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天然药化实验报告
篇一：天然药化实验
实验一黄柏中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定（10学时）【目的要求】
1.掌握黄柏中提取盐酸小檗碱的原理和方法。

2.熟悉盐酸小檗碱的化学性质和鉴定方法。

3.掌握渗漉法、盐析法、结晶法的基本操作方法。

【实验原理】
黄柏为芸香科(Rutaceae)植物黄皮树（phellodendronchinenseschneid）及黄柏树(phellodendronamurenseRupr.)的干燥树皮。

树皮中含有小檗碱(berberine)、木兰花碱(magnoflorine)、黄柏碱(phellodendrine)等多种生物碱及内酯、甾醇等，其中以小檗碱为主要药效成分(中华人民共和国药典，2000)，含量为1.4%-5%(川黄柏含量较高)。

其性寒、味苦，具有清热燥湿、泻火解表、退虚热之功效。

1.小檗碱(berberine)异名黄连素，分子式
[c20h18no4]+，分子量336.37，黄色针状结晶。

作为临床上一种常用的广谱抗菌药，小檗碱主要用于菌痢、胃肠炎、痈肿等细菌性感染。

现代研究证明小檗碱有抗肿瘤、抗心率失常、降压、降血糖等作用，在临床上有越来越广泛的应用，需求量日益增加。

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2.溶解性：能缓缓溶于冷水中（1:20），微溶于冷乙醇（1:100），易溶于热水和热乙醇，微溶或不溶于苯、氯仿和丙酮，硝酸盐极难溶于水，盐酸盐微溶于冷水（1:500）但
较易溶于沸水，硫酸盐和枸橼酸盐在水中溶解度较大（1:30），盐酸小檗碱为黄色结晶，含2分子结晶水，220℃时分解并
转变为棕红色小檗红碱，285℃时完全熔融。

3.小檗碱为季铵碱，其游离型在水中溶解度较大，其盐酸盐在水中溶解度较小。

利用小檗碱的溶解性及黄柏中含黏液质的特点，先将药材用石灰水润湿，使药材吸水膨胀，小檗碱游离，同时可使黄柏中含有的粘液质沉淀。

用水渗漉法提取小檗碱，再加盐酸使其转化为盐酸小檗碱沉淀析出，结合盐析法得到盐酸小檗碱。

【实验步骤】
1.提取称取黄柏粗粉100g置大蒸发皿中，加入适量石
灰乳搅拌均匀，放置溶胀20min，加入6倍量的饱和石灰水（或1%ca(oh)2溶液）浸泡30min后装入渗漉筒内，以5～6mL/min速度渗漉。

收集渗漉液500～600mL即可停止渗漉。

2.取上项提取液，加入石灰乳调ph11～12，静置沉淀，脱脂棉滤过，滤液用浓盐酸调ph2～3，再加入溶液量
6%-8%nacl，搅拌使溶解，溶液静置过夜，析晶，滤取结晶，得盐酸小檗碱粗品。

3.精制将盐酸小檗碱粗品放入25倍量沸水中，于水浴上加热使溶解，趁热滤过，滤液加浓hcI调ph2左右，放置1-2小时，滤取结晶，纯化水洗至ph4，80℃以下干燥，得精制盐酸小檗碱。

4.盐酸小檗碱的鉴别
（1）取盐酸小檗碱少许，加稀硫酸2mL溶解后，加漂白粉（或次氯酸钠）少许，即显樱红色。

（2）取盐酸小檗碱少许，加稀硫酸2mL使溶解，加浓硝酸1～2滴，即显樱红色。

（3）取盐酸小檗碱约0.05g，溶于5mL热水中，加入10%naoh溶液2mL，显橙色。

溶液放冷，加入丙酮约0.5mL，放置，有黄色丙酮小檗碱结晶析出。

【基本操作注意事项】
1.实验原料尽可能选用小檗碱含量较高的川黄柏，或小檗碱含量较低的关黄柏，后者粘液质较多过滤麻烦。

2.加入氯化钠的目的是将小檗碱转化成盐酸小檗碱并
利用其盐析作用，降低其在水中的溶解度。

其用量不宜过少，否则盐析效果不好，收率过低。

3.在精制盐酸小檗碱时，因为盐酸小檗碱几乎不溶于冷水，放冷易析出结晶，所以水浴加热溶解后，要趁热滤过，防止盐酸小檗碱在滤过时析出结晶，使滤过困难，产量降低。

【思考题】
1.怎样从黄柏中提取分离盐酸小檗碱？原理是什么？
为什么加石灰乳？2.通过从黄柏中提取盐酸小檗碱，试述药材粉碎度等对提取的影响。

3.试析生物碱的分离方法实验二槐花米中芸香甙的提取、精制和检识（12学时）
一、槐米中芦丁的提取
槐米系豆科槐属植物（sophorajaponicaL．）的未开放花蕾。

味苦性凉、具清热凉血、止血之功。

常用于治疗多种出血症：肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。

槐米常炒炭应用。

槐米的主要化学成分为芦丁，亦称芸香苷，其含量可达12～16％，其次含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。

芦丁广泛存在于植物界，已发现的含芦丁植物至少在70种以上，其中以槐花米和荞麦叶（含量约8%）含量较高，可作为提取芦丁的原料。

药理实验证明芦丁具有减少毛细血管的通透性作用，临床上主要用为防治高血压病的辅助治疗药物。

芦丁可降低毛
细血管脆性和调节通透性。

临床上用作毛细血管脆性引起的出血症。

此外，芦丁对于放射线伤害所引起的出血症亦有一定作用。

[目的要求]
1、通过芦丁的提取与精制掌握碱－酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。

2、得到芦丁粗品。

[实验原理]
芦丁（rutin）：c27h30o16·3h2o，浅黄色针状结晶，mp174～178℃（含三分子水）；188℃（无水物）。

难溶于冷水（1：8000～10000），可溶于热水（1：180～200），热甲醇（1：10），冷甲醇（1：100），热乙醇（1：60），冷乙醇（1：650）；难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。

槲皮素（quercetin）：c15h10o7·2h2o，黄色结晶，mp313～314℃（2分子结晶水），316℃（无水物）。

能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。

芦丁为黄酮苷，分子中具有酚羟基，显酸性，可溶于稀碱液中，在酸液中沉淀析出，可利用此性质进行提取分离。

利用芦丁易溶热水、热乙醇，较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。

芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及
葡萄糖、鼠李糖，依此进行制备槲皮素。

芦丁的结构如下：
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[仪器与试剂]
仪器：电炉、研钵、石棉网
玻璃仪器：抽滤瓶、布氏漏斗、玻璃棒、1000ml烧杯、500ml烧杯、漏斗试剂：槐花米、饱和石灰水溶液、盐酸、ph试纸其他：滤纸
[实验内容]
于1000ml烧杯中加入500ml饱和石灰水，煮沸2~3min 后，称取50g槐花米（粗粉），加热微沸30min，注意添加水保持原体积并维持ph8~9，趁热用脱脂棉过滤，滤渣再加入300ml饱和石灰水，维持ph8~9，煮沸10min，趁热用脱脂棉过滤，合并滤液，稍冷（60~70℃），用浓hcl调至4~5，放置1h使沉淀完全，抽滤，用水洗3~4次，置80℃烘箱低温干燥得淡黄色粗制芦丁，称重，计算产率。

注意事项：
（1）开始用沸水提取。

（2）提取液要趁热过滤。

（3）提取时要不断补充水分。

500ml
饱和石灰水，加热，并维持ph8～9
滤液药渣
10分钟，维持ph8～9
×）ph至4～5次
沉淀
低温（80℃）干燥
粗品
注意：加入饱和石灰水溶液既可以达到碱溶解提取芦丁的目的，又可以除去槐花米中大量多糖粘液质。

也可直接加入150mL水和5gca(oh)2粉末，而不必配成饱和溶液。

[思考题]
1、提取液为什么要趁热过滤？二、芦丁的精制和酸水解
[目的要求]
1、芦丁粗品重结晶，得到芦丁精品；
2、芦丁酸水解，得到苷元槲皮素精品及糖水解液。

[实验原理]
1、芦丁可溶于热水，难溶于冷水。

其分子结构中具有较多的酚羟基，显弱酸性，在碱中易溶解，而在酸性条件下易析出沉淀。

故可采用碱提酸沉法提纯芦丁。

2、利用芦丁可被稀酸水解，生成苷元和糖。

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ho
oh
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[实验内容]
1、将芦丁粗品置500ml烧杯中，加适量（按芦丁：水＝1g：200ml）蒸馏水，于石棉网上加热溶解，趁热抽滤。

滤液静置30min，即析出沉淀。

抽滤，用少量蒸馏水洗涤沉淀2~3次，抽干，于70~80℃干燥1小时，即得精制芦丁。

称重，计算产率，测mp（文献值为174~178℃）。

2、取芦丁粗品1g，研细，置于250ml圆底烧瓶中，加2%h2so4溶液200ml，于直火上加热回流30min，析出的黄色沉淀为槲皮素，放冷，静置，抽滤，滤液保留作糖部分的鉴定。

沉淀经水洗后再用95％乙醇重结晶1次，得黄色针状结晶，于70~80℃以下干燥，即得精制槲皮素。

计算收率。

芦丁粗品
水（1：200）加热溶解趁热抽滤
静置，抽滤，干燥，计算收率。