分子生学(2)——专业基础
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一、解释下列名词（每题5分，共40分）
1. 蛋白激酶(protein kinase)
2. 增强子(enhancer)
3. SH2结构域(SH2 domain)
4. 聚合酶链反应(PCR)
5. 基因治疗(gene therapy)
6. 变性蛋白质(denatrued protein)
7. 信号肽(signal peptide)
8. cDNA文库
二、问答题(选答四道题,共计60分)
1. 什么是蛋白质的一级、二级、三级、四级结构？它们依靠什么样的链和力建立起这些结构？它们之间的关系是
什么？(15分)
2. 简述重组DNA技术的定义、原理和主要过程，结合你的专业举出一个应用该技术的实例并说明其意义。
(15分)
3. 简述癌基因与抑癌基因的定义,各举一例说明其在肿瘤发生中的作用。
(15分)
4. 以乳糖操纵子(或称为乳糖操纵元)和色氨酸操纵子为例简述原核细胞基因表达调控原理。
(15分)
5. 简述真核细胞基因表达调控的基本环节、主要的调控分子和调控方式。
(15分)
注意：请选答四道题，多答者扣去得分最多的答题！！
一九九五年攻读博士研究生入学试题
分子生物学（2）
一、解释（30分）
1.单链构象多态性（SSCP）
2.Alu家庭（Alu family）
3.受体型酪氨酸激酶（RTK）
4.GTP酶激活蛋白（GAP）
5.亮氨酸拉链（Leucine zipper）
6.杂合性丢失（LOH）
二、简要说明怎样进行构建cDNA文库（10分）
三、举例说明细胞癌基因激活有哪几种方式（10分）
四、真核细胞内存在哪些第二信使？它们是怎样产生的？各有何作用？（10分）
五、已知抹香鲸和猪的胰岛素具有相同的氨基酸序列，然而某些抗血清却能将它们区别开来，这岂不与“蛋白质的一级结构决定其高级结构”的理论相矛盾吗？你如何解释？（10分）
六、小测验（30分）
1.圈出下列结构中处于同一肽键平面的原子（5分）
2.已知UMP在体内可循UMP-----dUMP------dTMP途径转变，那么为什么用氚标记的尿苷进行掺入实验时，只有RNA才被标记呢？（5分）
3.将完全用放射性同位素标记的双链DNA置于不含同位素的反应液中进行复制，那么经过两轮复制后DNA分子的放射分布状态如何？（5分）
4.将某种纯蛋白1mg进行氨基酸分析，得19.5ug的异亮氨酸（分子量=131.2），那么该蛋白质的最小分子量是多少？（5分）
5.设有一双链环状DNA，全部长度为100%（如下图），已知内切酶E1的切点在O，E2的切点
在0.7，E1和E2能分别将此环状DNA切成线状，但其分子量不变，今有E3能将此环状DNA 切成三个片段，其长度分别为60%，30%和10%，若E1与E3双酶切，则切成四个片段，其长度分别为32%，30%，28%和10%；若E2与E3双酶切，也切成四个片段，其长度分别为60%，30%，8%和2%，试将E3在此环状DNA上的切点位置标出。
（10分）
一九九四年攻读博士学位研究生入学试题
一、解释（30分）
1.cDNA文库
2.转录子
3.衷减子
4.摆动配对（Wobble pairing）
5.钙调蛋白（Calmodulin）
6.分子识别（molecular recognization）
二、纠正错误（指出错在何处，为什么）（20分）
1.新生蛋白质分子中的信号肽是指在其C-未端的一段富含极性氨基酸残基的肽段。
2.DNA解链温度随DNA分子中A+T组分的增多而增高。
3.限制性内切核酸酶的主要生物学作用是为基因工程提供必不可少的工具酶。
4.三级结构是蛋白质的三维构型，而四级结构是蛋白质的四维构型。
5.蛋白质的氨基酸顺序是在合成过程中由氨基酸和mRNA模板上的三核苷酸顺序（密码子）之间的互补作用决定的。
6.原核细胞和真核细胞中许多mRNA是多顺反子的转录产物。
7.酶促反应的初速度与底物浓度无关。
8.糖皮质激素与受体结合可激活受体的酪氨酸蛋白激酶活性。
三、简答下列问题（1和2为必答题，3-5中任选答两题）
1.真核生物基因组与原核生物基因组有何主要区别？以图解说明真核Ⅱ类基因（为蛋白质编码的基因）的一般结构。
（15分）
2.蛋白质翻译的精确性是如何保证的？（15分）
3.磷脂酰肌醇代谢在细胞内信号转导中有何主要作用？（10分）
4.为什么说蛋白质的一级结构决定其高级结构？（10分）
5.何谓基因调节的顺式元件（cis element）？它与转录调节因子的相互关系如何？（10分）
一九九三年攻读博士学位研究生入学试题
一、解释（30分）
1.结构域（domain）
2.多顺反子（polycistron）
3.同源重组
4.负增强子（negative enhancer）
5.限制片段长度多态性（RFLP）
6.电势-闸门通道（Voltage-gated channel）
二、问答题（70）
1.同工酶与变构酶各有何生理意义？（10分）
2.组蛋白和非组蛋白染色体蛋白（NHCP）在基因表达的调控中各起何作用？（15分）
3.细胞间的化学通讯主要有哪几种形式？
举例说明其作用特点（15分）
4.一种DNA分子含40%的腺嘌呤核苷酸，另一种DNA分子含30%的胞嘧啶核苷酸，试问哪一种DNA的Tm值较高，为什么？（5分）
5.真核生物为蛋白质编码的基因转录后加工主要包括哪些步骤？有何意义？（10分）
6.要分析某一蛋白质样品的一级结构，通常都采用哪些步骤，简述各步骤所用方法的原理。
（15分）
一九九二年攻读博士学位研究生入学试题
一、解释（共30分）
1.变构蛋白
2.DNA复杂度
3.G-蛋白循环
4.开放读框
5.断裂基因
6.表达载体
二、简答下列问题
1.蛋白质四级结构在细胞代谢调节中的作用。
（15分）
2.肌醇磷脂代谢在信号转导（Signal transduction）中的作用？（15分）
3.举例说明结构基因突变可导致哪些后果？（10分）
4.举例说明DNA印迹法（Southern blotting）的应用。
（10分）
5.如何知道DNA复制中先要有RNA引物合成？（10分）
6.乳糖操纵子的正调控和负调控及其分子机制。
（10分）
一九九一年攻读博士学位研究生入学试题
一、解释（共30分）
1.蛋白质的二级结构
2.酪氨酸蛋白激酶
3.琥珀突变（Amber mutation）
4.cDNA文库
5.足迹法（Foot printing）
6.锌指结构(ZinC finger)
二、简答（共25分）
1.纸层析、离子交换柱层析、凝胶过滤和电泳四种方法中哪一种最不适用于分离谷氨酸与赖氨
酸？
2.某种病毒DNA的碱基组成（摩尔百分比）如下：
A=32；G=16；T=40；C=12
该病毒DNA的特点如何？
3.衰减现象（Attenuation）能否在真核基因调控中发生？为什么？
4.设若以葡萄糖的彻底氧化作为蛋白质生物合成的能量来源，那么一分子葡萄糖的氧化可供多少分子的氨基酸渗入蛋白质？
5.Maxam-Gilbert法测DNA序列获得如下的凝胶电泳图，试读出该DNA片段的序列。
c
三、举例说明何谓基因表达的正调控和负调控（15分）
四、一种分子量为100KD的蛋白质用SDS（十二烷基硫酸钠）处理后电泳，呈现两条带，其中一条为分子量50KD，另一条为25KD。
若先用β-巯基乙醇处理，而后再进行SDS-电泳，则产生分子量分别为35KD、15KD和25KD的三条带，试分析此蛋白质的亚单位结构。
（多肽链的数目和结合状态）（10分）
五、如何判断某种酶是否属于变构酶？（10分）
六、当用人肿瘤DNA转化小鼠3T3细胞成功，你如何能从被转化细胞DNA中筛选出未知的（当然无探针可利用）转化基因？（10分）
七、已知构成膜IgM的um链和构成分泌型IgM的uS链，其V、C1、C2、和C3结构域都相同，C4结构域的N端也相同，仅其C端不同；又它们各自的mRNA绝大部分序列也相同，差别仅在多聚Ａ尾前的一段核苷酸序列，um-mRNA长2.7kb;us-mRNA长2.4kb,试分析这两种ＩgM是如何产生的（１０分）
中国科学院发育生物学所分子生物学2000年博士研究生入学试题
（一、二、三题为必答题，五和六可任选一题）
一、请解释下列名词，并写出它们的英文术词：
1 基因家族
2 持家基因
3 同形异位盒
4 基因沉默
5 功能基因组学
6 信号肽
7 信号传递
8 细胞编程性死亡
二、限制性内切酶是如何发现的？限制性内切酶可分成几类？如何使用限制内切酶进行分子生物学的研究？
三、请分别列出用于蛋白质和核酸的电泳分析和分离的技术，并说明这些技术与蛋白质和核酸的性质的关系。
四、请比较植物和动物基因工程的异同，并在你所熟悉的生物（植物或动物）的范围内探讨基因工程的前沿和瓶颈问题。
五、获得一个功能未知的基因克隆后，怎样才能阐明该基因的功能？请你根据自己熟悉的某种真核生物提出具体的研究方案。
六、在真核生物基因的DNA序列中，哪些部分的核苷酸序列的变异会影响其编码的蛋白质的结构和功能？为什么？。