阴性报告
每 3 个月随访一次，共 2 次，仍属可疑，则作阴性报告如随访期间出现阳性反应则报告阳性
一、HIV抗体诊断
临床上实际应用的是测定特异性HIV抗体， 包括初筛和确认两个方面。HIV抗体一般 在感染后几周逐渐出现，可延续至终身， 是重要诊断依据，但是从感染到血清抗 体阳转有一段窗口期，平均为1到3个月， 还有一小部分比例的HIV感染者出现迟缓 反应，95%以上HIV-1感染者产生抗体的 时间是在感染后6个月以内。
血液筛查: 以血液筛查为目的的检 测是为了防止输血传播HIV而进行的 检测，包括献血员筛查和原料血浆 筛查。
HIV抗体检测的要点
筛查试验阳性不能出阳性报告。 严 格 遵 守 实 验 室 标 准 操 作 程 序
（SOP）。 严格按照试剂盒说明书操作。 注意防止样品间交叉污染。
常规程序 • 初筛-复检-确认
复检： 对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂 和另外一种不同原理或不同厂家的筛 查试剂重复检测。如两种试剂复测均 呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性； 如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送 艾滋病确认实验室进行确认。
HIV抗体筛查试验流程图
样品
筛查检测 阳性反应
原有试剂加另外一种筛查试剂 重复检测
均阳性反应
雅培Determine（硒标） 快速试剂试验原理
雅 培 Determine HIV1/2 快 速 测 试 试剂是一种用免疫层析法原理,定性 测定血样中HIV1/2抗体。
加样本入反应条，当样品通过硒胶体抗原结合物时，与硒胶体-抗原结合物混 合重组结合，此混合物继续迁移通过固 相包被的合成肽和重组抗原的结果窗。 如果样品中含有HIV1/2抗体，其抗体将 会与硒胶体-抗原结合，并在窗口处被固 相包被的合成肽和重组抗原所捕获固定， 形成一条红线。如果样品中不含HIV1/2 抗体，则无红线形成。
▲ 实验中设阴性对照和阳性对照。
明胶颗粒凝集试验(PA)原理
以HIV抗原致敏粉红色明胶粒子(载体)。 这种致敏载体和血清中HIV抗体相遇被桥 联而出现肉眼可见的凝集反应,非致敏的 明胶粒子因无抗原参与,则不发生凝集。 如果试验中的未致敏粒子对照出现凝集， 即提示血清中含非特异性凝集因子，需 用未致敏粒子吸附处理，重新做试验。
HIV抵抗力--物理因素
HIV保存： 在-70℃不加保存剂冷冻保存，其感
染性可丧失。但若在-70℃保存于 35%山梨醇或50%小牛血清（FBS）可 存活3 个月以上，在液氮中（196℃）HIV可存活数年以上。因此， 毒种必须置于液氮中方可长期保存。
HIV抵抗力—化学因素
HIV耐碱不耐酸：在pH3.0条件下HIV 滴度在10分钟可下降4个对数级，而 pH值高达9.0时，HIV滴度下降甚微。
为了保证结果有效，在反应条中含有 质控条带。
金标快速试剂试验原理
CHEK HIV-1+2 （EY） 将HIV抗原吸附在基膜上，加入待检
标本后,如果标本中有HIV-1或HIV-2抗体， 抗体便被吸附在基膜的抗原上，加入P-A 金标记溶液，而其Fc部位则和P-A金标记 物结合, 形成如三明治般的粒子，出现 肉眼可见的粉红色圆点。
对含氯消毒剂敏感。0.5％次氯酸、 2％戊二醛溶液、3％碘酒、6％过氧 化氢可在3～5分钟内灭活HIV。
实验常用的消毒办法
高压蒸汽灭菌 (121℃ 20分钟) 干烤 170℃ 2小时 煮沸 20分钟 消毒剂浸泡30分钟，常用消毒剂为5％可
用氯(次氯酸钠、次氯酸钾、氯氨T)、6 ％过氧化氢、2％戊二醛等。70%酒精1分 钟可灭活HIV。
* HIV－1/2混合型 * 卫生部批准文号 * 卫生部药政局检定所批批检,并贴有防伪标签 * 进口初筛试剂要有我国的注册证明 * 敏感性高、操作简便、价格低廉和相对好的特
异性, * 常用初筛试剂:酶联免疫吸附试验、凝聚试验、
免疫斑点试验等。
艾滋病抗体检测结果的报告
初筛试验结果:
* 初筛实验室HIV抗体检测的阴性结果，可以出 据试验阴性的报告单，并标明所用试剂名称、 试剂效期、试验者等内容。可通过咨询通知本 人。
II级生物安全柜分类
1. II级A型生物安全柜：70%柜内循环， 30%空气排出，无连接法蓝 2. II级B1型生物安全柜:30%柜内循环， 3. II级B2型生物安全柜:100%空气排出 4. II级B3型生物安全柜：70%柜内循环， 30%空气排出，有连接法蓝。 5. II级A/B3型生物安全柜：兼顾A型和 B3型
常用样品
主要为血液 此外还可用唾液检测HIV（Orasure，如
Salivacard），尿液检测HIV抗体 。
常用方法
酶联免疫吸附试验（ELISA） 明胶颗粒凝集试验（PA） 斑点免疫试验（或免疫层析）：胶体金
或胶体硒
双抗原夹心ELISA试验原理
▲ 此类试验比较敏感和特异，可检 测血清中的IgA、IgM、IgG抗体。 ▲ 将HIV -1/2混合抗原包被在微孔板 底部。
一阴一阳
送确认实验室 进行确认
筛查试剂 阴性反应
均阴性反应 阴性报告
HIV抗体确认试验流程图
免疫印迹法(HIV1/2 混合型)
阴性反应 HIV-1 阳性反应 不确定反应 应
阴性报告 HIV-1 阳性报告
出现 HIV-2 指示条带 免疫印迹法（HIV-2）
阳性反应
阴性反应
报告 HIV-2 血清学阳性 不确定反应 必要时测核酸
为什么使用生物安全柜
1. 生物安全柜主要用于各种微生 物,特别是有害微生物的操作和 基因工程操作。
2. 根本目的是保护工作人员健康 和柜外环境安全。
3. 根据保护对象和程度的不同， 生物安全柜分为I、II和III级。
生物安全柜的分级
1. I级生物安全柜：保护工作人员 和环境。 2. II级生物安全柜：保护工作人员 、环境和样品。 3. III级生物安全柜：采用手套箱更 严格地保护工作人员、环境和试样 （产品）。
三、HIV实验室检测管理
艾滋病检测工作规范要点
实验室设置 国家艾滋病抗体检测参比中心 艾滋病抗体确证实验室--卫生部批准 艾滋病抗体初筛中心实验室--卫生厅审 批 艾滋病抗体初筛实验室--卫生厅审批
各级实验室承担相应的任务
确证实验室职责
对初筛实验室人员技术培训 对初筛实验室考评或验收 对初筛实验室进行年度质控血清考核 评估省内所使用的HIV抗体检测试剂 省内各级初筛实验室的质控管理 艾滋病抗体初筛实验阳性标本的确证 向上级部门报告检测工作
窗口期和残余危险度
1、窗口期：HIV感染后至抗体检出前的一段时间称 为窗口期。
2、残余危险度(residue risk)：在目前条件下，筛查后 仍具感染性的机率。影响残余危险度的主要因素 包括窗口期、试剂质量、实验室质控以及人群感 染率等。各国的残余危险度不一，美国1985年是 1/2500,随着检测试剂完善，包括“O”亚型的检出、 IgM和p24抗原的检测，到1995年降至1/44-66万； 据报道非洲为5/1000,泰国1/775,肯尼亚 1/50。
HIV抗体检测情况报告
艾滋病抗体初筛实验室，每月5日前将上 月的检测情况报初筛中心实验室；
艾滋病抗体初筛中心实验室，每月10日 前将本实验室和辖区内各初筛实验室上 月的检测情况汇总后，报省艾滋病确认 实验室；
* 初筛HIV抗体阳性，只视为HIV抗体可疑阳性， 初筛实验室无权向个人或送检单位报告阳性结 果。可出据“HIV抗体待复查”报告。需再次 采血送确认实验室作确认试验
艾滋病抗体检测结果的报告
确认试验结果: * 阳性结果，只有卫生部批准的HIV抗体 确认实验室有资格出据阳性报告，同时 按照疫情报告程序和要求呈报有关部门， 并经充分分析具体情况决定通知受检者 * 阴性结果，将阴性结果报给送检单位， 可以通知受检者
艾滋病实验室检测管理与 设备维护
河北省疾病预防控制中心 性病艾滋病预防监测中心
赵翠英
HIV抗体检测的目的
监测:以监测为目的的检测是为了解 不同人群HIV感染率及其变化趋势而 进行的检测，检测的人群包括各类 高危人群和一般人群。
诊断:以诊断为目的的检测是为了确 定个体HIV感染状况而进行的检测， 包括临床检测和自愿咨询检测、术 前检测、根据特殊需要进行的体检 等。
目前已有HIV-1和HIV-2抗原共同致敏的PA 试剂（AFD HIV 1/2 PA）和HIV-1、HIV-2抗原 分别致敏的PA试剂（AERODIA-HIV-1/2）。前 者可用于HIV1/2的筛查，后者可用于区分HIV1型和HIV-II型。
其缺点是判定结果用肉眼观察，无法保存。
目前这问题已得到解决，为了保存试验结 果，试剂盒可配备数码相机。
生物安全柜的选用
1. 凡进行有害微生物和转基因操作， 均应使用生物安全柜，不可用净化 工作台。 2. 根据工作性质和防护要求，选用 适当级别和型号的生物安全柜。 3. 产品质量。 4. 售后服务。
微生物防护性能
1.对工作人员的防护性能 2.对样品防护性能 3.交叉污染防护性能
初筛试剂要求
室用鞋
生物安全柜
微 生 物 安 全 柜 microbiological safety cabinet (MSC) 生 物 安 全 柜 biological safety cabinet （BSC）
操作危险性微生物时所用的箱形空气净化 安全装置，保护使用者和环境不受因为 操作产生的有害危险物质和微生物气溶 胶的伤害。生物安全柜按防护水平分为I 级、II级、III级。
艾滋病抗体初筛中心实验室职责
本地区初筛实验室的技术指导和管理 本地区初筛实验室人员的技术培训和咨询 本地区初筛实验室的质量管理和质量控制 对初筛实验可疑阳性或阳性标本的复检 承担艾滋病抗体的初筛实验和咨询 汇总本地区艾滋病检测结果并上报
初筛实验室的职责
艾滋病抗体初筛实验和检测前后的咨询 及时向中心实验室送检初筛实验阳性或