Ann Rheum Dis, 2014, 73(1): 17-23.
Front Immunol, 2015, 6: 412. Auto Immun Highlights, 2016, 7(1): 1.
术语的标准化
一、ANA的定义
传统定义：抗细胞核抗原成分的自身抗体的总称 狭义定义
现代定义：抗细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称 广义定义
靶抗原分布：细胞核
细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期
1.关于抗核抗体概念及核膜型临床意义的建议.中华检验医学杂志,2012,35:477.
2.关于建议更新抗核抗体概念的意见.中华检验医学杂志,2013,36:766.
3.Ann Rheum Dis, 2014, 73(1): 17-23.
二、ANA检测的临床应用范围
Clin Dev Immunol, 2012(2012): 494356.Am J Med, 2013,126(4):342-348.
ACR:无ANA阳性和临床怀疑免疫介导性疾病,不建议检测ANA特异性抗体。
CRA:若患者无SLE或其他结缔组织病的特异性症状和体征,不建议进行ANA筛查。
Autoimmun Rev, 2016 ,15(3):272-280.
Arthritis Rheum, 2012 ,64(7):2319-2327.SLE 患者在临床症状前9.4年可检测到相关抗体
N Engl J Med, 2003,349:1526-1533.
ANA, aPL, anti-Ro, anti-La
anti-dsDNA
anti-Sm 、rRNP
SS 患者在临床症状前18年检测到ANA
JAMA,2013 ,310(17):1854-1855.
自身抗体检测的前景如何？建议3
ANA检测可用于高危人群的健康体检筛查，如育龄期女性、AID患者的直系亲属、处于易 间接免疫荧光法
Indirect immunofluorescence
酶联免疫吸附法
Enzyme-linked Immunosorbant Assay
免疫印迹法
Dot blot、Western blot、Line immunoassay 化学发光法
Chemiluminescence immunoassay
悬浮微阵列
Multiplex immunoassay
1.Ann Rheum Dis,2010,69(8):1420-142
2.
2.Ann Rheum Dis, 2014 ,73(1):17-2
3.
3.中华风湿病学杂志,2014 , 18(7):437-443.
Aklides EUROPattern
Helios Image Navigator
NovaView G-Sight Total Positive 90/9289/9290/9288/9286/9291/92534/552Negative 30/3429/3432/3432/3432/3427/34182/204Sensitivity %97.896.797.895.793.598.996.7Specificity %
88.2
85.3
94.1
94.1
94.1
79.4
89.2
Table 3
Positive and negative results, sensitivity and specificity of the six automated systems for ANA-IIF screening at the manufacturers’cut off.
Autoimmun Rev, 2014, 13(3):292-298.
Antinuclear antibodies:Is the indirect immunofluorenscence still the gold standard or should be replaced by solid phase assays?Autoimmun Rev, 2018.
J Immunol Res, 2017: 6038137.
建议4
建议5
采用以HEp-2细胞为实验基质的IIF 进行ANA 测时，HEp-2细胞在实验基质中每显微镜视野（放大倍数为200倍）应可见3~5个有丝分裂细胞；二抗应使用荧光素标记的抗人IgG 抗体；检测ANA 的稀释方法可根据不同的检测试
剂而采用倍比稀释系统或稀释系统。
Sm
检测方法学评价
1.检测方法：IIF(CL、TE)、
RIA、ELISA、IB等
2.方法学评价：
敏感性
特异性
抗原的特异性、稳定性
亲合力
HEp-2 cell Crithidia Luciliae
ANA检测程序
针对靶抗原的特异性自身抗体进行检测。
23.当临床高度疑似，不论ANA检测结果如何，都需要对特异性抗ENA抗体进行检测。
例如，临床疑
似炎症性肌病（IM）需检测抗Jo-1抗体，临床疑似SLE需检测抗核糖体P蛋白抗体（anti-ribosomal P）
临床疑似先天性心脏传导阻滞/新生儿狼疮/干燥综合征/亚急性皮肤型狼疮需检测抗SSA抗体；
Ann Rheum Dis, 2014, 73(1): 17-23.
注：AC指anti-cell，基于ANA的国际分类和命名原则，结合我国当前的现状，建议黄色部
分为必报荧光模型，绿色部分为选报荧光模型。
建议9
Clin Chem Lab Med, 2018.
五、ANA检测结果报告
Auto Immun Highlights, 2016, 7(1): 1.
荧光模型与特异性自身抗体有无严格相关性？
荧光模型与某AID有无严格相关性？
1.Chem Lab Med.2009,47(5):543-549.
2.Arthritis Rheum, 2011, 63(1):191-200.
3.BMJ Open. 2013,3(10):e003608.
Lupus, 2016,25(9):980-987.
Autoimmun Rev, 2013, 12(10): 998-1003.
•HEp-2细胞：分裂间期HEp-2
细胞核浆呈现均匀一致的致
密细斑点型的荧光染色，核
仁区荧光染色与核浆类似或
阴性；分裂期细胞浓缩的染
色体区也呈现均匀一致的致
密细斑点型荧光染色，染色
体区域外荧光染色阴性。
图
（a）
•猴肝组织冰冻切片：肝细胞
核常呈现荧光染色阴性或细
颗粒型荧光染色模型，荧光
强度弱于HEp-2细胞。
图（b）
致密细斑点型（dense fine speckled patterns）
中华检验医学杂志,2015,38:173-177.
•HEp-2细胞：分裂间期HEp-2
细胞浆毗邻细胞核的一端或
者围绕核周呈现大小不均的
颗粒状荧光染色，常呈现细
胞核周特征性的“新月形”；
核浆及核仁为阴性。
分裂期
细胞由于高尔基体溶解，核
浆呈弥漫型荧光染色，染色
体周围更为浓密。
图（a）
•猴肝组织冰冻切片：可见散
在分布的颗粒状荧光染色。
图（b）
高尔基体型（Golgi-like patterns）
中华临床免疫和变态反应杂志,2014,8:272-277.
•HEp-2细胞：分裂间期HEp-2
细胞浆毗邻细胞核的一端
（核膜边缘）3~10um的棒
状或直径2~5um的环状荧光
染色，核浆及核仁为阴性；
分裂期细胞为阴性。
•猴肝组织冰冻切片中肝细胞
荧光染色阴性。
•临床意义:低滴度可见于普通
人群中，高滴度见于HCV感
染使用IFN/RBV治疗患者中。
胞浆棒环状（rods and rings patterns, RR）
Front Immunol. 2015, 00041.
•HEp-2细胞特征：分裂间期
HEp-2核斑点型、胞浆颗粒
弥散分布且核周增强。
“nuclear speckled with
diffuse cytoplasmic patterns
and perinuclear
enhancement”
•临床意义:见于79%疟原虫感
染患者，而在其他寄生虫等
感染者中未见。
疟原虫感染相关（malaria-related patterns）
PLOS One. 2014, 9(2):e88548
建议14
荧光模型对进行下一步针对靶抗原的特异性自身抗体的检测具有一定的指导意义，但并非完全一致，不能仅从荧光模型来推断针对靶抗原的特异性自身抗体或AID。
滴度的临床应用
滴度达到多少才具有明确的临床意义？
滴度能否作为AID病情监测指标？
不同厂商试剂采用不同的滴度系统，其结果能否直接比较？
1.Am J Med. 2013 ,126(4):342-348.
2.AM J Clin Pathol. 2002,117:316-324.
3.中华风湿病学杂志,2014 , 18(7):437-443.
zrenfang@。