两薯 仲ｌ羞 ２０Ｊ２年第２５卷第ＪＤ期 方药・蔼 研宓 黄芪党参颗粒中 黄芪甲苷含量的Ｈ Ｐ ＬＣ测定方法
吴忠民 ，贾忠ｚ△，李喜香。，高满义 １武威市第二人民医院，甘肃武威７３３００９；２兰州市肺科医院药剂科； ３甘肃省中医院药剂科；４甘肃陇西正大药业有限公司
［摘要］目的：建立黄芪党参颗粒中黄芪甲苷含量的ＨＰＬＣ测定方法。方法：以ＥＬＳＤ为检测器，色谱柱 Ｃ１８（ＡｔＩｔｅｃｈ Ｈｙｐｅｒｓｉ１ ＯＤＳ ４．６ ｆｉｌｍ×１５０ ｍｍ，５ ｍ）；流动相：乙腈：水（４０：６０），流速：１．０ ｍＬ／ｍｉｎ；柱温：２５℃；漂 移管温度：１ ００℃，载气量：２．６ Ｌ／ｍｉｎ。结果：回归方程ｙ＝１．５４７ｌｘ＋２．６２３１（ｒ＝０．９９９６），黄芪甲苷在１．６５６～ ４．９６８ ｇ／ｍＬ之间峰面积与浓度线性关系良好。平均回收率为１ ０１％。结论：该法简便可靠，可为黄芪党参颗粒 质量控制提供依据。 ［关键词］黄芪党参颗粒；黄芪甲苷；含量测定；ＨＰＬＣ ［中图分类号］Ｒ２８５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１ ００４－６８５２（２０１２）１ ０－００２ ３－０３
ＨＰＬＣ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅ ＩＶ ｉｎ ＨｕａｎｇＱｉ ＤａｎｇＳｈｅｎ Ｇｒａｎｕｌｅ Ｚｈｏｎｇ－ｍｉｎ ，ＪＩＡ ｚ ０， △，ＬＩＸｉ－ｘｉａｎｇ３，ＧＡ０ Ｍａｎ－ｙｉ Ｊ Ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅ ｓ Ｓｅｃｏｎｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｗｕｗｅｉ，Ｗｕｗｅｉ ７３３００９，Ｃｈｉｎａ；２ Ｐｈａｒｍａｃｙ ｏｆＬａｎｚｈｏｕ Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ Ｈｏｓｐｉｔａｌ； ３ Ｐｈａｒｍａｃｙ ｏｆＧａｎｓｕ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ； ４ ＧａｎｓｕＬｏｎｇｘｉＺｈｅｎｇｄａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．Ｌｔｄ
Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅ ＩＶ ｉｎ ＨｕａｎｇＱｉ ＤａｎｇＳｈｅｎ ｇｒａｎｕｌｅ ｗｉｔｈ ＨＰＬＣ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＥＬＳＤ ｗａｓ ｔａｋｅｎ ａｓ ｄｅｔｅｃｔｏｒ，ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ Ｃ１８（Ａｌｌｔｅｃｈ Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ ４．６ ｍｍｘ ｌ ５０ ｍｉｌｌ，５ ｍ）；ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ：ｍｅｔｈｙｌ ｃｙａｎｉｄｅ—ｗａｔｅｒ（４０：６０），ｆｌｏｗ ｒａｔｅ：１．０ ｍＬ／ｍｉｎ；ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ： ２５＊Ｃ；ｄｒｉｆｔ ｔｕｂｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ：ＩＯ０￣Ｃ，ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｇａｓ ２．６ Ｌ／ｍｉｎ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｗａｓ尸１．５４７１ｘ＋ ２．６２３１ ｒｒ＝０．９９９６）．Ｔｈｅ ｅｘｃｅｌｌｅｎｔ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅｓ ｗａｓ １．６５６－４．９６８￣ｇ／ｍＬ．Ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｗａｓ １０１％． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ，ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅ，ｃｏｕｌｄ ｐｒｏｖｉｄｅ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ＨｕａｎｇＱｉ ＤａｎｇＳｈｅｎ ｇｒａｎｕｌｅ． ｂｌｎ￣＇ｔｌｓ ＨｕａｎｇＱｉ ＤａｎｇＳｈｅｎ ｇｒａｎｕｌｅ；Ａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅ ＩＶ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ＨＰＬＣ
黄芪党参颗粒是在民间验方黄芪党参茶的基 础上开发出来的保健品。方中炙黄芪乃补气之圣 荮 ］，而党参专于补益脾肺之气，兼能补血［ ，其 味浓而质厚，长于补血而短于补气。二者之补土、 补气以生血也；大枣之补土，补血以化气也，偏补 脾经。全方尽属脾、肺经药，协同奏效，构成了补脾 益气要剂。为了将其开发成为符合现代生活节奏 和市场要求、服用方便的现代中药保健制剂，笔者 现将其黄芪甲苷含量的ＨＰＬＣ测定方法介绍如下： ｌ仪器与试剂 １．１ 药材 黄芪党参颗粒（每克相当于生药 １．７５ ｇ），甘肃陇西正大药业有限公司提供。 １．２仪器ＲＥ一５２Ｃ型旋转蒸发仪（巩义市英峪 予华仪器厂生产），ＳＨＺ－Ｄ ＩＩＩ型循环水式真空泵 （巩义市英峪予华仪器厂生产），ＢＳ２２４Ｓ型电子天 平（北京赛多利斯仪器系统有限公司生产）， ＤＺＦ一６０５０真空干燥箱（巩义市英峪予华仪器厂生 产）；美国Ａｇｉｌｅｎｔ １１００型高效液相色谱仪，包 括：四元梯度泵、真空在线脱气机、柱温箱、 ＥＬＳＤ一２０００型蒸发光散射检测器、自动进样器、化 学工作站。 １．３试剂甲醇、乙腈为色谱纯，水为重蒸水，黄 芪甲苷（批号为：０８１５—２００４０６，中国药品生物制品 检定所提供），水为重蒸水；其余试剂为分析纯。 １．４统计学方法所有实验数据均用ＳＰＳＳ ｌ１．０ 统计软件进行分析。 己 黄芪党参颗粒中黄芪甲苷含量测定方法［５－Ｂ］ ２．１ 色谱条件色谱柱Ｃ１８（Ａ１ｌｔｅｃｈ Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ０ＤＳ ４．６ ｍｍｘｌ５０ ｍｍ，５ ｔｘｍ）；流动相：乙腈：水（４０： ６０），流速：１．０ ｍＬ／ｍｉｎ；进样量：２０ ，柱温：２５℃； 漂移管温度：１００℃，载气量：２．６ Ｌ／ｍｉｎ。 ２．２对照溶液制备精密称取干燥至恒重的黄
－＿＼２３／／＿ 方 药・ 研究 ㈣ ｍ Ｄ厂ｎ谢 。 妣 ，２Ｄ ２ 。Ｌ２５Ⅳ０ 芪甲苷对照品２０．７０ ｍｇ，置２５ ｍＬ容量瓶中，加甲 醇溶解至刻度，制成对照品溶液。 ２．３标准曲线的制作精密吸取对照品溶液 １．０、１．５、２．０、２．５、３．０ ｍＬ，分别置１０ ｍＬ容量瓶 中，用流动相稀释至刻度，摇匀，按色谱条件进行 含量测定，以峰面积对进样量做线性回归，得回归 方程ｙ＝１．５４７１ｘ＋２．６２３１，ｒ＝Ｏ．９９９ ６。结果表明： 在１．６５６～４．９６８ ｇ／ｍＬ之间黄芪甲苷峰面积与 浓度线性关系良好。 ２．４样品溶液的制备精密称取本品１４８．９３ｍｇ， 加适量量水溶解，定量转移至分液漏斗中，用乙 醚振摇提取２次（３０、３０ ｍＬ），弃去醚液，水液用水 饱和的正丁醇振摇提取３次（３０、３０、２０ ｍＬ），合并 正丁醇提取液；用２％氢氧化钾溶液洗涤２次（２０、 ２０ ｍＬ），弃去水液，用正丁醇饱和的水再洗至中 性，弃水液，正丁醇液于水浴上蒸干，残渣用甲醇 溶解，转移至５ ｍＬ量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇 匀，滤过即得。 ２．５精密度测定精密吸取上述对照品溶液，按 标准曲线项下方法操作，连续重复测定６次，ＲＳＤ ＝１．５６％。 ２．６重现性实验取同批本品粉末，共６份，每 份约１４８ ｍｇ，精密称定，按样品溶液的制备项下 处理并测定，该批样品黄芪甲苷含量为０．３８５％， ＲＳＤ＝Ｉ．７３％。结果表明：本方法重复性好。 ２．７加样回收率实验取上述已知黄芪甲苷含 量０．３８５％的本品粉末，共６份，每份１４８ ｍｇ，精密 称定，每份各精密加入对照品溶液（分别含黄芪甲 苷０．５００ ｍｇ，０．４８７ ｍｇ），按样品溶液的制各项下 处理并测定，结果见表１。
序号 １ ２ ３ ４ ５ ６
样品含量／ｍｇ 加入对照品量／ｍｇ 测得量／ｍｇ 回收率／％ 平均回收率／％ ＲＳＤ／％
２．８稳定性实验取本品粉末精密称定１４８．１１ ｍｇ， 按样品溶液的制备项下处理，分别在０、３、６、１２小 时分别进样，记录峰面积，ＲＳＤ＝２．０８％。样品溶液在 ｌ２小时内基本稳定。 ２．９阴性对照试验取黄芪样品，按样品溶液制 ０ ２ ４ ６ ８ １０ １２ 时间／ｍｉｎ 黄芪甲苷对照品 备方法得阴性对照溶液。分别精密吸取对照品溶 液、样品溶液和阴性样品溶液各２０ Ｌ注入高 效液相色谱仪，结果在与对照品色谱峰相应的位 置上，阴性对照无干扰。见图１。
ｈ 沁一 ～ 一几
４ ６ ８ １ ０ １ ２ １４ ０ ２ 时间／ｍｉｎ 阴性对照品 图１ 黄芪党参颗粒样品、阴性对照品、对照品色谱图ＨＰＬＣ ２．１０样品测定及结果分别精密量取对照品溶 液１０ 、２０ ，供试品溶液１５ ，注入液相色 谱仪，用外标两点法计算供试品的含量，即得。结 果见表２。 表２黄芪党参颗粒中黄芪甲苷的含量测定结果 ４ ６ ８ １０ １ ２ ｌ４ 时间／ｍｉｌｌ
样品
］ 讨论 黄芪党参颗粒具补脾益气之功，可治疗脾虚 气弱，体倦乏力，自汗，饮食减少等症。黄芪为方中 君药之一，因此选择黄芪有效成分黄芪甲苷作为 质量控制指标之一。黄芪甲苷在紫外有末端吸收， 紫外检测器可靠性差，本实验使用ＥＬＳＤ检测器， 结果准确可靠，方法简单可靠，易于操作，重现性 好，可作为黄芪党参颗粒质量控制的有效方法。
、２４ 而鄙伸鏖 ２０Ｊ２年第２ 卷第 Ｄ期 方 药・搞莺确 Ｈ Ｐ ＬＣ法测定柴丹疏利胶囊中丹参素的含量 周修森，方永凯 河南省信阳市食品药品检验所，河南信阳４６４０００
［摘要］目的：建立ＨＰＬＣ法测定柴丹疏利胶囊中丹参素含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法， 使用Ａｇｉ１ｅｎｔ ＨＣ—Ｃｌ８ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ（５“ｍ，４．６ｍｍ×２５０ｍｍ）色谱柱，以甲醇：冰醋酸：水（４：１：９５）为流动相，流速 １．０ ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长２８ｌｎｍ。结果：丹参素在１１．３～２２６ ｇ／ｍＬ范围内线性关系良好，其线性方程为 ｙ＝１ ３ Ｏ１ ０ｘ＋ｌ ０ ４１ ９（ｒ＝０．９９９ ９）。丹参素的平均回收率为９９．４０％，ＲＳＤ＝０．３０％（ｎ＝６） 结论：该方法简便、可靠、 准确，可作为该制剂的质量控制方法。 ［关键词］柴丹疏利胶囊；丹参素；ＨＰＬＣ；含量测定 ［中图分类号］Ｒ２８５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１ ００４—６８５２（２０１２）１０－００２５－０３
Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ＤａｎＳｈｅｎＳｕ ｉｎ ＣｈａｉＤａｎ ＳｈｕＬｉ Ｃａｐｓｕｌｅ ｗｉｔｈ ＨＰＬＣ ＺＨＯＵＸｉｕ－ｓｅｎ，ＦＡＮＧ Ｙｏｎｇ－ｋａｉ Ｘｉｎｙａｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｘｉｎｙａｎｇ ４６４００￣Ｃｈｉｎａ
Ａｂｓｔｒａｃｔ ０ｂｉｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆＤａｎＳｈｅｎＳｕ ｉｎ ＣｈａｉＤａｎ ＳｈｕＬｉ ｃａｐｓｕｌｅ ｗｉｔｈ ＨＰＬＣ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＲＰ－ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ａｄｏｐｔｅｄ．Ａｇｉｌｅｎｔ ＨＣ．Ｃ１８ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ｃｏｌｕｍｎ（５ｌｘｍ．４．６ ｍｍｘ２５０ ｍｍ） ｗａｓ ｕｓｅｄ ｗｉｔｈ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｃｏｎｓｉｓｔｅｄ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ—ｇｌａｃｉａｌ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ．ｗａｔｅｒ（４：１：９５１ ａｔ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ １．０ ｍＬ／ｍｉｎ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅ ｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ２８ １ ａｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ａ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ １ １．３－２２６ ｍＬ， ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｉｓ ｙ＝１３ ０１０ｘ＋１０ ４１９（ｒ＝０．９９９ ９）．Ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｗａｓ ９９．４０％，ＲＳＤ＝０＿３０％（ｎ＝６）．Ｃｏｎ— ｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｒｅｌｉａｂｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ ａｎｄ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆｔｈｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ． Ｋｏｙｗｏｒｄｓ ＣｈａｉＤａｎ Ｓ “Ｌ ｃａｐｓｕｌｅ；ＤａｎＳｈｅｎＳｕ；ＨＰＬＣ；ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ