的联系。 A 研究方法拓展 B 研究范围拓宽
分子流行病学的研
分子流行病学和传统流行病学的 关系
区别点 暴露测量
研究对象选择 集体损害
个体易感性 观察的终点
传统流行病学
分子流行病学
回忆偏倚往往难以避免； 用传统的问卷调查难于解 决暴露随时间变化，或多 途径暴露，符合暴露等。
采用生物标志物则可解决 这些问题 暴露测量精确
§ 聚类分析
– 计算机输入SPSS，做树状图
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案例一
§ 2006年7月，本市某医院外科重症监护病 房（ICU）8例患者下呼吸道感染多重耐药 鲍曼不动杆菌
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目标性检测
§ 对该ICU的环境、医疗用品、医务人员手及 鼻咽拭子进行细菌学监测，共采样107份， 其中23份检出鲍曼不动杆菌，阳性率 21.3%。主要分布在医务人员手、咽部及 床头柜、输液泵、监护仪、治疗车、地面 、病人用物等环境和医疗用品。
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案例二
§ 2006年我市某院发现了一例携带耐碳青霉 烯肺炎克雷伯菌（痰，血）的患者
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PFGE原理
Enzyme
酶切
▪约5～20个、长度 10～800kb的大片段 DNA
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脉冲场凝胶电泳(PFGE)
制
备 琼 脂 糖 栓
消 化
酶 切
脉 冲 电 泳
结 果 解 释
块
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PFGE原理
▪ 电场不断在两种方向（有一定夹角，而不是相反 的两个方向）变动。DNA分子带有负电荷，会朝 正极移动。相对较小的分子在电场转换后可以较 快转变移动方向，而较大的分子在凝胶中转向较 为困难。因此小分子向前移动的速度比大分子快
分子流行病学的研究进展及临 床应用
分子流行病学的研
概述
定义 分子流行病学研究进展 分子流行病学在医院感染控制中的应用
分子流行病学的研
分子流行病学定义
§ 分子流行病学是应用先进的实验技术测量 生物学标志，结合流行病学现场研究方法 ，从分子水平阐明疾病的病因及其相关的 致病过程。
分子流行病学的研
传统流行病学
应用血清学方法对血清中各种成分（抗原、 抗体、代谢产物、生化物质等）的出现和 分布进行研究，阐明疾病及健康状态在人 群中的分布及其影响因素，并在采取预防 控制措施后应用血清学方法来考核其效果。
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§ 传统流行病学
§
暴露
疾病
§
§
揭示“黑匣子”秘密
§ 分子流行病学
分子流行病学的研
分子流行病学的研
§
临床微生物实验室
基
础
§ 微生物检验学 分子流行病学
§
§
目的
院内感染控制
方法
§
临床诊断
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分子分型（分子流行病学研究）
▪ 从核酸分子水平上分析医院感染的发生、发展规律及机理 ，更加准确有效地进行医院感染管理控制，已成为当前国 际医院感染管理研究中的重要方向。
▪ 从患者分离株到病区周围环境株的比较分析； ▪ 从外源性感染到内源性感染 ▪ 从某一医院的医院感染暴发到大范围甚至世界
院内感染？
证据
分子流的重大问题之一， 由于院内感染密切关系到医疗服务质量， 关系到病人的预后、病死率、住院时间、 床位周转率以及病人和国家的巨额经济损 失等。因而，院内感染的控制问题已列为 国家乃至世界各国医院管理的重要内容。
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医院感染的常规检测项目
又选择偏倚
减少错分
在损害达到相当程度时才 采用生物标志：
能鉴别出
可提前发现机体损害
有利于研究低暴露的影响
不能测量
能测量
可将观察的终点前移 可增加队列研究终点人数
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分子流行病学与医院感染控制
-细菌同源性分析研究在感 控中的应用
§ 手术伤口感染！ § 导管相关性血流感染！ § 呼吸机相关性肺炎！
▪ 技术创新
凝胶电泳技术、核 酸体外扩增、DNA测 序、蛋白质测序、分 子杂交等
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分子流行病学的发展轨迹
1972年Kilbone博士美国传染病学会第10次年会上首次提出 1982年Perera提出“癌症分子流行病学” 1993年美国人Schulte出版了世界上第一本分子流行病学专
著，即“分子流行病学” 应用分子标志物或生物学测量研究致病因子与所致疾病之间
分子流行病学的产生
传染性疾病 耐药性质粒、病原体变异、新传染病 慢性非传染病 –证实疾病的病因
多病因、多阶段、多基因、长潜隐期 人群易感性-- 研究个体的发病差异 生物个体间的遗传和环境不同，易感性差异很大 ， 传统
流行病学无法有效测量
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分子生物学的快速发 展
▪ 理论突破
断裂基因，操纵子 模型，限制性内切酶， DNA聚合酶等
§ 医院感染病例监测 § 医院环境卫生学监测 § 消毒灭菌效果监测
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医院感染爆发定义
§ 指在医疗机构或某科室的患者中短时间内 发生3例以上同种同源感染病例的现象
§
同一种病原体，药敏一致
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院内感染控制
§ 院内感染的研究中，一个很重要的问题， 就是如何确定感染源和传播途径，只有明 确病原菌的感染方式，才能采取有效的预 防和控制措施。
▪ 可以用来分离大小从10kb到10Mb的DNA分子
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PFGE原理
脉冲电泳
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PFGE结果判读
§ 目测法：
– 按美国疾病控制和预防中心(CDC)Tenover等人推荐的方 法判读。
–图谱完全相同的定为一个型，彼此之间相差一个带的定 为同一型的不同亚型，相差2－3个带的认为亲缘关系密 切，相差4－6个带的认为可能相关，条带相差7个以上的 认为无亲缘关系。并随机地选择不同的字母如A、B、C、 D等的字母顺序分型。
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院感爆发流行的控制
§ 空气消毒 15%过氧乙酸铵2g/m3用量进 行蒸熏及臭氧消毒
§ 物表消毒 地面、台面0.5%过氧乙酸拖擦 消毒
§ 医疗用品消毒 高压蒸汽灭菌
§
0.5%过氧乙酸浸泡消毒
§ 感染患者 隔离治疗 ，分组护理
§ 医务人员咽部带菌者 每日2-3次呋喃西林 滴鼻，口泰嗽口
范围的感染菌株流行变迁；
基因多态性分析技术已成为医院感染监测控 制的高水平研究领域。
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微生物室在医院感染中的作用
§ 鉴定
§ 特殊耐药菌的检出
§ 流行病学分型 泳
PFGE 脉冲场凝胶电
§
RAPD 随机扩增DNA多态性
§
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PFGE原理
消化、释放出DNA
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