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生物化学读书报告


23 干扰的消除 . 先选择2 n 0 2 m的波长进行测定, 再用20 6n m 的波长进行校正, 可消除大多数的无机盐类的干扰; 而O - C 互和 H H , 一 C O 3 O 的干扰则通过在待测液中 加入盐酸溶液来去除; 至于蔬菜中大量的有机物质, 沸水浴能使大部分有机物质沉淀分层, 过滤后再加 活性炭处理,可基本去除蔬菜中有机物质的干扰。 24 标准曲线系列测定结果 . 以标准系列浓度。 为参比,分别测定各浓度标
n U n u n U

, 、 凡产 ,. .

1. " )用1 00 L 1。 c m g - m石英比 色皿分别于波长20 2
n m和20 6n m处测其吸光度, 绘制标准曲线并分别
2 0 0 2 5 2 0 1 2 0 2 2 0 3 2 0 4 2 0 5 2 0 0 1 2 5 2 2 5 3 2 5 4 2 5 5 2 5 6
( st e o n F ti r Fj n dm o gi l r Si c F hu F j n 503 C i ) i to Siad rl e, i A aey A r u ue e e, zo , u a 301, h a I tu f l e iz n ua c f c t c n s u i n A s at F e d o vgt l f m re w r ue a t t eis Brx bi g t w r aot bt c: i k s ee b s m kt e d e m t a . a ad l w e e dpe r v i f a e r n o a e s s a r l o n oi a r e d s n tm k et c. e ft t n at e bn te rt cnet h f i w s et dt mnd da o e r tA t ir i b cv cro , n ae t i te d d c y e i b ul a x a f r a o y i a l h i t o n n l u a i l e r e y - r w vl gh - et poo e im to. r oe w s %一15 i R D 04%一09 0 hr ae nt U s c ohtm tc hdT e vr a 12 e V p r r e h e y 0 c 0 0 t S o . o h f 6 w . o e 7 T e . w s s n i n d f ec cm ae wt te m to . e to hs n ld te i dt mn- a n i ic t e ne prd h G e d T m hd be ap e t h rp e r i o fa i r g f o i h B h h e a e p i o a d e a t n n rt cnet ag bt o vgtb s i o ia o t i l e c f eal . o f e n n t r a h e e
F j n ra o A r utrl ec u a Junl gi l a Si e i o f c u cn s
福建农业学报 2 ()15 2 ,05 02 :2 ^1720
文章编号 :10 一08 (05 0一02一0 08 34 0 ) 15 3 2 2
紫外分光光度法快速测定蔬菜中的硝酸盐含量
水定容至刻度。以上试剂均为分析纯;水为去离子 水,不含硝酸盐及亚硝酸盐。 14 试验材料 . 供试蔬菜为市售新鲜春菜、 花瓶菜、 天津白、 芥 菜、菜心。 15 工作曲线的绘制 .
n m处,但由于在该波长处各种无机盐等干扰离子 的吸收值相对较小, 故选择20 2n m的波长, 使测定 结果准确可靠。 另外, 从图1 还可看出, 标准硝酸盐 水溶液的光谱曲线在波长20 6n m处, 硝酸盐的吸光 值儿乎接近于。 说明硝酸盐在20 , 6n m处没有吸收, 这样待测液在 20 6n m处的吸收值就是除硝酸盐以 外的其它干扰物质的吸光值,应予扣除。因此, 选 择以20 20 2n m和 6 n m处的吸光值之差△ ( A= A A
它几种方法则需要精密仪器, 测定条件较为严格 , 亦
测定中有机质的校正若仍采用土壤中有机质的校正 波长25 无法完全校正蔬菜中复杂得多的有机 7n m, 成分,从而导致测定结果偏高。为此,本试验主要 针对紫外分光光度法在蔬菜硝酸盐含量测定中的不 足, 经过反复试验, 对其进行改进, 采用加硼砂、 沸 水浴提取、活性炭过滤后直接利用双波长紫外分光 光度法测定蔬菜硝酸盐含量,取得较理想的效果。
22 水浴时间的选择 .
试验中, 称取5 份同等质量的匀浆, 分别于沸水 浴中加热。 , , , mn 、5 1 1 2 i,以考察不同水浴 0 5 0 时间对蔬菜硝酸盐提取的影响。 结果 ( )表明, 表1 在沸水浴中加热 1 m n 提取液在紫外区所测得的 0 , i A A最大,故选择水浴时间为1 mn 0 . i
扰[1而蛋白 4, . 5 沉淀P中的Fe, 在波长20 d e Z' + n + 2n m
处有较强的吸收,对测定造成严重的背景吸收,使 样品的空白值增加, 仪器分析有一定的难度; 此外,
12 主要仪器 . U S2 0 0 紫外一可见分光光度计; V一P0 高速组 织捣碎机 (0 ^1 00 mn';分析天平 1 00-2 r i ) 0 0 ・ - ( 感量001 水浴锅。 . g 0 ) ;
K y rs U - et p o m tc to ; p -e r i t n V gt l ;Nt t e w d : V s c oh t e im hd R i dt mn i ; e b s ia o p r o r e a nxa h n
关键词: 紫外分光光度法; 快速测定;蔬菜;硝酸盐 中图分类号 :S 2 1 3 文献标识码 : A
R pd emiai o i t c tn i eea ls V seto h tmer tr n t n ntae ne t vgtbe b U -p crp oo ti meh d ai d e o f r o n y c to
速、灵敏、可靠,且对土壤中硝态氮的测定也取得 了满意的结果[,但该方法应用于蔬菜硝酸盐的测 3 1 定,结果会偏高,主要原因是 :蔬菜中含有大量的 色素、蛋白质等有机干扰物质,测定中常采用活性 炭吸附和使用多种沉淀剂沉淀蛋白质来去除其干
在波长20 2n m和20 6n m处分别测定溶液的吸光
值,再根据两个吸光值之差,从标准曲线上查得相 应浓度, 计算样品中的硝酸盐含量。
波长 (m n)
计算△ (2 A,. A 2 , A。 一 )
16 待测液配制 . 把新鲜蔬菜洗净,晾干表面水分,用四分法取 可食部分,切碎,按比例加入一定量的水,用捣碎
图1
60 ・ - O 溶液的吸收光谱 . L ' 3 m g N
o p f r o o Fg 1 A sr t n etu o nt t slt n i. bopi s crm i ae ui
表 1 不同水浴时间对蔬菜提取液吸光值的影响
T be E fc o d frn w t -ah e asrec al 1 fet i eet e bt t o bobny f f ar i n m
i vgtbe tat g ui slt n n e l e rci o o e a x n
1 材料与方法
11 方法原理 . 在弱碱性条件下, 用热水从样品中提取硝酸根 离子, 利用硝酸根离子在波长20 2n m处有强烈的吸 收, 而在波长20 6n m以上吸光值近乎为零的特点,
不适宜作常规监测分析。紫外分光光度法广泛用于
环境水样中的硝酸盐含量测定C, 2 该方法简单、 1 快
A2 2)求得蔬菜溶液中硝酸盐含量。 2-A6 0 o
n 』 n U n u 卜1
孟 . , 0 0 n,
分别准确吸取硝酸根标准贮备液。 05 10 、 ., , .
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亡 , 月

15 20 30 40 50 于8 0 容量瓶中, . . . . . l 个5 m , , , , m l 用水定容至刻度,摇匀 ( 此标准系列溶液分别含 N 浓度为:0 10 20 30 40 60 80 O , , , , , , , . . . . . .
入20 容量瓶中, g 0m l 加2 活性炭, 用水定容摇匀
后, 过滤, 得清亮无色提取液 ( 此为待测溶液) 随 。 批同时做空白对照样品。 17 样品测定 .
时 卿
吸光值
( A) 么

5 1 0 1 5 : 。
取待测液 -5 1 m 于 5 m 容量瓶中,加 1 l 0 l m l 11 : 盐酸溶液, 用水定容。摇匀后于紫外分光光度 计上, 以样品空白溶液调零, c 用1 m石英比色皿于 20 2n m处测定吸光度, 再于20 6n m处测定吸光度,
收稿日 期:20-0-3 04 5 1 作者简介:蔡顺香 (91 ,女,实验师,从事农业分析测试工作。 17一)
16 2
福建农业学报
第2 卷 0
13 试剂及其配制 .
饱和硼砂溶液: 称取5 g 0 硼砂溶于1 m 热 00 0 l 水中; 活性炭 ( 粉末状) 1 1 ; : 盐酸溶液; 0 标准 N3 - 贮备液 ( 含硝酸根离子10 L 1: 0m g・ -) 准确称取经 10 烘干至恒重的硝酸钾013 g 用水溶解, 1` C .6 1 , 加 几滴氯仿防腐, 然后转移至1 m 容量瓶中, 00 0 l 用
机制成匀浆。 称取匀浆样1^2 g视样品硝酸盐含 0 0 ( 量多少而定, 精确到001 扣除所加水量)置于 . g 0 , ,
20 烧杯中,加入5 饱和硼砂溶液和约8 m 0m l m l 0 l 热水 (0 0 , 7-8 " 于沸水浴中加热1 mn 不断搅 C) 0 , i 拌, 静置2 , mn 此时可观察到溶液分层, i 大部分有 机物质沉淀下来。冷却,将溶液及沉淀残渣一并转
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