时珍国医国药２０１０年第２１卷第１０期　

资木瓜中齐墩果酸和熊果酸的含量测定　

李华荣，高逢喜，任贻军　

（华中科技大学同济医学院附属荆州医院，湖北荆州４３４０２０）　

摘要：目的建立以ＲＰ—ＨＰＬＣ法测定资木瓜中齐墩果酸和熊果酸含量的方法。方法色谱柱：Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｅｃｌｉｐｓｅ　ＸＤＢ—Ｃ　８　

（４．６　ｍｉｌｌ×２５０　Ｉｎｔｏ，５　ｍ），流动相：甲醇一０．２％磷酸水溶液（９０：１０），流速０．５７　ｍｌ·ｍｉｎ　，检测波长２１０　ｎｍ。结果齐　墩果酸和熊果酸进样浓度分别在６．４～２５６．０　Ｉｘｇ·ｍｌ　和６．３２～２５２．８　ｔｚｇ·ｍｌ　范围内具有良好的线型关系，ｒ分别为　

０．９９９　６和０．９９９　９，平均加样回收率分别为９７．４％和９６．７％，ＲＳＤ分别为２．６％和２．２％（ｎ＝６）。结论该方法简便、准　

确、重现性好，可用于控制资木瓜的质量：　关键词：高效液相色谱法；　资木瓜；　齐墩果酸；　熊果酸　

ＤＯＩ标识：ｄｏｉ：１０．３９６９／ｉ．ｉｓｓｎ．１００８－０８０５．２０１０．１０．０６３　

中图分类号：Ｒ２８４．１　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００８—０８０５（２０１０）１０—２５６３－０１　

木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Ｃｈａｅｎｏｍｅｌｅｓ　ｓｐｅｃｉｏｓａ（Ｓｗｅｅｔ）　

Ｎａｋａｉ的干燥近成熟果实，中医认为具有平肝舒筋，和胃化湿等功　效，用于湿痹拘孪，腰膝关节酸重疼痛，吐泻转筋，脚气水肿　。　

资木瓜因主产于湖北长阳资丘而得名，与浙江淳木瓜、安徽宣城　

木瓜齐名，同为皱皮木瓜三大道地药材，是鄂西南特有的一种道　地中药材，主要分布在恩施土家族苗族自治州以及宜昌市的长　阳、五峰县一带。木瓜中含有的齐墩果酸和熊果酸具有抗癌、提　

高免疫力、降血脂和降血糖等功效　。本文建立了ＲＰ—ＨＰＬＣ　

法测定资木瓜药材中齐墩果酸和熊果酸含量的方法，为资木瓜的　质量控制提供依据。　

１仪器与材料　１．１　仪器Ａｇｉｌｅｎｔｌ１００高效液相色谱仪（美国安捷伦），含在线　

脱气机、四元梯度泵、自动进样器、紫外检测器、化学工作站；　ＣＰＡ１２４Ｓ型电子天平（德国赛多利斯）；ＣＱ一８０型超声波清洗　

机。　１．２　试药齐墩果酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号：　１１０７０９—２００５０５）；熊果酸对照品（中国药品生物制品检定所，批　号：１１０７４２～２００５１６）；甲醇为色谱纯，注射用水（四川科伦药业股　

份有限公司，批号：Ｈ０９０５１９），其余试剂均为分析纯；资木瓜分别　采自湖北省宣恩县长潭河侗族乡易家坪村和湖北省长阳县资丘　

镇水帘村。　２方法与结果　２．１　色谱条件与系统适应性试验色谱柱为Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｅｃｌｉｐｓｅ　ＸＤＢ—Ｃ　８（４．６　ＩｌｌＩｎ　Ｘ２５０　ｍｍ，５　ｍ）；流动相为甲醇一０．２％磷酸　

水溶液（９０：１０）；柱温２７％；检测波长２１０　ｎｍ；流速０．５７　ｍｌ·　ｒａｉｎ～；进样量１０　ｌ。在此色谱条件下，齐墩果酸、熊果酸和前后　

色谱峰可达到基线分离，齐墩果酸和熊果酸的分离度大于１．５。　见图１。　２．２　对照品贮备液的制备分别精密称取齐墩果酸对照品１６．０　

ｍｇ和熊果酸对照品１５．８　ｍｇ，置２５　ｍｌ量瓶中，加甲醇溶解并稀　释至刻度，作为对照品贮备液（其浓度分别为６４０．０　ｇ·ｍｌ　和　

６３２．０　ｇ·ｍｌ　）。　２．３　供试品溶液的制备取资木瓜粉末（过１２０目筛）约１．０　ｇ，　精密称定，置５０　ｍｌ量瓶中，再加入甲醇４Ｏ　ｍｌ超声提取９０　ｍｉｎ，　

收稿日期：２０１０４３３４３１；　修订日期：２０１０－０６—１６　基金项目：湖北省卫生厅青年人才基金项目（Ｎｏ．ＱＪＸ２ＯＯ８—６０）　作者简介：李华荣（１９７２。），男（汉族），湖北松滋人，现任华中科技大学同　济医学院附属荆州医院副主任药师，硕士学位，主要从事药物临床试验研　究工作．　放冷，再加入甲醇至刻度，摇匀，用０．４５　ｍ微孔滤膜过滤，取续　

滤液作为供试品溶液。　２．４　线性关系考察精密吸取对照品贮备液０．１０，０．２０，０．５０，　

１．００，２．００和４．０Ｏ　ｍＩ，分别置于１０　ｍＩ量瓶中，加流动相稀释至　刻度，摇匀，得到不同浓度的对照品溶液。精密吸取上述６种溶　

液各ｌ０　ｌ，按上述色谱条件，分别进样，测定。以对照品浓度　

（　ｇ·ｍｌ　）为横坐标，峰面积ｙ为纵坐标进行线性回归，得回归　

方程。齐墩果酸：Ｙ＝３７．５２Ｘ一１９．７５（ｒ＝０．９９９　６），线性范围６．４　２５６．０　ｇ·ｍｌ；熊果酸：Ｙ＝１２．５６Ｘ一２５．０２（ｒ＝０．９９９　９），线　

性范围６．３２～２５２．８　Ｉｘｇ·ｍｌ～。结果表明，齐墩果酸和熊果酸分　

别在相应进样量范围内具有良好的线性关系。　

ａ一对照品ｂ一供试品１．齐墩果酸２．熊果酸　图１　高效液相色谱图　２．５　重复性实验取同一批样品（样品４）６份，按“２．３”项下制　

备并进样测定。结果表明，齐墩果酸和熊果酸含量的ＲＳＤ分别　为１．７４％和１．２６％，表明本方法重复性好。　

２．６　稳定性实验取“２．５”项下同批样品在４，８，１２　ｈ分别进样　

测定，结果，１２　ｈ内齐墩果酸和熊果酸色谱峰面积无明显变化，　ＲＳＤ分别为０．６６％和０．５４％，表明被测样品在１２　ｈ内稳定性良　

好。　２．７　精密度实验精密吸取对照品溶液（齐墩果酸和熊果酸浓　

度分别为６４．０和６３．２　ｇ·ｍｌ　），在上述色谱条件下连续进样　

６次。结果，齐墩果酸和熊果酸色谱峰面积的ＲＳＤ分别为０．３２％　

和０．４７％，表明本方法精密度良好。　

２５６３·

　时珍国医国药２０１０年第２１卷第１０期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２０１０　ＶＯＬ．２１　ＮＯ．１０　

２．８　加样回收率实验取已知含量的样品（样品４，齐墩果酸和　熊果酸含量分别为：５．２１　ｍｇ－ｇ　和３．１６　ｍｇ·ｇ　）适量，约０．５　ｇ，共６份，精密称定，分别精密加入对照品贮备液１．０，２．０和　

４．０　ｍｌ，按上述方法制备供试品溶液，进样测定，计算回收率。结　果表１。　２．９　样品含量测定分别取不同批次资木瓜样品按供试品溶液　

制备法制备并进行进样、测定。结果见表２。　

表１　加样回收率实验结果　很难分离。考虑到流动相比例、柱温及流动相流速对二者分离影　响较大，经多次试验，发现选择甲醇一０．２％磷酸水溶液（９０：　

１０）为流动相，柱温２７℃，流速０．５７　ｍｌ·ｒａｉｎ　时齐墩果酸和熊　

果酸能较好分离，分离度大于１．５。　

表２样品含量测定结果　

由表２可知，４批药材中均含有齐墩果酸和熊果酸，但不同　产地资木瓜中齐墩果酸和熊果酸的含量差别较大，是否与资木瓜　

炮制方法或采收时间不一致有关还有待进一步研究。　

参考文献：　

［１］　国家药典委员会．中国药典，Ｉ部［Ｓ］．北京：化学工业出版社，　

３讨论　熊果酸和齐墩果酸为同分异构的五环三萜酸，由于结构相似　［２］　

导致其性质极为相近，在进行液相分离时其保留时间十分接近而　２００５：４１．　Ｌｉｕ　Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｏｌｅａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｕｒｓｏｌｉｃ　ａｃｉｄ［Ｊ］．Ｊ　Ｅｔｈｎｏｐｈａｒ－　ｍａｃｏｌ，１９９５，４９（２）：５７．　

柴芩清肝汤高效液相色谱指纹图谱研究　

付克，张丽，闫广利　

（黑龙江中医药大学中医药研究院，黑龙江哈尔滨１５００４０）　

摘要：目的对柴芩清肝汤的ＨＰＬＣ指纹图谱进行研究，建立其质量评价体系。方法采用ＨＰＬＣ梯度洗脱技术进行分　

离。色谱柱为Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ】８（５　ｍ，２５０　ｍｍ　ｘ４．６　ｍｎ１），保护柱为Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ…流动相为乙腈一Ｏ．１％磷酸水溶液梯度洗　脱，检测波长２３０　ｉｌｍ，柱温２５℃。结果确定了１９个共有峰，并对各共有峰进行了初步归属。ｌ０批样品指纹图谱的相似　

度均在０．９０以上。结论该方法准确可控，可用于柴芩清肝汤的质量控制。　

关键词：柴芩清肝汤；　高效液相色谱；指纹图谱　

Ｄ０Ｉ标识：ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８－０８０５．２０１０．１０．０６４　

中图分类号：Ｒ２８４．１；Ｒ２８３　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００８－０８０５（２０１０）１０－２５６４－０２　

柴芩清肝汤的原方是由柴胡、黄芩、白芍、甘草等制成的中药　制剂，经多年的临床实践证明，其对慢性肝炎等疾病有较好的疗　

效。该方剂是集中医理论、现代研究和临床经验为一体的良好组　

合，具有疏肝解郁、消热解毒之功效。由于中药复方成分复杂，仅　对某个成分进行定性、定量分析并不能有效控制其质量，中药指　

纹图谱作为目前公认的中药和天然药物质量控制的有效手段，其　研究着眼于对象的宏观特征及内在规律，具有整体性和模糊性等　基本特点，符合中药药效模式　。本实验运用ＨＰＬＣ法对柴芩　

清肝汤进行研究，确立其色谱条件，建立指纹图谱共有模式，从而　

从整体上控制柴芩清肝汤的质量。　

收稿日期：２００９．１１－０９；修订日期：２０１０－０６－０６　基金项目：黑龙江省科技攻关资助项目（Ｎｏ．ＧＣ０８Ｃ３２２）　作者简介：付克（１９５５一），男（汉族），吉林榆树人，现任黑龙江中医药大　学中医药研究院副研究员，硕士研究生导师，学士学位，主要从事中药及　复方质量标准和新药研究５－作．　

２５６４·　１仪器与试药　Ｗａｔｅｒｓ６００—２４８７型高效液相色谱仪Ｅｍｐｏｗｅｒ色谱工作站　（美国．沃特斯公司）；ＡＧ　１３５型电子天平（瑞士ＭＥＴｒＬＥＲ—ＴＯ—　

ＬＥＤＯ公司）；ＫＱ一３００ＶＤＥ型双频数控超声泼清洗器（昆山市超　

声仪器有限公司）。　柴胡、黄芩等药材均购于哈尔滨市宝丰大药堂，经检验符合　《中国药典》规定。　乙腈为色谱纯，水为超纯水，其它试剂为分析纯。　

２方法与结果　２．１　色谱条件色谱柱为Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　Ｃｌ８（５　ｍ，２５０　ｍｍ×４．６　ｍｉｌ１），保护柱为Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ　流动相为乙腈（Ａ）一０．１％磷酸水　

溶液（Ｂ），见表１；流速１．０　ｍｌ／ｍｉｎ；柱温２５℃；检测波长２３０　ｎｍ；　

进样量１０　ｌ。　２．２对照品溶液的制备取黄芩苷、芍药苷和甘草苷各５　ｍｇ，精　密称定，分别置５　ｍｌ容量瓶中，加甲醇适量使溶解，定容，即得。　２．３供试品溶液的制备取柴胡、黄芩、白芍、甘草药材，

制成柴