５９４２　

高盐饮食－ＦＳＨＲ大鼠胸主动脉ＴＧＦ　１３　表达的影响　吉林医学２０１０年１１月第３１卷第３３期　

黄强　，刘富强　，牟建军　（１．陕西省高陵县医院，陕西西安７１０２００；２．西安交通大学医学院，陕西西安７１００６１）　

［摘要】目的：观察慢性盐负荷对白发性高血压大鼠（ＳＨＲ）胸主动脉ＴＧＦ　ｐ　表达的影响，探索盐在心血管疾病发生发展中的作　

用机制。方法：８５周龄ＳＨＲ雄性大鼠１６只，高盐组（４％ＮａＣ１）、正常盐组（Ｏ．４％ＮａＣ１）各８只，运用鼠尾动脉测定大鼠血压，于饲　

养４周处死，取胸主动脉行ＨＥ染色进行大体病理形态学观察，采用免疫组织化学方法观察主动脉管壁ＴＧＦ　Ｂ，的蛋白表达。结果：４周　后高盐组的收缩压（１５８±１３．６）ｍｍ　Ｈ２（１　ｍｍ　Ｈｇ＝０．１３３３　ｋＰａ）高于正常盐组（１４５±１０．９）ｍｍ　Ｈｇ，两组比较差异有统计学意义（Ｐ　

＜Ｏ．０５）；高盐组胸主动脉ＴＧＦ　ｐ　蛋白表达水平均高于正常盐组，两组比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论：慢性盐负荷可使　

ＳＨＲ胸主动脉管壁增厚，ＴＧＦ　Ｂ．蛋白表达水平升高。　

［关键词】高血压；盐负荷；转化生长因子ｐ　；自发性高血压大鼠　

Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅ　ｏｆ　ＴＧＦＩＭ　ｉｎ　ｔｈｏｒａｃｉｃ　ａｏｒｔａ　ｉｎ　ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙ　ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ　ｒａｔｓ　ｕｎｄｅｒ　ｓａｌｔ　ｌｏａｄｉｎｇ　

ＨＵＡＮＧＱｉａｎｇｌ，ＬＩＵＦｕ—ｑｉａｎｇｅ，ＭＯＵＪｉａｎ－ｊｕｎ２（１　ＧａｏｌｉｎｇＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｈａａｒｒｒｉ　Ｐｒ（】ｖｌｎｃｅ　Ｘｉｆｄｎ　７１０２００，。２．Ｘ／＇ａｎＪｉａｏｔｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓ　ｔ））　Ｘｉ＇ａｎ　７１００６１）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ｓａｌｔ　ｌｏａｄｉｎｇ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＴＧＦ　ｐ】ｉｎ　ｔｈｏｒａｃｉｃ　ａｏｒｔａ　ｏｆ　ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙ　

ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ　ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　１　６　ｍａｌｅ　ＳＨＲ　ｒａｔｓ　ｏｆ　５　ｗｅｅｋｓ　ｏｌｄ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ａｎｄ　ａｖｅｒａｇｅｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｈｉｇｈ　ｓａｌｔ（４％ＮａＣｌ，ｎ＝８）ａｎｄ　ｎｏｒｍａｌ　ｓａｌｔ（０．４％ＮａＣ１．”　８）ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｓａｃｒｉｆｉｃｅｄ　ａｆｔｅｒ　４　ｗｅｅｋｓ　ｗｈｉｃｈ　ａｏｒｔｉｃｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ　ａｏｒｔａ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　ａｎｄ　ｄｙｅｄ　ｗｉｔｈ　ＨＥ　ｆｏｒ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｇｅｎｅｒａｌ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ．Ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＴＧＦ　ｐ　１　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｂｙ　ｉｍｍｔｍｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ａｆｔｅｒ　４　ｗｅｅｋｓ　ｏｆ　ｈｉｇｈ　ｓａｌｔ　ｇｒｏｕｐ，ｓｙｓｔｏｌｉｃ　

ｂｌｏｏｄ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ（１５８　４－１３．６）ｍｍ　Ｈｇ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｎｏｒｍａｌ　ｓａｌｔ　ｇｒｏｕｐ（１４５±１０．９）ｍｍ　Ｈｇ，ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｗａｓ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（尸＜Ｏ．０５）；ｔｈｅ　ｍａｉｎ　ｃｈｅｓｔ　ｈｉｇｈ　ｓａｌｔ　ｇｒｏｕｐ　ａｒｔｅｒｙ　ＴＧＦ　Ｂ　ｌ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｗｅｒｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｎｏｒｍａｌ　ｓａｌｔ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｗａｓ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜Ｏ．０５）．　

Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｈｉｇｈ—ｓａｌｔ　ｄｉｅｔａｒｙ　ｃｏｕｌｄ　ａｇｇｒａｖａｔｅ　ｔｈｅ　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ　ａｎｄ　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＴＧＦ　ｐ　Ｉ　ｐｒｏｔｅｉｎ．　

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ；Ｓａｌｔ　ｌｏａｄｉｎｇ；Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｆａｃｔｏｒ　ｐ　ｌ；Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙ　ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ　ｒａｔｓ　

大动脉结构改变导致的大动脉功能损害是心ｍ管事件发生的　

重要因素之一。最近有试验显示，动脉僵硬度与２４　ｈ尿钠排泄量　明显相关，而且这种作用与盐所致的血压升高无关　ｌ。转化生长　

因子ｐ。（ＴＧＦ　Ｂ　）是一种能够使血管平滑肌细胞增殖、成纤维　

细胞增生、细胞外基质沉积的细胞因子，它在心脏动脉重构过程　

中起着重要作用。实验通过观察高盐饮食下ＳＨＲ大鼠主动脉管壁　结构以及ＴＧＦ　ｐ，表达含量的变化，探索盐导致动脉结构改变的机　

制。现报告如下。　

１资料与方法一　１．１实验动物及分组：５周龄ＳＨＲ大鼠１６只，分为高盐组（饲　

以４％高盐饮食，ｎ＝８）和正常盐组（饲以０．４％正常盐饮食，　ｎ＝８），其他饲养条件保持一致。各组分别饲养４周后采用ＢＰ一６动　

物无创血压心率测定仪测量血压、心率；处死，取血、取主动脉　

备用。　

１．２　主动脉ＴＧＦ　ｐ。免疫组化测定：石蜡切片；３０％Ｈ　Ｏ：室温孵　育２Ｏ　ｍｉｎ，ＰＢＳ冲洗；热修复；山羊血清室温孵育１０　ｍｉｎ；加入　

适量一抗，４℃过夜；加二抗３７℃孵育２０　ｍｉｎ，ＰＢＳ洗；加辣根酶　

标记的链酶卵白素孵育３７￣Ｃ　３０　ｍｉｎ，ＰＢＳ洗；ＤＡＢ显色，封片。　

主动脉细胞浆内有棕黄色颗粒为阳性，测定其阳性染色的积分光　

密度值（ＩＯＤ），ＩＯＤ值越高组织抗原含量越高，取５个视野的平　

均值作为该切片的值。　１．３统计学分析：实验数据以均数±标准差（　－Ｉ－Ｓ）表示，使用　

ＳＰＳＳ　１３．０统计软件进行数据处理，组间比较采用单因素方差分　

析，双侧Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。　

２结果　２．１　盐负荷Ｒ，ｔＳＨＲ大鼠收缩乐的影响：在４周末高盐饮食组ＳＨＲ　

大鼠的ＳＢＰ显著高于正常摄盐组，分别为（１　５８±１３．６）ｍｍ　Ｈｇ　（１　ｍｍ　Ｈｇ－０．１３３３　ｋＰａ）、（１４５±１０．９）ｍｍ　Ｈｇ，两组比较差异　

有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。　２．２　主动脉组织形态学观察：在４周末高盐组主动脉管壁明显较　

正常盐组增厚。　２－３　盐Ｘ￣ＳＨＲ胸主动脉ＴＧＦ　Ｂ　表达的影响：在４周末高盐组大鼠　主动脉ＴＧＦ　Ｂ，的表达均较Ｌｓ组增高，比较差异有统计学意义（Ｐ　

＜０　０５）　’　

３讨论　盐是高血压重要的环境因素之一。然而近年来的研究表明，　高盐摄人不仅导致血压升高，而且有独立于血压之外的多重作　

用，直接导致组织器官损伤，如左室肥厚、肾功能损害、脑卒中　

等…。早在２０世纪９０年代，Ａｖｏｌｉｏ等人就采用脉搏波速度的方法　

发现长期的低盐饮食可改善正常人群的大动脉弹性　。　实验免疫组化结果显示，ＨＳ组的大鼠４周高盐饮食后ＴＧＦ　ｐ　

的表达均较ＬＳ组增高，提示盐促进大动脉重构可能部分是通　过增加ＴＧＦ　ｐ　的表达而实现的。最近Ｙｉｎｇ等研究表明高盐导致　

ＴＧＦ　Ｂ　增加可能是通过激活Ｐｙｋ２与ｃ—ｓｒｃ组成的复合体实现的【３　。　

综上所述，实验显示高盐可导致大动脉ＴＧＦ　Ｂ表达增多，管　

壁增厚重构，这可能是高盐饮食导致心血管事件发生率升高的重　

要机制之一。　

４参考文献　［１】Ｐｏｌ６ｎｉａ　Ｊ，Ｍａｌｄｏｎａｄｏ　Ｊ．Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓａｌｔ　ｉｎ　ｔａｋｅ　ｂｙ　ｕｒｉｎａｒｙ　

ｓｏｄｉｕｍ　ｅｘｃｒｅｔｉｏｎｉｎａ　Ｐｏｒｔｕｇｕｅ　ｓｅａｄｕｌｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉ

ｐ　吉林医学２０１０年１　１５１第３ｌ卷第３３期　

ｔｏ　ａｒｔｅｒｉａｌ　ｓｔｉｆｎｅｓｓ￣．Ｒｅｖ　Ｐｏｒｔ　Ｃａｒｄｉｏｌ，２００６，２５（９）＇８０１．　［２】Ｇｕｉｌｈｅｍｄｕ　Ｃ，Ｍｉｍｒａｎ　Ａ，Ｎｏｎ．－Ｐｒｅｓｓｕｒｅ・．ｒｅｌａｔｅｄ　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　Ｄｉｅｔａｒｙ　

Ｓｏｄｉｕｍ［Ｊ］．Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ　Ｒｅｐｏｒｔｓ，２００７，９（１）：１　５４．　

益柏外洗方的动物实验研究　

郑创钦（广东省巾医院珠海医院，广东珠海５１９０１５）　５９４３　

［３］Ｙｉｎｇｅｔａ１．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｄｉｅｔａｒｙ　ｓａｌｔ．－ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｉｎ　ｉｎｔｒａｖａ　

ｓｃｕｌａｒ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴＧＦ—Ｂ　ｌｆＪ１．ＡｍＪ　Ｐｈｙｓｉｏｌ　ＲｅｎａｌＰｈｙｓｉｏｌ，２００８，２９５　

（２）：４Ｏ６．　［收稿日期：２０１０．０９－１２编校：郑英善】　

［摘要】目的：探讨益柏外洗方对动物皮肤的过敏性、刺激性及急性毒性。方法：大鼠３０只，雌雄各半并随机分组；致敏接触受试　药并观察大鼠机体免疫系统对益柏外洗方的反应，计算致敏率、评分，评估大鼠对益柏外洗方的过敏性。小鼠２５只，雌雄兼用；两者　

均随机分组，刺激性实验用１　０只，急性毒性实验用１　５只。小鼠背部敷益柏外洗方后观察小鼠局部表现、全身中毒以及死亡情况，判断　

益柏外洗方对小鼠皮肤的刺激性和急性毒性。结果：大鼠敷药皮肤未见水肿红斑，其各项生理指标等均未见明显异常，表明益柏外洗　

方对大鼠免疫系统影响微小，无过敏性。两组用药小鼠敷药区皮肤及全身未见红斑和水肿等病变，证实益柏外洗方对小鼠皮肤急性毒　性很小，无刺激性。结论：益柏外洗方对实验动物皮肤的急性毒性很小、无过敏性及刺激性，具有临床实用价值。　

【关键词】益柏外洗方；过敏性；刺激性；急性毒性　

Ａｎｉｍａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｓｔｕｄｙ　ｆｏｒ　ｙｉ　ｂｏ　ｅｘｔｅｒｎａｌ　ｌｏｔｉｏｎ　ＺＨＥＮＧ　Ｃｈｕａｎｇ－ｑｉｎ（ＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃ￣ＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＺｈｕｈａｉＨｏｓｐｉｔａｌ　

ＧｕａｎｇｄｏｎｇＺｈｕｈａｉ　５ｌ９０ｌ５１　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅｘｃｅｓｓ　Ｙｉ　Ｂｏ　Ｅｘｔｅｒｎａｌ　Ｌｏｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｎｉｍａｌ　ｈｅａｄ　ｓｋｉｎ　ｆｏｒ　ａｌｌｅｒｇｙ，ｉｒｒｉｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｃｕｔｅ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｐｒｅｐａｒｅ　３０　ｒａｔｓ，ｍａｌｅ　ａｎｄ　ｆｅｍａｌｅ　ｈａｌｆ　ａｎｄ　ｈａｌｆ　ａｎｄ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ａｓｓｉｇｎｅｄ．Ａｌｌｅｒｇｅｎ　ｅｘｐｏｓｕｒｅ　ｏｆ　ｒａｔｓ　ｔｏ　ｔｅｓｔ　ｄｒｕｇ’Ｓ　ｉｍｍｕｎｅ　

ｓｙｓｔｅｍ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ．Ｃａｌｃｕｌａｔｅ　ｔｈｅ　ａｌｌｅｒｇｙ　ｒａｔｅ．Ａｓｓｅｓｓ　ｔｈｅ　ａｌｌｅｒｇｉｃ　ｏｆ　Ｙｉ　Ｂｏ　Ｅｘｔｅｒｎａｌ　Ｌｏｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｒａｔ．２５　ｍｉｃｅ’Ｓ　ａｐｐｌｙ　ｌｉｎｉｍｅｎｔ　ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｐａｒｔｉａｌ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　，ｓｙｓｔｅｍｉｃ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ａｎｄ　ｄｅａｔｈ　ｓｉｔｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｃｅ，ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　Ｙｉ　Ｂｏ　Ｅｘｔｅｒｎａｌ　Ｌｏｔｉｏｎ　ｏｎ　ｓｋｉｎ　ｉｒｒｉｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｃｕｔｅ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｒｅａｔｅｄ　ｒａｔｓ　ｈａｓ　ｎｏ　ｅｄｅｍａ　ｏｒ　ｅｒｙｔｈｅｍａ，ｔｈｅ　ｏｔｈｅｒ　ｐｈｙｓｉｃａｌ　ｐａｔｔｅｒｎ　ｓｈｏｗ　ｎｏ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ　ｔｈａｔ　ｅｘｃｅｓｓ　ｏｆ　Ｙｉ　Ｂｏ　Ｅｘｔｅｍａｌ　Ｌｏｔｉｏｎ　

ｏｎ　ｔｈｅ　ｒａｔ’Ｓ　ｉｍｍｕｎｅ　ｓｙｓｔｅｍ　ｈａｖｅ　ｌｉｔｔｌｅ　ｅｆｆｅｃｔ，ｎｏ　ａｌｌｅｒｇｉｃ　Ｓｋｉｎ　ｏｆ　ｔｗｏ　ｇｒｏｕｐｓ　ｏｆ　ｄｒｕｇ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｍｉｃｅ　ａｎｄ　ｎｏ　ｅｒｙｔｈｅｍａ　ａｎｄ　ｅｄｅｍａ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｓｙｓｔｅｍｉｃ　

ｄｉｓｅａｓｅｓ．，ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ　ｔｈｅ　Ｙｉ　Ｂｏ　Ｅｘｔｅｒｎａｌ　Ｌｏｔｉｏｎ　ｏｎ　ｓｋｉｎ　ａｃｕｔｅ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｉｓ　ｖｅｒｙ　ｓｍａｌｌ，３１０１１－ｉｒｒｉｔａｔｉｎｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ａｃｕｔｅ　ｔｏｘｉｃｉｌｔｙ　ｏｆ　Ｙｉ　Ｂｏ　Ｅｘｔｅｒｎａｌ　

Ｌｏｔｉｏｎ　ｉｓ　ｖｅｒｙ　ｓｍａｌｌ，ｎｏ　ａｌｌｅｒｇｉｃ　ａｎｄ　ｉｒｒｉｔａｎｔ，ＳＯ　ｉｔ　ｄｅｓｅｒｖｅｄ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ　ｉｎ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｗｏｒｋ．　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｙｉ　Ｂｏ　Ｅｘｔｅｒｎａｌ　Ｌｏｔｉｏｎ；Ａｌｌｅｒｇｉｃ；Ｉｒｒｉｔａｔｉｏｎ；Ａｃｕｔｅ　ｔｏｘｉｃｉｔ），　

益柏外洗方为纯中药外用洗方，因其主要成分是益母草和黄　柏，所以起名为益柏外洗方，为医院经验方。益柏外洗方南益母　

草、白鲜皮、黄柏、丹皮、防风等药组成，具有凉血消脂、止痒　

收敛、清热祛湿的作用。其中成分之一黄柏醇提物或水煎剂对多　种致病性皮肤真菌有抑制作用。益柏外洗方在治疗头皮糠疹和头　

皮脂溢性皮炎上有良好疗效。为了探讨益柏外洗方对动物皮肤的　

过敏性、刺激性及急性毒性，在３０只大鼠和２５只小鼠上进行了动　物实验，收到了良好的效果，现报告如下。　

１资料与方法　

１．１　材料与试剂：实验药物：益柏外洗方为医院经验方。配　置方法：当归２０　ｇ、丹皮１５　ｇ、黄柏２０　ｇ、侧柏Ｄｒ３０　ｇ、益母草　

２０　ｇ、金银花２０　ｇ、防风１５　ｇ、何首乌３Ｏ　ｇ、白鲜皮１５　ｇ。将以　

上９味药物粗粉后，浸入６０％乙醇９００　ｍ１４８　ｈ过滤，再用６０％乙　

醇－６００　ｍｌ浸渍４８　ｈ，过滤；药渣挤压，合并两次滤液，加入甘油　２Ｏｍ１和氮酮５　ｍｌ，摇匀静置２４　ｈ，减压滤过，分装，即得益柏外　

洗方。此剂气味芳香，为黄褐色液体。　

１．１．１其他药物：赋形剂；去毛剂；将硫化纳：肥皂粉：淀粉配　置比例为３：１：７，再加水调至稀糊状备用；阳性致敏物：用７０％的　

乙醇将２－４－．二硝基氯代苯配成浓度为０．１％的激发溶液和浓度为１％　

的致敏溶液。　１．１．２实验动物：成年大鼠３０只，雌雄各半，公鼠体重４５０～　５２０　ｇ，母鼠体重２５０～３００　ｇ。成年小鼠２５只，雌雄兼用，公鼠体　

重２０～４０　ｇ，母鼠体重１８～３５　ｇ。　

１．２方法　１．２．１益柏外洗方的皮肤过敏实验　１．２．１．１动物分组：大鼠３０只，雌雄兼用，随机分为空白对照　

组、给药组和阳性物对照组，每组各ｌＯ只。空白对照组给予赋形　

剂１　ｍｌ／只，给药组给予益柏外洗方１　ｍｌ／只，阳性物对照组给予致　敏浓度的１％￣ｆｉ基氯代苯１　ｍｌ／只。所有大鼠给予受试药物ｒ２４　ｌａ前　

将背部两侧，每侧约３　ｃｍ　ｘ　３　ｃｍ面积用去毛剂脱毛。　

１．２．１．２致敏接触：将实验药物约１　ｍｌ涂在大鼠左侧脱毛区，　用一层油纸加以两层纱布覆盖，再以无刺激胶布固定封闭。　

每只大鼠分笼饲养，持续６　ｈ去药观察。在７　ｄ、１４　ｄｒ２同样方　

法在左侧脱毛区重复１次。空白对照组与阳性物对照组方法同　

上。　１．２．１．３激发接触：于最后一次给实验药物致敏１４　ｄ后，将实验　药物１　ｍｌ涂在大鼠右侧脱毛区，阳性对照用０．１％２，４一二硝基氯代　

苯，持续６　ｈ，去除实验物立即观察。并在２４　ｈ、４８　ｈ及７２　ｈ再次　观察大鼠脱毛区皮肤过敏反应情况。按大鼠皮肤反应记录各时日　

过敏反应程度，基于红斑水肿的皮肤过敏反应评分标准为：无为　

０分，轻度为１分，中度为２分，重度为３分，水肿性红斑为４分；