Байду номын сангаас
Folin-酚试剂 folin-酚试剂一般用于folin酚法，做蛋白质含量测定的一种显色
剂。 folin-酚试剂
一般原理：folin试剂中的磷钼酸-磷钨酸盐被蛋白质中的色氨酸 和酪氨酸 残基还原，发生显色反应：产生蓝色（钨兰+钼兰）。蓝色的浓重度与 蛋白质含量成正比。
配置：
试剂甲：
（A） 10克 Na2CO3，2克 NaOH和0.25克酒石酸钾钠 （KNaC4H4O6·4H2O）。溶解于500毫升蒸馏水中。
物理性质：
白色至浅棕黄色无定形粉末。溶于水，水溶液
无色至淡黄 色， 有时有乳白光，不溶于乙醇、氯
仿和乙醚。属糖蛋白。
主要作用原理：使多肽类水解为低分子量的肽类。
尚有水解酰胺基键
和酯类的作用。
分子量：约33000，
等电点pH值：9.35
最适pH值：6～8
最适温度：55℃。
化学性质： 中文名称:菠萝蛋白酶
菠萝蛋白酶活力测得的实验过程：
分别取酶制品0. 15 g 克加入pH7. 0 , 0. 05mol/ L 磷酸缓冲溶液定容至100 mL ,过滤,此滤液为溶液酶制 剂。 取1 mL 溶液酶加入0. 9 mL 激活剂(pH7. 0 , 0. 05 mol/ L 磷酸缓冲溶液, 内含15mmol/ L 硫代硫酸钠 及6 mmol/ L EDTA22Na) ,于37 ℃水浴中保温恒定后, 加入同样预热的1 %酪蛋白溶液,混匀,在37 ℃下准确反 应10 min ,加入8mL 1N 氢氧化钠溶液,迅速摇匀,于室 温放置半小时。 取上清液于275 nm 波长下测定OD 值。 计算溶液酶的活力。
二、菠萝蛋白酶在医药、保健品业的应用
1、抑制肿瘤细胞的生长 经相关临床研究观察表明，菠萝蛋白酶能抑制肿瘤细胞的生长。 2、对心血管疾病的防治 菠萝蛋白酶作为蛋白水解酶对心血管疾病的防治是有益的。它能抑制血小 板聚集引起的心脏病发作和中风, 缓解心绞痛症状,缓和动脉收缩, 加速纤维蛋 白原的分解。 3、用于烧伤脱痂 菠萝蛋白酶能选择性地除 皮, 使新皮移植得以尽早进行。动物实验证明, 菠萝蛋白酶对邻近的正常皮肤无不良影响。局部使用抗生素不影响菠萝蛋白酶 的效果。 4、消炎作用 菠萝蛋白酶在各种组织中能有效地治疗炎症和水肿(包括血栓静脉炎、骨骼 肌损伤、血肿、口腔炎、糖尿病人溃疡及运动损伤)，菠萝蛋白酶具有激活炎症 反应的潜力。菠萝蛋白酶还可治疗腹泻。 5、增进药物吸收 将菠萝蛋白酶与各种抗生素(如四环素, 阿莫西林等)联用, 能提高其疗效。 相关研究表明, 它能促进抗生素在感染部位的传输, 从而减少抗生素的用药量。 据推断, 对于抗癌药物, 也有类似的作用。此外，菠萝蛋白酶能促进营养物质 的吸收。
作用条件：
最佳温度： 53±1℃ 失活温度： ≥65℃ 最佳PH值： 5.0～8.0 失活PH值： 小于3.0和大与9.5 推荐用量: 0.05～0.1%对蛋白质计 温度范围： 50～60℃ 作用PH值: 6.0～9.0
生产方法 菠萝压榨得汁液, 按压出汁液的体
积量加10 %氯化钠,在室温下自然沉降120 h ,弃 去沉淀物,得澄清液。 将澄清液移入烧杯中,在搅 拌条件下,按澄清液体积加入0. 05 %EDTA22Na 、 0. 02 %维生素C ,立刻加入0. 1 %的单宁和自制 的吸附剂,在4 ℃下静置1 h ,离心弃去上清液,收 集沉淀物,加入2～3 倍pH 值为4. 5 的抗坏血酸 溶液,静止30 min。 离心14 min ,弃去沉淀物,收 集滤液,用冷冻真空干燥即得菠萝酶。
菠萝蛋白酶
第一组：徐波 李万智 刘金安 徐标 叶永逸
从菠萝中提取菠萝蛋白酶
定义：
一种来源于菠萝的多肽水解酶，属巯基蛋白酶。是从菠萝果 茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷 冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。其外观为浅灰色粉 末状，分子量为 33000 ，等电点为 9.55 。品质最佳的菠 萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工,采用超滤方法进行过滤浓 缩,低温冷冻干燥而得的。产品已被广泛应用于食品、医药 等行业。
蛋白质含量的测定过程：
取12 支试管,分别加入0 ,0. 20 ,0. 40 ,0. 60 ,0. 80 ,1. 00 mL 标准牛血清溶液 (500μ g/ L ,用水补足1. 00mL ,以上每种浓度 各做一份重复,即平行做两份,按顺序向各管加 入5 mLFolin-酚试剂甲,混匀。 室温下放置10 min 后,再依次向各管加入0. 5 mL Folin-酚试 剂乙,立即摇匀,在30 ℃保温(或室温下放置) 30 min。 然后,在721 型分光光度计上进行比 色测定。 以光密度(O.D. )为纵坐标,以牛血清 溶液浓度为横坐标,绘制出牛血清的标准曲线。 未知的菠萝蛋白酶的蛋白质含量在曲线中得到。
中文同义词: 菠萝蛋白酶;菠萝酶;菠罗蛋白酶 相关类别: 酶和微生物制剂;酶制剂;食品添加剂 储存条件：20°C 状态：粉末 颜色：黄棕色 水溶解性：可溶 毒性 类别：有毒物质 毒性分级：高毒 急性毒性：腹腔-大鼠 LD50: 85 毫克/公斤; 腹 腔-小鼠 LD50: 37 毫克/公斤 可燃性危险特性 热分解排出刺激烟雾 储运特性 库房通风低温干燥 灭火剂：水,泡沫,沙土,二氧化碳,干粉
三、菠萝蛋白酶在美容化妆品业中的应用
菠萝蛋白酶具有嫩肤、美白去斑的优异功效。 基本作用原理：菠萝蛋白酶可作用于人体皮肤上的老化角质层， 促使其退化、分解、去除，促进皮肤新陈代谢，减少因日晒引起的皮 肤色深现象。使皮肤保养呈现良好白嫩状态。
四、菠萝蛋白酶制剂在饲料中的应用
将菠萝蛋白酶加入饲料配方或直接混合在饲料中，可以大大 提高蛋白质的利用率和转化率，并能开发更广的蛋白源，从而降 低饲料成本。
注意：选用无水碳酸钠。A，B三种溶液在测定的当天将按100：1： 1的体积比混合。
混合放置30mn.后使用，混合液只能用一天。三种溶液分开可长期 保存。
应用：
一、菠萝蛋白酶在食品加工业的应用
1、焙烤食品：将菠萝蛋白酶加入生面团中，可使面筋降解，生 面团被软化后易于加工。并能提高饼干与面包的口感与品质。
2、干酪：用于干酪素的凝结。 3、肉类的嫩化：菠萝蛋白酶将肉类蛋白质的大分子蛋白质水解 为易吸收的小分子氨基酸和蛋白质。可广泛地应用于肉制品的精加工。 4、菠萝蛋白酶在其它食品加工业中的应用，有人已经用菠萝蛋 白酶来增加豆饼和豆粉的PDI值和NSI值，从而生产出可溶性蛋白制品 及含豆粉的早餐、谷类食物和饮料。其它还有生产脱水豆类、婴儿食 品和人造黄油；澄清苹果汁；制造软糖；为病人提供可消化的食品； 给日常食品添味等。
（B） 0.5克硫酸铜（CuSO4·5H2O）溶解于100毫升蒸馏水中，每 次使用前，将50份（A）与1份（B）混合，即为试剂甲。
（2）试剂乙：
在2升磨口回流瓶中，加入100克钨酸钠（Na2WO4·2H2O）,25克 钼酸钠（Na2MoO4·2H2O）及700毫升蒸馏水，再加50毫升85%磷酸， 100毫升浓盐酸，充分混合，接上回流管，以小火回流10小时，回流结 束时，加入150克 硫 酸 锂（Li2SO4），50毫升蒸馏水及数滴液体溴， 开口继续沸腾15分钟，以便驱除过量的溴。冷却后溶液呈黄色（如仍呈 绿色，须再重复滴加液体溴的步骤）。稀释至1升，过滤，滤液置于棕 色试剂瓶中保存。使用时用标准NaOH滴定，酚酞作指示剂，然后适当 稀释，约加水1倍，使最终的酸浓度为1N左右。