正反定性不一致
干扰因素：生理因素(年龄、ABO亚型、先天无抗体、冷凝集素)
临床治疗（大量输液、近期输过异性红细胞或血浆）
样）
实验技术原因（标本混淆、试剂质量问题、静脉输液处采
分类：红细胞抗原减弱或丢失（ABO亚型、白血病、输异性血、急性 大出血）
红细胞额外反应（自身抗体、红细胞未洗涤、红细胞上粘附大 量蛋白）
ABO血型的鉴定
实验原理：血型抗原与相应的抗体在反应介质中形成免疫复合物，出现肉眼可见的凝集现象。
ABO血型的鉴定
实验用具：载玻片 胶头滴管
酒精
棉签
准血清
抗A、B标
血针
一次性采
ABO血型的鉴定
实验过程：
常规消毒，用棉
签 沾 取 75% 的 酒
精，对采血部位
1
准备载玻片
取一载玻片，左
进行消毒。
消毒
盐水介质抗D试验
采用免疫球蛋白变性剂处理人源IgG类抗D血清，使 小分子的IgG抗体分子增大成为具有大分子的“IgM”的性质， 能在盐水介质中与相应红细胞发生凝集，可用于Rh血型的快 速鉴定。
Rh血型的鉴定方法及原理
抗球蛋白试验
又称Coombs试验，是检测红细胞上不完全抗体的 经典方法。不完全抗体多与其相应的红细胞结合， 在盐水介质中不出现凝集反应，Coombs试验利用抗 球蛋白抗体作为第2抗体，通过连接致敏红细胞表面 的特异性Rh抗体，使致敏红细胞出现特异性凝集。
低离子强度试验
红细胞外围的阴离子是红细胞的稳定因素之一， 降低反应介质的离子强度可减少细胞外围的阴离子， 促进带正电荷的IgG型Rh抗体与红细胞结合发生凝集 反应，从而增加红细胞的凝集强度。
常见疑难血型
定义：疑难血型是指一种血型难以鉴定或判定的现象。
特点：正定型凝集弱于2+或反定型弱于1+（正常凝集3+~4+）
显性基因：控制显性性状的基因。 隐性基因：控制隐性性状的基因。
ABO血型鉴定抗原——遗传
思考：A、B、AB以及O型血的基因型分别是什么?
A型
B型
O型
AB型
AA
BB Bo
oo
AB
Ao
遗传规律
ABO血型的鉴定
实验方法：血凝试验(玻片法、试管法、全自动微
板法)，微柱凝胶试验，流式细胞技术，酶联免疫吸 附试验。
血型的鉴定
检验科
内容大纲
Ta b l e of C o n t e n t s
1ABO血型系统2ABO血型的鉴定3
RH血型系统
4
RH血型的鉴定
5
常见疑难血型的鉴定
6
血型鉴定在生活中的应用
ABO血型系统
血 O型血 型 A型血 传 B型血 说 AB型血
O型血是人类最古老的血型 出现于4万-6万年前
A型血产生于农耕时代 出现于1.7万年-2.7万年前
常见疑难血型的鉴定
自身抗体
B型血产生于游牧民族 出现于公元前1.7万-1.2万年前
AB型血 出现不到1000年
ABO血型系统抗原
ABO血型系统是根据红细胞表面所含的凝集原不同而命名的。
凝集原：附着在红细胞表面的一种抗原。
只有A凝集原
凝集原
只有B凝集原
同时具有AB凝集原
不具有AB凝集原
ABO血型系统抗体
凝集素(抗体)：存在于血清中，与其同名凝集原会发生抗原抗体反应，导致红 细胞凝集。人血清中含有两类凝集素：即抗A和抗B。属于天然抗体，天然抗体 多以IgM型为主，不能通过胎盘，而免疫性抗体多以IgG型为主，能通过胎盘。
红细胞表面的唾液酸带负电荷，使用木瓜酶或菠萝酶 破坏红细胞表面的唾液酸，降低红细胞表面的负电荷，减少 细胞间的排斥力，促进Rh抗原与相应抗体间的结合从而产生 红细胞凝集。
聚凝胺试验
聚凝胺是带高价阳离子的季铵盐，溶解后产生的正电 荷中和红细胞表面的负电荷，减少细胞间的排斥力，有利于 红细胞凝集。如果是由Rh抗体致敏的红细胞产生的凝集，是 特异的不可逆凝集。非抗体致敏红细胞凝集则是可逆性凝集。
2
右两侧分别标记
字母AB。
在载玻片两侧相应的滴加
抗A(蓝色)和抗B(橙色)血
清后，用棉签棍将两侧血
液与血清混匀，注意一定
要换不同的棉签棍。
3
滴标准血清
采血
4
采血针轻刺手指
5
混匀观察
混均后，静置3-
尖，轻轻挤压伤
5分钟后，观察
口使血液流出，
现象。
分别滴在载玻片
的两侧。
ABO血型的鉴定
实验结果：
RH血型系统
Rh血型系统抗体
天然Rh抗体很少，绝大多数Rh抗体由输血或妊娠刺激机体免疫系统 产生的IgG型免疫性抗体。主要Rh血型系统抗体有抗D、抗E、抗C、 抗c、抗e五种，其中抗D最为常见。在盐水介质试验系统中可检测 出某些Rh抗体，表明这些Rh抗体具有IgM的性质可能来自免疫反应 抗体形成早期。
Rh血 酶型介的质法鉴定方法及原理
凝集素
对血液中红细胞的影响
ABO血型系统
B血型的 血清中
抗A凝集素
A血型的 血清中
抗B凝集素
AB血型 的血清中
O血型的 血清中
不含有抗A和 同时含有抗A 抗B凝集素 和抗B凝集素
ABO血型系统抗原——遗传
ABO 血型系统的基因位点在第 9 对染色体 上。人的 ABO 血型受控于A、B、O三个基因。 其中A、B为显性基因，O为隐性基因。
举例说明
红细胞抗原减弱或丢失(ABO亚型、正定型ABO抗原减弱) 红细胞额外反应（自身抗体）
常见疑难血型的鉴定
ABO亚型
实验结果：正定型与反定型不一致、正定型被检红细胞凝集弱 解决方法：加抗-AB、抗-H、抗Bc
常见疑难血型的鉴定
正定型AB抗原减弱
实验结果：正定型与反定型不一致、正定型被检红细胞凝集弱、正定 型呈mf样 解决方法：加抗-AB
人类血型目前发现有30多种，除了ABO血型系统 外，还有Rh血型系统等。Rh血型系统根据有无D 抗原分为Rh阳性和Rh阴性。
RH血型系统抗原及抗体
Rh血型系统抗原
Rh血型系统能识别的抗原共43种，常见的抗原有五种，分别是D、C、 E、c、e。以D抗原的抗原性最强，故常以其存在与否定为Rh阳性或阴 性，即凡含D抗原者为Rh阳性，不含D抗原者为Rh阴性。
混合凝集（近期输异性血、造血干细胞移植）
血型定型减弱或无反应（年龄、先天性ABO抗体缺失）
常见疑难血型的鉴定
分析思路（三步法）
第一步：排除人为因素或在技术上可能发生的操作失误； 重新采集血样，核对试剂、器材，规范地复检ABO血型
第二步：了解临床资料，分析可能出现的原因； 第三步：排除不可能的原因，归纳不能排除的原因，设计验证试验。