报告人：赵淑锐
（immunity）
“Immune”是从拉丁字“immunis”衍生而来，其原意是免除服役 或免除课税之意。 免疫：指机体接触“抗原性异物”或“异己成分”的一种特异性 生理反映，其作用是识别和排除抗原性异物，以此维持机体的生 理平衡。这些维持机体稳定性的反应，通常对机体是有利的；但 在某些条件下也可以是有害的。所以免疫的现代概念可以概括的 指机体识别和排除抗原性异物的功能。
1997年Thomas A. Fey等人再次对该模型进行了优化
实验动物：受体鼠（Balb/c）(10±2)周、体重(20±2)g 、雄性 供心鼠（C57BL/6J ）48小时内 性别不限
手术器械：眼科剪、刀片、缝针、缝线 镊子、培养皿、纱布、棉签
注射器（1ml） 试剂： 10%乌拉坦
1%新洁尔灭酊
Hank’s液 仪器：生理记录仪或心电图机或体显微镜
1、受体鼠经10%乌拉坦(10毫克/10克体重)腹腔注射麻醉
2、1%新洁尔灭酊耳廓局部消毒，剃毛 3、持眼科剪于耳廓背侧中线之前1/3处作一与耳廓中线垂直
处作一3-4毫米长的切口，勿损伤耳廓静脉
4、持镊子向耳尖方向钝性分离皮下组织，使 之成一管腔(见图1)
• BAlb/c小鼠腹腔注射硫代乙醇酸钠 溶液1.5ml，四小时后断颈处死，浸 于75酒精溶液中消毒。向腹腔内注 射消毒Hank’s液约8ml，轻揉小鼠 腹部，剪开小鼠腹部外层皮肤，用
注射器将腹腔液抽出，置于消毒离
心管中。收集的腹腔液经离心 (2000r/min，5min)沉淀后，用 Hank‘s液洗两次，用含10%小牛血 清的RPMI1640培养液重悬制成细 胞悬液 (2 x 106细胞/ml) 。
加100μl细胞悬液于96孔板中（每孔 含5×105个 ）。每孔加25 μl ConA或 LPS （ ConA 浓度 5μg/mlLPS浓度
10 μg/ml）,每孔加10 μl药物（3个 复孔）37℃，5%CO2培养48小时。
结束培养前4小时每孔加5mg/ml MTT 10μl ，1000r/min离心30分钟，弃上清 每空加入DMSO200μl 溶解，振荡， Biorad酶标仪在波长570nm处测OD值。
抑制率：
ConA或LPS对照平均OD 给药组平均OD C o n A 或 L P S 对 照平 均 O D
动物：BAlb/c小鼠
仪器：注射器、96孔板、Biorad酶标仪、表面皿 试剂：Hank’s液、RPMI-1640培养液、3%硫代乙醇酸钠
溶液(1.5ml) 0.1%中性红、细胞溶解液（乙醇：乙酸=1：1）
1、移植术后当天给药，每日给药
2、术后第六日起每天记录移植心肌组织的心电信号
3、测试异位心电图时，正负电极分别置于移 植心脏两侧，接地极连接在小鼠后肢(图2)
动物：小鼠 药品：ConA或LPS MTT 仪器：200目钢网、注射器芯、96孔板、Biorad酶标仪、表面皿 试剂：Hank’s液、RPMI-1640培养液、DMSO、红细胞裂解液
4、将新生供鼠置于碎冰中一分钟后用75%酒精皮肤消毒， 剖胸摘取心脏。将心脏置于无菌Hank’s液内搏动1-2次以 排空心腔余血。
5、移植时，用刀片把供心纵向剖成为基本等大二半，肌纤 维成一斜面。将心肌组织移植填入受体鼠耳腔内，将皮肤 切口缝合一针。（心肌组织的离体时间不超过2分钟）
6、用手指轻按局部，使移植物与受鼠之周围组织贴紧。
免疫抑制剂？
对NK细胞无明显抑制作用，但可间接 通过干扰IFN-γ的产生而影响NK细胞 的活力
——小鼠耳后心肌组织移植模型
——脾淋巴细胞对丝裂原的增殖反应 ——巨噬细胞吞噬试验
1963年Fulmer等人就已经开始研究心肌组织的移植，并对其 进行了深入的研究
1971年Judd和Trentin两人又对模型进行了精处死后，将小鼠全身浸入75％乙醇中浸泡2－ 3分钟消毒，无菌条件下取出脾脏，用注射器芯经200目无 菌不锈钢筛网研磨，过尼龙膜使之成单细胞悬液， Hank‘s 液冲洗，收集分离的脾细胞悬液，1000r/min离心5分钟， 弃上清；加红细胞裂解液10ml，混匀脾细胞，静止4-5分钟， 待红细胞完全破碎，1000r/min离心5分钟，弃上清去除红 细胞，Hank’s液洗2-3遍，用RPMI1640培养液重悬细胞， 计数调整细胞浓度为3×106个/ml。
• 每孔加100μl细胞悬液于96孔板中，每孔加10μl待侧药物（5 个复孔）， 37℃，5%CO2培养24小时，弃去上清液，每空 加入0.1%中性红0.1ml，37 ℃培养30min,弃去中性红，并用 Hank’s液冲洗三次，以除去未被吞噬的中性红。每孔加入细 胞溶解液（乙醇：乙酸=1：1） 100μl ，静置过夜，轻度震 荡后，用Biorad酶标仪在波长540nm处测OD值。
免疫系统中的免疫细胞和免疫分子之间，以及与其它系 统如神经内分泌系统之间的相互作用，使得免疫应答以最恰当 的形式维持在最适当的水平。
免 疫
免疫增强剂
调
节
剂 免疫抑制剂
选择性抑制T细胞，作用于T细胞活化的早期，对B细胞抑制 作用较弱
抑制巨噬细胞产生IL-1
抑制抗原或有丝分裂素激活淋巴细胞 表达IL-2受体
抑制率：细胞悬液对照平均OD 给药组平均OD 细胞悬液对照平均OD