益气复脉胶囊中五味子醇甲的含量测定
为控制益气复脉胶囊的质量指标， 笔者建立了益气复脉胶囊 中北五味
子主要成分五味子醇甲的反相高效液相色谱法
（RP-HPLC
含量测定方法，以有效控制该制剂的质量，为新药
开发提供试验数据。
1.
仪器和试剂
1.1
仪器
SP D-IOAvp检测器（日本岛津）、LC-1OATV p
高压泵（日本
岛津）、工作站：N2010色谱工作站（浙江大学智能信息工程研 究院）、
UV- 1 700
型紫外分光光度计（日本岛津）。
1.2
试剂与用药
乙醚、甲醇（色谱纯）、超纯水、五味子对照品（由中国药 品生物制品
检定所提供， 批号： 110857-200405 供含量测定用） 。
益气复脉胶囊：海口奇力制药 XX公司生产。规格：每粒重
2.
方法与结果
2.1
色谱条件的选择
2.1.1
检测波长的选择
取五味子醇甲对照品适量， 加流动相溶解并稀释制成一定浓
度的溶液。取上述溶液，以流动相为空白，在 200nm- 400nm范
围内扫描，试验结果表明五味子醇甲在 250nm处附近有最大吸
0.37g
，批号：
120201
。
收。同时，参考中国药典 2005 年版一部五味子药材标准中五味 子醇甲含量
测定的检测方法，拟选用250nm作为本品检测波长的 选择。
2.1.2
流动相的选择
3709.8>2500
；试验结果表明色谱条件不能满足含量测定的要求，
因此暂不选用该流动相体系。
系。
2.2
色谱条件与系统适用性试验
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以
Shimadzu VP-ODS
（150X 4.6mm （日本岛津）为色谱柱；流动相为甲醇 -水=65
:
35;检测波长为250nm流速：1.0ml/min，柱温：30C
。理论
板数按五味子醇甲峰计应不低于 2500，五味子醇甲峰与各其他
成分峰的分离度应符合要求。
流动相 1：甲醇 - 水=73：27；
检测波长为 250nm色谱柱为
Shimadzu VP-ODS (150X 4.6mm)
日本岛津） ，进行检测，结
果五味子醇甲色谱峰的保留时间为 4.399min ， 与相邻杂峰的分
离度为 1.177〈1.5 ，拖尾因子为
1.050
，理论塔板数为
流动相 2：甲醇 - 水 =65： 35； 检测波长为 250nm色谱柱为
Shimadzu VP-ODS (150X 4.6mm
日本岛津） ，进行检测，结
果五味子醇甲色谱峰的保留时间为 6.886min ， 分离度为 5.278 ，
拖尾因子为 0.994 ，理论塔板数为
3001.4>2500
；试验结果表明
该色谱条件可满足含量测定的要求， 因此，决定选用该流动相体
2.3
溶剂空白试验
表 1.2 进样精密度测定结果
试验结果表明，其RSD为
0.23%
2.10.1
色谱条件与
取甲醇 20ul 注入液相色谱仪。试验结果表明溶剂对本品含 量测定无
干扰。
2.4
阴性样品试验
按处方工艺自制成不含五味子药材的阴性样品， 同含量测定 项下供试
品溶液的制备方法，制备成阴性样品溶液。取 20ul 注 入液相色谱仪。 试
验结果表明阴性样品溶液对本品含量测定无干 扰。
2.5
线性关系试验
精密称取于60C真空干燥至恒重的五味子醇甲对照品
5.3mg,置于50ml
容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，
置于 10ml 容量瓶中， 加甲醇稀释至刻度。 取上述溶液各 20ul 注 入液
相色谱仪，记录色谱图，结果见表 1.1 ，如下图：
表 1.1 线性关系试验结果
经线性回归分析，在10.60〜31.80 U g/ml范围内，直线方
程 Y=91289x+10392， r=0.9999 ，线性关系良好。
2.6
进样精密度试验
取重复性试验项下的一份供试液， 连续进样 6 针，记录色谱
图。试验测定结果见表 1.2：
制成母液。分别精密量取上述母液
1.0 、1.5 、2.0 、2.5 、3.0ml
2.10.5
含量测定结果
系统适用性试验
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇 -水=65：35为
流动相；Shimadzu VP-ODS （150X 4.6mm （日本岛津）为色谱
2.10.2
对照品溶液的制备
醇溶解并稀释至刻度。精密吸取上述溶液 5ml 至 25ml 量瓶中， 用甲醇
定容，即可。（每 1ml溶液中含五味子醇甲20.00 U g）。
2.10.3
供试品溶液的制备
取重量差异项下的本品，研细，精密称定约 0.8g，置
25ml
量瓶中，加水约20ml，超声处理使完全溶散，放冷，加水稀释
至刻度，摇匀。精密量取上述溶液 10ml，置分液漏斗
醚提取5次，每次15ml，合并醚液，用水洗涤2次，每次10ml, 水洗涤液
再用乙醚10ml回提一次，合并醚液，60C〜80C减压 浓缩至干， 残渣加
甲醇适量使溶解， 并分次转移至 10ml 量瓶中， 加甲醇至刻度，摇匀，滤
过，即得。
2.10.4
测定法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 20 U l，注入液相
色谱仪，测定，即得。
精密称取样品，照含量测定项下的方法测定，结果见下表
柱；检测波长为250nm流速为
1.0ml/min ;柱温为30C
。理论
板数按五味子醇甲峰计应不低于
2500[7]
。
精密称取五味子醇甲对照品
5.0mg，置50ml
量瓶中，用甲
3.1
讨论
1.6
。
表 1.6 五味子醇甲含量测定结果（ n=2）
3
讨论和结论
益气复脉胶囊是由红参、 麦冬、北五味子 3 味常用中药组成 的，是
临床治疗冠心病的一种治疗或辅助治疗的有效药。 现代医 学药理作用研究
表明 [2] ：本处方中人参能改善心肌的代谢，增 加心肌能量储备，促进
DNA和RNA
勺合成，提高机体耐缺氧能力， 从而增强心肌收缩力， 扩张外
周血管。 特别对衰竭或中毒的心脏
作用更为明显。并且红参能够提高血浆 cAMp直，抑制血小板聚
集，降低血浆中纤维蛋白原，清除微血栓，起到改善微循环勺作 用。人参还
可抑制Na+-K+-ATP酶的活性，影响Na+-K+和Na+-Ca2+ 的交换，使
Ca2+
内流增加，从而增加心肌收缩力，降低血管阻 力，还可清除自由基，增
加心肌抗缺氧能力，并兼有抗心律失常 作用，同时还具有调节免疫功能的反
应。麦冬可稳定细胞膜，能 够提高机体的耐缺氧能力；扩张周围血管，减轻
心脏负荷，具有 正性肌力的作用。 五味子能增强机体对各种刺激的非特异
性抵抗 能力，三药协同应用具有扩血管， 增强冠脉血流量和心肌营养血 流
量，强心，改善心肌组织代谢， 促进损伤心肌功能恢复的作用， 可以从根
本上改善心肌功能。实验研究也证实 [3] ，益气复脉胶 囊对实验性休克有
保护、强心、升压作用；并能改善微循环，提 高心肌耐缺氧功能。
3.1.1
检测波长的选择
本实验检测波长为250nm是根据紫外测定。在250nm处, 五味子醇
甲具有最大吸收峰，选择此处波长，所得结果最明显， 结果容易判断。
3.1.2
流动相的选择
本文在选择流动相方面对两种流动相进行了尝试。 其中流动 相 1：
甲醇 - 水（ 73： 27），检测的结果中保留时间、分离度、
拖尾因子和理论塔板数等不满足含量测定的要求， 故不能使用流 动相 1；
而流动相 2 所检测的结果可满足含量测定要求，因此， 决定选用该流动
相体系。
3.2
结论
经过线性关系、精密度、重复性、稳定性、准确度等试验， 证明
HPLC
法操作简便、准确、快速，是测定益气复脉胶囊中北 五味子的五味子
醇甲的含量的理想方法。