• 肺炎链球菌等苛养菌生长极好 • 在国外一般加抑菌剂作为培养阳性球菌的选择性培养基用
• 供分离葡萄球菌或其他营养要求较高的细菌及进行培养、鉴定
9
α溶血、β溶血、γ溶血
10
肺炎链球菌在血平板上的生长
11
化脓性链球菌在血平板上的生长
12
金黄色葡萄球菌的β 溶血
13
化脓性链球菌的β 溶血
14
溶血
1 PB0123A/F 2 PO0480B
哥伦比亚血平板 胰蛋白胨大豆琼脂平板（三层无菌包装、辐照）
3
4
PO0155A
PO8060A
营养琼脂平板
玫红酸中国蓝乳糖琼脂平板 万古霉素巧克力琼脂平板
5 PB8001A/F 6 PO0152A 7 8 PO0262D PO0479D
MH平板
胰蛋白胨大豆琼脂接触平板（三层无菌包装、辐照） 卵磷脂吐温胰蛋白胨大豆琼脂接触平板(三层无菌包装、辐照）
乳糖（－）：无色或浅褐色菌落
24
SS琼脂平板
• PO5022A 90mmX10 PO5022F 70mmX10 • 分离沙门氏、志贺氏菌属细菌
• 强选择性培养基 • 沙门氏、志贺氏半透明菌落 • 大肠杆菌呈红色菌落
• 产硫化氢的菌属可形成黑色中心 • 避光保存
25
中国蓝琼脂平板
• PO8060A 90mmX10 PO8060F 70mmX10 • 弱选择性培养基 ，抑制阳性球菌的生长
7
血琼脂平板
• 均匀红色，无斑点，无裂纹，无血和纤维凝块 • 供分离葡萄球菌或其他营养要求较高的细菌及进行培养、鉴定 • 传代培养
• 观察溶血 α溶血、β溶血、γ溶血
• 卫星试验 • CAMP试验
8
哥伦比亚血琼脂平板
• 均匀红色，无斑点，无裂纹，无血和纤维凝块 • 传代培养
• 观察溶血 α溶血、β溶血、γ溶血 • 卫星试验、协同溶血（CAMP）试验
3
DCM Top 10
1
2
CM0337B CM0309B
MH琼脂
WL营养琼脂
3
4
CM0657B
CM0331B
橙血清琼脂
哥伦比亚血琼脂基础
5
6
CM0325B
CM0651B
平板计数琼脂
普通啤酒琼脂
7
8
CM1055B
CM0003B
阪崎肠杆菌显色琼脂
营养琼脂
9Байду номын сангаас
10
CM0115B
CM0041B
3号麦康凯琼脂
• 用于分离沙门氏、志贺氏菌属细菌 • 沙门氏、志贺氏菌属细菌半透明状
• 大肠菌群细菌呈蓝色，深蓝色核心 • 中国蓝碱性无色，酸性蓝色
• 玫红酸碱性时呈红色，酸性时黄色
• 成品PH7.4淡紫红色，过高呈鲜红色，过低暗紫色
26
分格平皿培养基
• 分格平皿培养基专为一个标本同时接种两种不同的培养基来分离各种致
32
苛氧菌分离现状
• 不具备苛氧菌分离的培养基
• 未建立标本送检指南，送检标本与接种标本相隔时间太长
• 无CO2培养环境 • 不能辨别菌落 • 无鉴别试剂
33
平板培养基出水
• 出水问题是困扰成品培养基的严重问题，不仅严重影响品质，且是造成 培养基污染的罪魁祸首 • 最主要的原因为存放过程中的温度变化造成平板培养基冷热波动而凝结 出水 • 只能尽量减轻，尚无法完全避免 • 尽量减少平板培养基的存货期
• 平板培养基出水
• 平板培养基污染 • 平板培养基冷冻
平板培养基出血水
平板培养基溶血，发黑 平板培养基琼脂靠近冰柜壁的一侧或两侧变白 平板培养基琼脂表面不平，有裂纹
30
平板培养基运输保存注意事项
• 平板培养基保存于2～10℃冷库或冰箱内，避光存放。避免靠近冷库或冰 箱的壁、门、风机口等温度不稳定的部位。 • 平板培养基运输和存放时——倒置（标签正置）。
• 平板培养基运输时置于泡沫箱内并加冰块，冰块用吸水纸或废报纸包三 层以上，避免阳光曝晒，避免剧烈振动。
• 尽量减少公司和代理商的存货期。
• 不要用冰柜保存。
31
血平板α、β溶血，苛养菌检出
• 金黄色葡萄球菌的某些株溶血不明显
• 溶血观察与个人经验有关
• 协同溶血试验 • 苛养菌与标本的采集、运输、接种、培养辨认等因素密切相关
34
平板培养基污染
• 运输保存不当，造成出水是平板培养基污染的主要原因
• 动物血污染造成平板培养基污染
• 杀菌失败造成平板培养基污染 • 除菌失败造成平板培养基污染 • 生产环境不合格引起平板培养基污染
• 生产操作引入平板培养基污染
35
OXOID一次性平板培养基
36
9
10
PO0161F
PO0495F
沙保氏氯霉素琼脂平板
3号麦康凯琼脂平板
6
血琼脂平板
• 血琼脂平板 PB0115A PB0115F
90mmX10 70mmX10
• 哥伦比亚血琼脂平板 PB0123A 90mmX10 PB0123F 70mmX10 • 厌氧血琼脂平板 PB8111A 90mmX10 PB8111F 70mmX10
PB8013A 90mmX10 PB8013F 70mmX10 • 巧克力GC选择性琼脂平板（培养淋球菌）
添加复合抗生素，用于生殖道、尿道标本中分离淋球菌
PB8136A 90mmX10 PB8136F 70mmX10
19
巧克力琼脂平板原理
• 特殊的变色工艺破碎血细胞，释放出Ⅹ因子、Ⅴ因子，破坏血中不稳定的 抑制细菌生长的成分，保留热稳定的营养物质 • 补加完整的氨基酸及生长因子 • 模拟细菌最有利的生长缓冲系统
• 平板培养基污染
28
血平板颜色深 ，发黯，发黑
• 色深问题也就是效期问题
• 羊血红细胞也会存在个体差异
• 同一批产品由于前期与后期受热时间不同也会出现颜色差异 • 另外运输保存不当也会造成未达到效期时颜色会变深 • 存货期长，保存条件不当
• 生产操作失误
29
运输保存不当危害
• 平板培养基琼脂脱落
• HTM(嗜血杆菌)
• MH+羊血(肺炎链球菌和其它链球菌) • 真菌药敏
23
3号麦康凯琼脂平板
• PO0495A 90mmX10 PO0495F 70mmX10
• 均匀淡红色，无斑点，无裂纹
• 选择性分离肠杆菌和大肠埃希菌，用来检测不同标本中的肠杆菌 • 通过颜色变红来检测乳糖发酵 乳糖（＋）：粉红到红色菌落
病菌而设计
• 只需一次接种即可完成，方便、省时省力、且便于编号及对照。
哥伦比亚血琼脂/伊红美蓝琼脂 哥伦比亚血琼脂/中国蓝玫瑰红琼脂
哥伦比亚血琼脂/3号麦康凯琼脂
27
平板培养基主要问题
• 血平板颜色深 ，发黯，发黑
• 运输保存不当危害
• 平板培养基运输保存注意事项 • 血平板α、β溶血，苛养菌生长 • 平板培养基出水
应用：在链球菌中，B群链球菌、C群、F群都可出现CAMP试验阳性，故可 作为鉴定依据之一。其它细菌也可出现CAMP试验阳性，比如李斯特菌，摩 根菌等。
17
协同溶血（CAMP）试验
18
巧克力琼脂平板
• 巧克力琼脂平板（普通）
不加抗生素，用于无菌标本的培养、分离、鉴定(脑脊液、关节液、穿刺液等)
沙保氏葡萄糖琼脂
4
Oxoid制成培养基
医院常用品项：
• 滋养性：营养琼脂、血平板、巧克力平板
• 肠道菌：麦康凯、中国蓝玫红酸、 伊红美蓝、 SS平板 • 分隔平板：血琼脂/麦康凯琼脂、
血琼脂/中国蓝玫红酸琼脂等 • 真菌：沙保氏葡萄糖
• 显色：念珠菌显色培养基、 尿路感染显色培养基
5
PPM TOP10
PB8124A 90mmX10 PB8124A 70mmX10 • 万古霉素巧克力琼脂平板（培养嗜血杆菌）
添加万古霉素，用于痰标本中流感嗜血杆菌的检出
PB8001A 90mmX10 PB8001F 70mmX10 • 巧克力双抗琼脂平板（培养脑膜炎奈瑟氏菌）
添加万古霉素和多粘菌素（双抗），用于鼻咽部标本脑膜炎奈瑟氏菌的检出
金黄色葡萄球菌 （β溶血）
β溶血性链球菌
肺炎链球菌 （α溶血）
15
卫星试验
16
协同溶血（CAMP）试验
• 原理： B群链球菌能产生CAMP因子，可 促进葡萄球菌的B-溶血素溶解红细 胞的活性，因此在两菌（B群链球 菌和葡萄球菌）的交界处溶血力增 加，出现矢形（半月形）的溶血区 。
方法：先以产B-溶血素的金黄色葡萄球菌划一横线接种于血琼脂平板上，再 将被检菌与前一划线作垂直划线接种，两线不能相交，相距0.5～lcm，于 37℃培养18～24h，观察结果。每次试验都应设阴性和阳性对照。
常用培养基介绍
临床检验常用的成品培养基
• 分离用培养基
• 鉴定用培养基 • 药敏用培养基 • 院内感染控制用培养基 • 血培养
• 显色培养基
2
Oxoid干粉培养基
• CM：基础干粉，含有丰富的碳源、氮源、生长因子、选择性抑制因子，
显色剂
• SR：添加剂，通常包装10小瓶/盒，每瓶通常可配制500ml或225ml添加 的培养基，成分通常是抗生素和热敏感的营养成分
• 均匀的巧克力色外观
• 合理的抗生素设计，能够抑制标本中的大部分杂菌，提高淋球菌的检出率
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流感嗜血杆菌在巧克力色血平板上的生长
21
淋球菌在巧克力色血平板上的生长
22
MH琼脂平板
• PO0152A 90mmX10 PO1043SA 140mmX5
• 无色或微黄色