课题：4.1.1蛋白质的分离与纯化方法
生物成分的分离与测定技术导学案
一、学习目标：
二、知道蛋白质的分离常用的细胞破碎的方法，蛋白质抽提方法，掌握蛋白质的分离与纯化方法。

二、知识构成：
1．蛋白质的分离常用的细胞破碎的方法有：根据蛋白质的不同特性，分别可选择哪些抽提方法？、
、
蛋白质的纯化主要是根据之间以及之间在、、、等方面存在的差异进行的。

常用的方法包括、、等。

2．用电泳分离纯化蛋白质时，泳动速度主要取决于，即。

此外，、等因素对泳动速度也有影响。

3．血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的实验的基本步骤包括：、
、、、、、、、、。

4．浸泡醋酸纤维薄膜前，用笔做记号是在(填“光泽面”或“非光泽面”)；点样是在(填“光泽面”或“非光泽面”)；平悬薄膜时，(填“光泽面”或“非光泽面”)朝上。

5．经电泳后，可以在薄膜上看到条色带，它们分别是、
、、、。

'6．植物芳香油的提取方法有和等。

三、学法和自检：本节内容主要通过看书、分析蛋白质的提取、分离、纯化的不同方法。

动手试一试：
[1]盐析法分离蛋白质的原理是( )
A．破坏蛋白质的一级结构B．破坏蛋白质的二级结构
C．破坏蛋白质水化膜而改变溶解度D．使蛋白质发生变性沉淀
[2]利用透析法将蛋白质和其他小分子物质分离的原理是( )
A. 利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性B．利用蛋白质分子的水溶性
C．利用蛋白质分子的胶体性D．利用蛋白质分子所带电荷
[3]．下列关于血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验的说法不正确的是( )
A．实验所用的巴比妥缓冲液的pH为8．6 B．点样是在薄膜的光泽面上进行的
C．实验后可以得到五条色带D．整个实验最关键的步骤是点样
[4]．有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pH分别为4．5、5．2、6．6、7．2，电泳时欲使其中三种泳向正极，则缓冲液的pH应该是( ) A．2．0 B．5．0 C．6．0 D．7．0
四、、学习小结和课外作业：
1、学习小结：
2、上本作业：列举蛋白质粗提取时次报的破碎、蛋白质的抽提、纯化方法。

3、课本：64页1、2、3、
4、5
4、补充练习：
8．请根据血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验回答下列问题：
(1)实验所用的主要试剂有：
(2)实验所用的缓冲液的pH为，因为。

(3)点样应点在薄膜的面，方法是用在血清中蘸一下，在离薄膜一端cm处
轻轻按下，随即提起。

(4)实施电泳时，所用电压为，膜宽电流强度，时间。

(5)实验结果时，薄膜上呈条色带，分别代表。