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甲苯胺蓝染色

软骨细胞甲苯胺蓝染色
1%甲苯胺蓝配制
原液:1g甲苯胺蓝粉末+10ml 70%酒精溶解(据说可保存6个月)
工作液:取上述原液1ml+9ml 1% NaCl 溶解,滤纸过滤(用时新鲜配制)
1% NaCl:1gNaCl + 100ml 蒸馏水(用时新鲜配制)
染色步骤:
(1)爬片用PBS洗2次,直接用4% 多聚甲醛固定于6孔板中1h或更长时间(4度)(2)自来水洗15分钟,最好不要直接冲爬片,易脱片
(3)蒸馏水洗5分钟
(4)加1%甲苯胺蓝浸染2h
(5)去除多余染液,我觉得可以用注射器从6孔板中吸走。

有人说用90%酒精的,但一定要慎重。

否则时间稍长,就会将颜色洗脱。

当然洗脱后仍然可以从(4)开始重复。

(6)镜下观察,满意后晾干,中性树胶封片(或者镜下观察)。

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