酒黄精检验方法确认方案
一、简介
酒黄精取净黄精，照酒炖法或酒蒸法炖透或蒸透，稍晾，切厚片，干燥。

主要用于补气养阴，健脾，润肺，益肾。

用于脾胃气虚，体倦乏力，胃阴不足，口干食少，肺虚燥咳，劳嗽咳血，精血不足，腰膝酸软，须发早白，内热消渴。

二、验证目的：
酒黄精检验质量标准收载在《中国药典》2010版一部P288, 为保证生产出的成品符合检验标准的要求,确认该检测方法是否适用于本公司生产的成品检验。

现对质量标准分析方法进行验证，确保检验结果的准确可靠。

三、验证范围
①、鉴别（2）
②、含量测定
四、验证小组成员及职责
4.1验证小组成员
4.2人员职责
表1：
五、验证实施步骤
1.为了确保验证数据的准确可靠，采取以下几个先行保障措施
1.1仪器：己经过校正并在有效期内
1.2人员：均经过培训，熟悉方法及使用的仪器
1.3对照品：均购自江西省药品检验所
1.4材料：均符合检验要求
1.5参考资料：
《中国药典》2010年版一部
《药品生产验证指南》(2003版)
2.鉴别
2.1试验A：取本品粉末1g，加70％乙醇20ml，加热回流1小时，抽滤，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

另取黄精对照药材1g，同法制成对照药材溶液。

照薄层色谱法 (附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(5：2：0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。

供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2.2 试验B：取70％乙醇20ml，加热回流1小时，抽滤，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

另取黄精对照药材1g，同法制成对照药材溶液。

照薄层色谱法 (附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(5：2：0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。

2.3检测结果:
表2
2.4 验证标准:试验A供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

试验B供试品溶液在与对照药材色谱相应的位置未显斑点。

2.5检验结果评价
3.含量测定
照高效液相色谱法测定。

仪器：UV1000紫外分光光度计
3.1专属性
3.1.1对照品溶液的制备取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品33mg，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含无水葡萄糖0.33mg)。

3.1.2标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml，分别置10ml具塞刻度试管中，各加水至2.0ml，摇匀，在冰水浴中缓缓滴加0.2％
葸酮-硫酸溶液至刻度，混匀，放冷后置水浴中保温10分钟，取出，立即置冰水浴中冷却10分钟，取出，以相应试剂为空白。

照紫外-可见分光光度法(附录V A)，在582nm 波长处测定吸光度。

以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

3.1.3测定法取60℃干燥至恒重的本品细粉约0.25g，精密称定，置圆底烧瓶中，加80％乙醇150ml，置水浴中加热回流1小时，趁热滤过，残渣用80％热乙醇洗涤3次，每次10ml，将残渣及滤纸置烧瓶中，加水150ml，置沸水浴中加热回流1小时，趁热滤过，残渣及烧瓶用热水洗涤4次，每次10ml，合并滤液与洗液，放冷，转移至250ml 量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取1 ml，置10ml具塞干燥试管中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加水至2.0ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含无水葡萄糖的重量(mg)，计算，即得。

3.1.4空白溶液的制备：
直接取水作为空白溶液。

3.1.5将结果填入下表。

表3 含量测定专属性试验表
3.1.6验证标准：供试品溶液中与对照品溶液在582nm波长处有最大吸收峰；空白溶液在582nm波长处应无吸收峰。

3.1.7结果评价
3.2重复性（设操作人员A）
3.2.1对照品溶液的制备：取3.1.1项下对照品溶液作为对照品溶液。

3.2.2标准曲线：用3.1.2绘制出来的曲线
3.2.3供试品溶液的制备：取3.1.3项下供试品溶液作为供试品溶液。

3.2.4计算
3.2.5将计算的结果填入下表
表4 含量测定重复性试验结果
3.2.6结果评价：含量测定重复性能满足本品的含量测定要求
六、验证的结果评价及建议
七、再验证周期：质量部门根据验证结果确定再验证周期。