收峰。更可能是水峰。 所以建议删除此行。 2928.87、2899.63 中 VC-H 亚甲基、次甲基C-H伸缩振动 2592.25 中 VN-H 叔胺盐的N－H伸缩振动吸收峰 2468.96 中 V-H 胺盐的伸缩振动吸收峰. 建议此9- 6

行删除 1647.11 强 VC=O 酰胺的羰基的伸缩振动吸收峰 1589.68、1477.20 中 VC=C 苯环的C＝C伸缩振动的特征吸收峰 1447.22、1322.42 1302.75 此二峰不是， 建议删除 中 δC-H 次甲基、亚甲基C-H的弯曲振动吸收峰

1407.96 中 VC－N 酰胺C－N单键伸缩振动的吸收峰 1322.42~1155.88 中弱 VC－N C－N单键伸缩振动的吸收峰

768.00、620.46 弱、中 δC-H 1,2,3 取代苯环的C-H弯曲振动的特征吸收峰 3 红外吸收光谱数据解析 a．盐酸帕洛诺司琼样品20040705红外吸收峰2592.25cm-1，1322.42~1155.8cm-1，是叔胺盐酸盐的N-H和C-N伸缩振动, 证明结构中含叔胺的盐酸盐。 b．样品的红外吸收峰2928.87、2899.63、1447.22cm-1， 证明结构中含包含有亚甲基、次甲基。 c．1589.68、1477.20cm-1为苯环骨架C=C伸缩振动特征吸收峰； 768.00cm-1、620.46为1,2,3取代苯环C-H的弯曲振动吸收峰，证明样品结构中有1,2,3取代苯环。 d．1647.11, 1407.96 cm-1：为酰胺羰基和C－N单键伸缩振动的吸收峰。 由红外光谱可知，盐酸帕洛诺司琼样品20040705结构中含有酰胺基、1,2,3取代苯环、叔胺盐酸盐以及烷烃。 盐酸帕洛诺司琼样品20040705红外光谱数据与盐酸帕洛诺司琼结构相符。

9.3.5、核磁共振谱（NMR） 测试单位： 中国药科大学分析测试中心 9- 7

仪器：BRUKER AV-500 型核磁共振仪 溶剂： DMSO-d6，内标：TMS 9.3.5.1.1 1H-NMR谱图 盐酸帕洛诺司琼精制品（20040707）的氢谱、重水交换谱和样品（20040705）的氢谱、重水交换谱、H-HCOSY谱分别见附图?。

ONN+Cl-

HHHHH

HH

HH

HHHH

HHH

HHH

H

HHHHH1

2

34

56

78910

1112

13

141516

17

1819

以上编号不合适， 碳和氢应该使用相同编号,如下： NONHCI

1234

5

6789

101112

131415

16

3'

6'6''9'

9.3.5.1.2 测试数据 表4：氢谱测试数据 化学位移（ppm） 质子数 峰形 归 属 相关质子 备 注 样品 文献值[JMC]

1.24-1.31 1.30(bq) 1 m H3 1.63-1.72 1.60-2.15(m, 7H) 1 m H4 1.72-1.85 1 m H15 1.85-1.96 2 m H12

1.96-2.04 2 m H4,H15 2.04-2.09 1 m H3 2.19 2.22(m) 1 bd H11 J＝2.1