• 第二次过滤，合并二次液，在旋转蒸发器 中 60℃ 蒸馏至近干。加入一定量丙酮除杂， 卵磷脂即沉淀出来，过滤，滤饼用丙酮冲 洗几次，至到冲洗液无色，即得到卵磷脂 粗品，在真空干燥箱中干燥后，充入氮气 低温保存。
柱层析分离纯化卵磷脂 • 将适量的柱硅胶(60～100目)用氯仿打成浆状， 湿法装柱，准确称量卵磷脂粗品(EPC)2.63g用尽 可能少的氯仿溶解后，倒入柱子内。用不同浓度 梯度的氯仿/ 甲醇混合液连续冲洗(氯仿:甲醇分别 用40:1、35:1、30:1、25:1、20:1、15:1、10:1、 5:1、1:1、2:3、1:2、1:3)，每个浓度以100ml 总 量分批加入，当加入氯仿/ 甲醇浓度为1:1 时，以 后的溶液加入量根据需要变大，即洗脱液梯度变 化要慢些。
• 在乙醇浓度大于 95%前，提取剂的性质和 卵磷脂的性质越来越相似 ,使卵磷脂在其中 的溶解度增加.但当用无水乙醇时 ，提取剂 的极性过强 ,造成卵磷脂溶解度降低,所以选 用 95%的乙醇提取最好。
项目器材与试剂
仪器：电热恒温水浴；强力电动搅拌器； 旋转蒸发器；真空干燥箱；薄层色谱扫描 仪；冻干机 试剂：无水乙醇、95% 乙醇、乙醚、丙酮、 氯仿、甲醇、钼酸铵、硅胶 G 、羧甲基纤 维素Na （ 以上试剂均为分析纯） 鸡蛋
蛋黄卵磷脂的粗提 • 首先将蛋黄均质放入带塞瓶中备用，称取 10ml均质蛋黄放入洁净的带塞三角瓶中， 加入两倍体积的95%乙醇，混合搅拌，离 心5min（3000r/min)；取上清液，然后加入 1/3 乙醇用量的乙醚，搅拌15min 后，静置, 接着过滤；滤渣进行二次提取，加入乙醇 与乙醚的混合液(体积比为3:1)，无需搅拌 静置浸渍；
• 根据柱中色带及薄层层析不停的检测收集 液的结果，分开收集各种不同成份的洗脱 液，把出现单一斑点，且在同一块薄层板 上与标品卵磷脂有同一R f 值的洗脱液收集 在一起，然后旋转蒸发浓缩成膏状，再在 冻干机上干燥，即得我们所期望的纯白色 的卵磷脂精品，充入氮气低温保存。
卵磷脂的检测 • 利用薄层色谱为主要的定性检测手段，再利用薄 层扫描仪，对所制得的卵磷脂样品进行定性和定 量检测。将一定量的硅胶G与一定量的浓度为 0.4%～0.5%的CMC-Na 溶液调匀制薄层板，根 据不同的要求在活化好的板上点样。 展开溶剂为 氯仿:甲醇:水(65:25:4, V/V)。采用钼酸铵为显色 剂，在130℃左右烘干显色。对卵磷脂标准品和 样品的对应薄层斑点作光谱扫描图，确定以50nm 为测定波长，灵敏度x=1，狭缝宽1.2×1.2，线性 化Sx=3，作反射法锯齿扫描。
卵磷脂的ห้องสมุดไป่ตู้产
项目原理
• 卵磷脂可在植物的水化油或动物的脑和蛋 黄中提取 ,尤以蛋黄中含量最高. • .卵磷脂不溶于极性溶剂 ,尤其是丙酮 ,故常 以丙酮作为卵磷脂的沉淀剂. 丙酮可除去卵 磷脂中的油，脱去多余的水,同时因细胞结 构成份的破碎使蛋白质与脂质结合的某些 化学键打开，促使某些结合酶释放到溶液 中
项目步骤概述
• 以鸡蛋的卵黄为原料，采用含水乙醇与乙 醚提取，通过丙酮脱水去油，得到粗品卵 磷脂； • 进一步以氯仿/ 甲醇为洗脱液，硅胶柱层析 法分离纯化自制的粗品卵磷脂，得到高纯 度的纯白色固体卵磷脂。 • 由薄层色 谱定性检测，仅含一个斑点；用 薄层扫描仪定量检测纯度大于97.4%
项目步骤