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益 母 草

附件3.4:中药材注释模板-益母草益母草YimucaoLEONURI HERBA别名:茺蔚、益母、益母蒿、坤草、红花艾、益母艾、月母草。

益母草为常用中药,具有活血调经,利尿消肿之功能。

始载于《神农本草经》,列为上品。

《本草纲目》名茺蔚,列入草部隰草类。

陶宏景谓:“今处处有,叶如荏,方茎,子形细长,三棱。

”。

经核对《植物名实图考》所载茺蔚及附图,与现代所用的益母草相符〔1〕。

全国大部分省市均有分布,以湖北、河南、安徽、江西、湖南、广西为主产区,以野生为主,少量种植,生长于荒野山地、田埂路边、河边等地。

本品先后收载于《中国药典》1963年版、1977年版、1985年版、1990年版、1995年版、2000年版、2005年版。

2005年版中国药典中益母草药材中收录了鲜益母草和干益母草,鲜益母草主要作为制剂的原料。

干益母草的采集时间与品质有较大关系,应为夏季茎叶茂盛、花未开或初开时采割,经调查目前市场上存在较多的童子益母草,主要作制剂原料,一般为春季幼苗期采割,其有效成分含量比较高,有部分省份的炮制规范中已收载童子益母草,如上海市中药饮片炮制规范,因与习惯使用规格不同,童子益母草是否收入药典有待后续研究。

【来源】拉丁学名:Leonurus japonicus Houtt.原植物形态:一年或二年生草本,高30~120cm。

春季幼苗期叶基生,拔节后茎直立,方形,单一或分枝,被微毛。

叶对生,基生叶具叶柄,叶片略呈圆形,叶缘5~9浅裂,每裂片具2~3钝齿,基部心形;茎中部的叶具短柄,3深裂,中央裂片常3裂,两侧裂片常再1~裂,小裂片披针形或近线形,先端渐尖,边缘疏生锯齿或近全缘;顶端的叶不分裂,线形,近无柄。

花多数,生于叶腋,呈轮伞状,花冠唇形,淡紫色或淡红色,长9~12mm,上下唇近等长,花冠外被长绒毛;雄蕊4枚,2强,子房4裂,柱头2裂。

小坚果4枚,三棱状,褐色。

花期6~9月,果期9~10月。

【性状】传统经验认为,本品以茎细、质嫩、叶多、色绿者为佳;质老、枯黄、无叶者不能入药。

【成分】益母草中化学成分主要含有生物碱类、二萜类、甾醇、黄酮类、有机酸等〔2〕。

益母草中生物碱以益母草碱(leonurine)和水苏碱(stachydrine)为主。

【鉴别】(1)益母草茎的横切面可见表皮细胞、下皮厚角细胞、中柱鞘纤维束微木化和髓部薄壁细胞,图谱见《中华人民共和国药典中药材显微鉴别彩色图鉴》。

(2)为益母草中水苏碱的薄层鉴别,水苏碱为益母草的主要成分之一,含量较高,取含量测定项下供试品溶液的浓缩液,经离心去除部分大分子的杂质后直接点样,薄层色谱效果较为理想,比较了正丁醇-盐酸-水(4:1:0.5)、丙酮-无水乙醇-盐酸(10:6:1)、乙酸乙酯-正丁醇-盐酸(1:8:3)、乙酸乙酯-丙酮-甲酸(5:3:2.5)等展开剂,结果以丙酮-无水乙醇-盐酸(10:6:1)较为理想,并经比较不同品牌的薄层板(见图2),结果青岛海洋化工厂和MN公司生产的薄层板均得到较理想的效果,但以青岛海洋化工厂生产的薄层板展开效果最为理想。

溶剂前沿原点位置1 2 3 4 5 6 7 1、供试品(2μl) 2、供试品(4μl) 3、供试品(6μl)4、供试品(8μl) 5、对照品(2μl) 6、对照品(4μl)7、对照品(6μl)薄层板:硅胶G(青岛海洋,批号:20081231)展开剂系统:丙酮-无水乙醇-盐酸(10:6:1)显色剂:稀碘化鉍钾-三氯化铁试液(10:1)1 2 3 4 5 6 7 1、供试品(5μl) 2、供试品(10μl) 3、对照品(5μl)4、对照品(10μl) 5、供试品(5μl) 6、供试品(10μl)7、对照品(10μl)薄层板:硅胶G(MN,批号:502054)展开剂系统:丙酮-无水乙醇-盐酸(10:6:1)显色剂:稀碘化鉍钾-三氯化铁试液(10:1)【检查】【检查】水分按照中国药典一部水分测定法(附录IX H第一法)测定,根据12批干益母草药材水分测定结果(8.3~12.6%)以及仓库储存的要求,制订干益母草水分的限度为不得过13.0%。

总灰分为限制本品中的无机杂质,规定总灰分的检查项,限度制订根据中国药典2005年版制订。

浸出物因益母草有效成分主要为生物碱类,水溶性较强,且一般含益母草中药制剂均采用水煎煮提取,所以浸出物以水为溶剂,采用热浸法提取,根据3批干益母草药材及10批益母草饮片测定结果(分别为21.8~29.0%,12.5~25.3%),制订干益母草药材浸出物的限度为不得少于15.0%,干益母草饮片浸出物的限度为不得少于12.0%。

【含量测定】益母草中化学成分主要有生物碱类、二萜类、甾醇、黄酮类、有机酸等,其中生物碱类以益母草碱(leonurine)和水苏碱(stachydrine)为主,药理作用研究证明,益母草中的生物碱具有显著的药理活性,所以含量测定指标选择盐酸益母草碱和盐酸水苏碱作为测定指标。

一、盐酸水苏碱盐酸水苏碱属于季胺碱,结构中无共轭体系,盐酸水苏碱极性很大,传统的反相色谱对它的保留和分离能力较弱,通常在死时间流出而无法得到分离,另外它的紫外吸收弱,所以传统的定量方法多采用薄层扫描法,但该方法重现性和灵敏度均较差,有文献报道盐酸水苏碱可采用氨基键合硅胶柱和离子交换柱进行液相色谱分离,在起草过程中也曾试用氨基键合硅胶柱,由于该种色谱柱使用寿命较短,键合相容易流失,易造成保留时间不稳定,而离子交换柱对流动相酸度要求比较苛刻,耐用性较差,根据现阶段对强极性的化合物分析的最新进展,亲水作用色谱(HILIC)能为强极性的化合物提供合适的保留,在强极性的化合物测定上应用逐渐广泛〔3〕,目前已有多种商品化的HILIC色谱柱面市,多数为硅胶基质,键合了不同极性基团,如丙基酰胺基、酰胺基、聚琥珀酰亚胺等极性基团,部分商品化的HILIC色谱柱键合了特殊的基团,但都未公开。

所以在本次研究中选择了稳定性好、价格相对比较便宜的丙基酰胺键合硅胶柱进行分离。

对盐酸水苏碱对照品溶液,进行紫外光谱扫描,盐酸水苏碱在紫外区基本无吸收,采用紫外检测器(用191nm作为检测波长)与蒸发光散射检测器串联进行检测,结果紫外检测器所测得的信号响应值小、基线噪音大,而蒸发光散射检测器所得信号较理想,所以采用通用型检测器蒸发光散射检测器进行检测。

测定方法的验证经方法学验证,盐酸水苏碱在0.536~10.713 g范围内进样量的对数与峰面积的对数有良好的线性关系(Y = 1.4918X+2.6261,r=0.9995),重复性试验结果表明方法重复性较好,RSD=2.5%(n=6),平均回收率为101.9%,RSD=1.4%(n=6),稳定性试验考察结果表明供试品溶液至少在17小时内稳定。

实验中考察了0.5ml/分钟、1.0ml/分钟流速对色谱行为的影响,结果流速为0.5ml/分钟时,色谱峰对称性较好、响应值也有所提高,采用0.5ml/分钟流速色谱峰响应较为理想,另实验中比较了蒸发光检测器参数(漂移管温度和气流速度)对响应值的影响,结果表明漂移管温度对响应值影响不大,而气流速度对响应值影响较大,适当降低气流速度可增加响应值。

根据拟定的方法,测定了12批干益母草药材和10批益母草饮片中盐酸水苏碱的含量,结果干益母草药材含量范围在0~2.01%之间,其中未检出和含量很低的样品采收季节均不符合要求,为花已盛开或已结籽后采收的药材,采收季节符合要求的样品含量范围在0.89~1.35%之间,而童子益母草(即幼苗期采收加工的药材)含量范围在0.94~2.01%之间;干益母草饮片含量范围在0~0.73%之间;再参考原中国药典2005年版的含量限度,制订限度为:按干燥品计算,干益母草含盐酸水苏碱(C7H12NO2·HCl)不得少于0.50%, 干益母草饮片含盐酸水苏碱(C7H12NO2·HCl)不得少于0.40%。

盐酸水苏碱典型的色谱图二、盐酸益母草碱盐酸益母草碱能够抑制血小板的聚集,防止血栓的形成[4];可扩张外周血管,降低血管阻力,具有一定的抗高血压,降低冠脉阻力,增加冠脉血流量,保护心脏等药理作用。

盐酸益母草碱属于有机胺类生物碱,结构中具有共轭体系,其分析常用离子抑制(反相)和离子对(反相)色谱法,用紫外检测器测定。

经比较不同的离子抑制剂,结果盐酸益母草碱均不能和杂质峰很好分离,所以正文方法采用离子对色谱法进行分离。

测定方法的验证经方法学验证,盐酸益母草碱在0.02866~1.433 g进样量范围内与峰面积呈良好的线性关系(Y = 1730.7766X-3.6135,r=1.0000),重复性试验结果表明方法重复性较好,RSD=1.2% (n=6),平均回收率为98.0%,RSD=0.6%(n=6),稳定性试验考察结果表明供试品溶液至少在42小时内稳定。

实验中比较不同流动相酸度,结果表明酸度在一定浓度范围变动,对色谱行为影响不大;比较了不同的柱温条件,结果表明柱温对色谱行为有较大的影响,对于不同的色谱柱可适当调节柱温以达到较好的分离效果。

根据拟定的方法,测定了12批干益母草药材和10批益母草饮片中盐酸益母草碱的含量,结果干益母草药材含量范围在0.007~0.160%之间,其中含量很低的样品采收季节均不符合要求,为花已盛开或已结籽后采收的药材,采收季节符合要求的样品含量范围在0.072~0.160%之间,而童子益母草(即幼苗期采收加工的药材)含量范围在0.021~0.170%之间;干益母草饮片含量范围在0.011~0.132%之间;根据测定数据制订限度为:按干燥品计算,干益母草含盐酸益母草碱(C14H21O5N3·HCl)不得少于0.050%, 干益母草饮片含盐酸益母草碱(C14H21O5N3·HCl)不得少于0.040%。

盐酸益母草碱典型的色谱图【炮制】益母草的炮制方法为净制、切段,因益母草有效成分为水溶性生物碱,如水洗时间过长则将损失其有效成分,因此应迅速洗净。

若鲜时及时洗净、切段、干燥更为适宜。

干燥时,不宜堆放太厚,以防草质药材腐烂。

相关品种情况白花益母草(Leonurus heterophyllus Sweet f.leucanthus C.Y.Wu et H.W.Li)为益母草的变种,分布于华东、华中、西南部分省区,与益母草主要区别点为花冠白色,商品中少见,习惯上不供药用或少用。

细叶益母草(Leonurus sibiricus L.)产于内蒙古、河北、山西、陕西等地,主要区别点在于茎顶端的叶3全裂或深裂;花冠较大,长18~23mm,外被较密的长绒毛,下唇比上唇短。

在部分地区作益母草药用,此种亦有白花变种。

大花益母草(Leonurus macranthus Maxim.)产于辽宁、吉林及河北北部,叶裂片宽大,叶缘有缺刻或粗锯齿,花冠长2.5~2.8cm。

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