植物胚培养
二、 胚培养的意义
1.克服远缘杂种的不育性
远缘杂交,在杂种幼胚发生败育之前取出, 进行离体培养,获得杂种植株。
2.打破种子休眠
山楂:自然条件9个月萌发,
胚培养48小时萌发。
在休眠期,取出,离体培养,产生植物。
3.提高种子发芽率
植物胚珠发育不完全,发芽率极低,胚培养, 提高发芽率
4.克服珠心胚的干扰
幼胚培养:在无菌的条件下,将未成熟胚分离 出来,进行培养发育,以至形成幼苗的过程。
1933年Tukey进行桃、梨 幼胚培养获得成功
1、幼胚培养过程:
取子房 常规表面消毒 解剖镜下,取胚珠、去珠被、取出完整
幼胚。 固体培养基培养
植物胚胎发生过程: 原胚-球形胚-心型胚-鱼雷胚-子叶胚
胚发育视频
牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖
牡丹成熟胚的离体培养
以‘凤丹白’成熟胚为外植体 结果表明: (1)打破成熟胚休眠最适宜的预处理是4℃沙藏。 (2)成苗培养时的最佳的培养基是MS+6-
BA0.2mg/L+IBA1.0mg/L。 (3)最适宜的生根培养基是MS+IAA1.0mg/L 。
二、幼胚培养方法:
3、胚柄
A 在幼胚培养中,带有胚柄结构有利于幼胚 的生长。 B 但一般较难与胚一起分离出来。
4、幼胚的发育方式:
(1)胚性发育:幼胚接种培养基,发育成成熟胚.
(2)早熟发育:幼胚接种培养基,不进行胚性发育,
萌发成幼苗.
(3)产生愈伤组织:幼胚接种培养基,发生细胞增
殖,形成愈伤组织.
黄瓜杂种幼胎培养 黄瓜杂种幼胎
3.成熟胚培养的程序
(1)选果实或种子作为外植体 (2)表面消毒 (3)无菌条件下切开果实,取出种子 (4)胚的剥离
(5)培养基培养:MS、White培养基。
4.成熟胚培养条件下
(1)因成熟胚本身含有较多的营养条件,对培 养基要求不高
(2)只含有大量元素和糖的培养基上,便可萌 发成苗
(3)多数植物成熟胚的生长以12h/天光照为宜。
➢ 渗透压的保持对于幼胚培养相当重要。 最适蔗糖浓度随着胚的发育时期而降低。
C、植物激素的作用:
➢ 成熟胚一般不需要外源激素即可萌发。但 激素能促进休眠胚的萌发。
➢ 幼胚需要外源激素,应保持外源激素与内 源激素的平衡。过低则不能促进生长,过 高则易导致幼胚脱分化形成愈伤。
D、天然提取物及某些蛋白制品
胚的发育
一、成熟胚培养方法
1.成熟胚培养: 在无菌的条件下,采用人工的方法将成熟胚分
离出来,进行培养,让其进一步生长发育,以至 形成幼苗的过程。
1890年营养液研究离体胚培养
18世纪,胚种植在土壤中,萌发.
1904年Hanning进行萝卜 和辣根菜成熟胚培养
2.成熟胚培养的目的
(1)研究种子萌发时胚乳与胚的关系 (2)胚乳对幼苗初期生长的营养作用 (3)研究成熟胚生长发育过程的形态建成 (4)各种生长物质对形态建成的影响 (5)打破种子休眠,缩短育种周期
胚状体可以制成人 工种子,便于运输
和保存!
质量
合子胚 萌发率高,质量好
胚状体 萌发率低,质量差
来源 受精卵
胚\体细胞
胚柄 形态
变异率
有,明显 固定,体积相对较小
低
即使有也不明显
复杂,常有两个以上的子 叶,体积较大
高
人工种子视频
第二节 胚培养的方法
主要介绍
成熟胚培养方法 幼胚培养方法 胚乳培养方法 胚珠培养方法 子房培养方法
银杏幼胚培养中添加银杏胚乳有促进作用 (1934);曼佗罗幼胚培养中发现添加椰子乳能 很好的促进幼胚的发育(200-500um的幼胚) (1941)。
此外,大麦胚乳、麦芽提取物、酵母提取物、 水解酪蛋白等都能促进幼胚的发育。
(2)环境条件
A、温度: 多数为25-30℃,因植物种类有所差别。
B、光照: 一般认为黑暗或弱光条件较为合适。
第一节 胚培养的类型和意义
一、植物胚培养的类型
胚培养主要包括成熟胚 培养、幼胚培养两类。
培养类型
成熟胚培养 幼胚培养
1. 成熟胚培养
成熟胚分离出来,进行培养
玉米成熟胚的培养
霍山石斛的胚
2.幼胚培养
剥离的胚胎培养
包括
受精后的胚珠培养
也可以对未受精的胚珠 或子房进行培养,获得单倍体
受精后的子房培养
胚的发育程度与胚的萌发 成活率呈正相关
球
形
球
胚
形
前 期
胚
胚的剥离以受精后
35天左右为宜.
心
型 胚 前
鱼 雷 胚
心型胚、鱼雷胚较好
期
2、影响胚培养的因素
(1)培养基
A、无机盐: a 幼胚培养有MS、B5等培养基,可
使K+、Ca2+水平稍高。
B、碳水化合物:
➢ 糖的作用: 调节渗透压;碳源;防止幼胚早萌。
柑橘:珠心组织 发生多个不定胚。
植物具有多胚现象,不定胚使合子胚发育受阻, 影响杂交育种效率,合子胚分离培养,提高育种效率。
5.诱导胚状体及胚性愈伤组织
利用幼胚等离体培养,产生次生胚状体,和胚性 愈伤组织。
6.种子生活力测定
魔芋胚状体
木本植物种子,层积处理后,胚离体培养,测定
生活力。
;
胚状体与合子胚的比较:
黄瓜杂种幼胎培养苗
三、胚乳培养
胚乳培养是指将胚乳从母体上 分离出来,在无菌的环境条件 下培养,使其生长发育形成幼 苗的过程。
1、胚乳培养过程
胚乳外植体制备:种子消毒---取出胚乳 培养:White或MS诱导培养基---25-27℃--暗或弱
光 发育:诱导形成愈伤组织----再分化形成胚状体或
第六章 植物胚培养
植物胚培养 是指在无菌条件下,对植物的胚 及胚器官如子房、胚珠和胚乳进行离体培养 的技术。
1904年Hanning进行萝卜 和辣根菜成熟胚培养
胚培养的类型和意义
本章内容
胚培养的方法
常见植物胚的培养
本章教学目的与要求
(1)了解植物胚培养的类型 (2)掌握胚培养的方法和操作步骤 (3)了解常见植物胚培养的技术
不定芽---生根培养----植株。
胚乳培养过程
胚乳
愈伤组织
形态发生
胚状体发育成苗
不定芽苗
2、胚乳培养基与培养条件 培养基 培养条件
3、胚乳再生植株的染色体倍数
稳定型:三倍体 畸变型:除少数是三倍体,多数是由多种倍性
细胞组成的嵌合体
4、胚乳培养的Biblioteka 用(1)胚乳培养可得到三倍体植株,产生无 籽果实。或加倍形成六倍体植株进行育种。 (2)胚乳培养可得到倍性不同的愈伤组织, 可分离和筛选各种类型的非整倍体植株。