当前位置:文档之家› 第二章动物组织和细胞培养(1)

第二章动物组织和细胞培养(1)


3 传递窗:
该装置是一种洁净室 的辅助设备,主要用于 洁净区与洁净区,洁净 区与非洁净区之间小件 物品的传递,以减少洁 净室的开门次数,把对 洁净区的污染降低到最 低程度。
4 高效过滤器:
●高效过滤器是用超细玻璃纤维 纸作滤料,胶板纸作分隔板,可 与铝合金框、木框及镀锌钢板框 组合而成。 ●特点:具有低阻高效、轻质、 容尘量大等特点, ●适用于常温常压常湿条件下环 境空气的净化.
洁净度级 别
尘粒最大允许数/立方米
尘粒最大允许数
≥0.5um
≥5um 浮游菌/立方 沉降菌/皿
100
3,500
0
5
1
10,000
350,000
2,000
100
3
100,000 3,500,000
20,000
500
10
300,000 10,500,000
60,000
NA
15
2 风淋室:
●风淋室是生物洁净室 的理想配套设备,用于 吹除进入洁净厂房的人、 物表面附着的尘埃 ●是进行人身、物料净 化和防止室外空气侵入 洁净区的有效设备 ●风淋室可以配合加热 器,冬天可以加热,温 度可调,一般控制温度 在30-35℃较为适宜。
细胞保存条件:液氮罐 实验室安全:生物实验室安全,P1,P2,P3实验室安全
(一) 无菌条件
• 净化工作室,风淋室,传递窗,高效过 滤器,洁净层流罩,生物安全柜,超净 工作台,紫外灯,电热干燥箱,高压灭 菌器,抗生素.
1 净化工作室
------ 我国药品生产洁净室(区)空气洁净度标准 -------
第一节 细胞培养的基础知识
一 动物细胞培养的基本条件
无菌条件:净化工作室,风淋室,传递窗,高效过滤器, 洁净层流罩,生物安全柜,超净工作台,紫外 灯,电热干燥箱,高压灭菌器,抗生素
细胞生长条件:纯水蒸馏器,纯水仪,培养板,培养瓶, CO2培养箱,培养基,血清
细胞检测条件:倒置显微镜,酶标仪 ,微孔板震荡器,高 速离心机,移液器
CO2培养箱主要由箱体结构 件、温度控制系统和CO2浓度 控制系统三部分组成。
CO2培养箱设定的条件为37 ℃ ,5%CO2 。
再现活体环境对于温度、PH值 CO2浓度、氧分压(O2浓度)、相 对湿度等细胞生长关键的因素,
6 移液器
(三) 细胞检测条件:
• 倒置显微镜,酶标仪 ,微孔板震荡器, 高速离心机,移液器
5 洁净层流罩:
层流罩是可提供局部高洁净 环境的空气净化设备。洁净 层流罩是将空气经风机以一 定的风压通过高效空气过滤
器后,使洁净空气呈垂直气 流送入工作区,从而保证了
工作区内达到工艺所需的高 洁净度。
6 超净工作台
超净工作台的工作 原理是利用鼓风机 驱动空气通过高效 滤器除去空气中的 尘埃颗粒,使空气 得到净化。净化空 气徐徐通过工作台 面,使工作台内构 成无菌环境。
滤器
大容量高压灭菌器
(二) 细胞生长条件
• 纯水蒸馏器,纯水仪,培养板,培养瓶, CO2培养箱,培养基,血清
1自动双重纯水蒸馏器
2 纯水仪
精滤、活性碳吸附 反渗透
3 标准型细胞培养板 (Tissue Culture Plates)
6孔,12孔,24孔,48孔,96孔
4 培养瓶
5 C全防护实验室
实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于 对健康成年人已知无致病作用的微生物,如用于教学 的普通微生物实验室等。
二级生物安全防护实验室 实验室结构和设施、安全操作规程、 安全设备适用于对人或环境具有中等 潜在危害的微生物。
二级生物安全防护实验室
1 可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全柜(Ⅱ级生物 安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行,并使用个体防护设备。
7 生物安全柜:
一种既能使操作造成无菌、 无尘的局部空气环境,保证检 验、检测不受污染,又能保证 被研究的对象(如病菌、细菌 等)不外溢,保护周围环境及 操作人员的安全隔离设备。
该设备可广泛应用于低、 中等危险度的临床细菌学,病 毒学、微生物学、组织培养、 生物学及生命科学的研究,加 工、检验部门。
4 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时,防护服必须脱 下并留在实验室内。不得穿着外出,更不能携带回家。用过的工作服应先在实验 室中消毒,然后统一洗涤或丢弃。
5 当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染 性材料的溢出或溅出,宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束 后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。
2 处理高浓度或大容量感染性材料均必须在生物安全柜(Ⅱ级生物安全柜为宜) 或其他物理抑制设备中进行,并使用个体防护设备。 上述材料的离心操作如果使用密封的离心机转子或安全离心杯,且它们只在生物 安全柜中开闭和装载感染性材料,则可在实验室中进行。
3 当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时,为防 止感染性材料溅出或雾化危害,必须使用面部保护装置(护目镜、面罩、个体呼吸 保护用品或其他防溅出保护设备)。
• 液氮罐
-196 ℃
(五) 实验室安全:
• 生物实验室安全,P1,P2,P3实验室安全
实验室安全
层流净化细胞培养室管理规则 一级生物安全防护实验室 二级生物安全防护实验室 三级生物安全防护实验室 四级生物安全防护实验室
层流净化细胞培养室管理规则
局部小环境空气 达到洁净度等级
层流净化细胞培养室的总体要 求:经济、有序、高效、安全。 初步制定相关制度如下:
8 紫外灯 :紫外线消毒。主要用于培养室空气、 操作台、塑料培养皿和培养板等表面消毒 。
9 电热干燥箱:干热消毒(160 ℃ ,2小时)。主要用干玻璃 器皿消毒 。
10蔡氏( Zeiss)滤器:过滤除菌,滤器中的滤膜 一般用0.2~0.3μm孔径的微 孔滤膜。凡在高温或 射线下易发生变性或失去功能的物质,如人工合 成培养液、血清、消化 用胰酶等都须用滤器过滤 除菌。
15
用于微生物、细胞、细菌、组织 培养、悬浮体、沉淀物等 的观察,并可将此过程中的任一形态拍摄下来。
2 酶标仪
3 微孔板震荡器
通过自动酶标仪计数来检测活细胞 数量。
主要用于酶标板、细胞培 养板(如6孔板、12孔板、 24孔板、48孔、96 孔板 等)等溶液的混匀或细胞 的混匀。
(四) 细胞保存条件:
相关主题